農(nóng)桿菌介導(dǎo)的君遷子遺傳轉(zhuǎn)化及轉(zhuǎn)基因植株抗性鑒定.pdf

1、君遷子（Diospyros lotus Linn.）是柿科柿屬植物的一個(gè)種，適應(yīng)性強(qiáng)，與柿親和性高，是柿常用的砧木。但其抗旱性弱，因此提高君遷子的抗旱性，將能更好地利用其優(yōu)良砧木特性。本研究通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化方法將本實(shí)驗(yàn)室克隆的FcWRKY70轉(zhuǎn)入君遷子中。主要研究結(jié)果如下：
　　1.君遷子葉片對(duì)抗生素敏感性試驗(yàn)。發(fā)現(xiàn)脫菌素頭孢霉素濃度低于400 mg/L時(shí)，仍有農(nóng)桿菌生長；頭孢霉素的濃度為400 mg/L時(shí)，既能抑制農(nóng)桿菌

2、生長又對(duì)君遷子葉片再生影響較小，愈傷組織形成率為41.66％；高于400 mg/L則對(duì)君遷子葉片再生影響較為明顯?？敲顾貙?duì)君遷子再生影響較大，隨著卡那霉素濃度的增高，君遷子葉片黃化加重，愈傷形成率顯著降低，選擇5 mg/L作為篩選濃度最為合適。
　　2.農(nóng)桿菌介導(dǎo)君遷子遺傳轉(zhuǎn)化獲得55株再生苗，再生株系經(jīng)過PCR鑒定，獲得15株陽性苗。實(shí)時(shí)熒光定量分析表明FcWRKY70在其中8個(gè)系（＃9、＃11、＃12、＃16、＃17、＃18