枯草芽孢桿菌S37、S44防治棉花主要土傳病害效果及其itu基因克隆.pdf

1、目的：為了明確實(shí)驗(yàn)室前期篩選獲得的2株拮抗細(xì)菌S37和S44防治棉花主要土傳病害的效果和防治機(jī)理。
　　 方法：通過盆栽試驗(yàn)、小區(qū)試驗(yàn)和大田試驗(yàn)測定了拮抗細(xì)菌S37和S44對棉苗爛根病和棉花黃萎病的防治效果，并采用形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法對其進(jìn)行了鑒定，對其活性功能蛋白進(jìn)行了分離、純化和生理生化特性的測試，同時利用前人報道的枯草芽孢桿菌功能基因的特異性引物，采用PCR擴(kuò)增的辦法，尋找相關(guān)功能基因。
　　 結(jié)果:1.通過盆栽

2、、小區(qū)和大田試驗(yàn)，采用拌種和隨水滴施2次拮抗細(xì)菌S37和S44發(fā)酵液的辦法，明確了2株拮抗細(xì)菌對棉苗爛根病和棉花黃萎病的防治效果和應(yīng)用潛力，結(jié)果表明，在田間小區(qū)試驗(yàn)中，S44的相對防效為57%，高于種衣劑福多甲54.5%的相對防效，S37相對防效為47.8%。在重病田中2株拮抗菌發(fā)酵液施用后均表現(xiàn)出較好的防治棉花黃萎病的效果,其中S37在143團(tuán)和147團(tuán)的防病效果分別為51.3%和55.1%，增產(chǎn)效果分別達(dá)到7.43%和17.62%，

3、S44在143團(tuán)和147團(tuán)的防病效果分別為35.2%和39.3%，增產(chǎn)效果分別達(dá)到5.56%和15.51%。
　　 2.對S44抗菌粗蛋白進(jìn)行了純化和理化性質(zhì)測定，結(jié)果表明抗菌粗蛋白經(jīng)120℃處理30min后仍能保持較高的抑菌活性；對蛋白酶K不敏感；紫外照射和可見光均不影響其抑菌活性；經(jīng)甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯等多種有機(jī)溶劑處理后活性不喪失；同時該抗菌粗蛋白能有效抑制向日葵菌核病菌、立枯絲核菌、棉花枯萎病菌、西瓜枯萎病菌、棉花

4、黃萎病菌、番茄早疫病菌6種病菌菌絲的生長。
　　 3.以S37和S44的基因組DNA為模板，參考前人文獻(xiàn)設(shè)計了5對枯草芽孢桿菌特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，其中伊枯草菌素基因的特異性引物從S44基因組中擴(kuò)增到伊枯草菌素基因片段（itu44）。
　　 結(jié)論：1.兩株拮抗菌對棉苗爛根病和棉花黃萎病具有很好的防治效果，通過菌落形態(tài)特征觀察和16S rDNA分析將2株拮抗細(xì)菌S37和S44鑒定為枯草芽孢桿菌Bacillus subt