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文檔簡介
1、A-FABP(Adipocyte fatty acid binding protein,也稱aP2)即脂肪型脂肪酸結(jié)合蛋白是脂肪酸結(jié)合蛋白家族(FABPs)之一,該家族還包括心臟型(H-)、腦型(B-)、髓磷脂型(M-)、表皮型(E-)、回腸型(IL-)、肝臟型(L-)、睪丸型(T-)、小腸型(I-)脂肪酸結(jié)合蛋白。FABPs被認為是運輸細胞內(nèi)脂肪酸非常重要的蛋白,它們可以增加脂肪酸的溶解性并將脂肪酸從脂膜運輸?shù)街舅嵫趸奈恢茫ň€粒體
2、,過氧化物酶體)、脂肪酸脂化成甘油三酯或磷脂的位置,或者進入細胞核內(nèi)發(fā)揮其可能的調(diào)控功能。FABPs在脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)上起到了重要的作用。
國內(nèi)外學(xué)者對雞A-FABP基因外顯子或內(nèi)含子區(qū)進行了少數(shù)變異位點的多態(tài)性研究,結(jié)果表明在一些品種中變異位點對腹脂性狀有顯著的影響。本研究將進行多位點檢測,并且在檢測外顯子同時,將檢測區(qū)域擴展到5’-調(diào)控區(qū)及3'-調(diào)控區(qū),以期對A-FABP基因進行全面研究。選用肉雞高、低脂雙向選擇品系第十
3、世代雞群、東北農(nóng)業(yè)大學(xué)F2資源群體、AA肉雞隨機群體為試驗材料,采用測序、PCR.RFLP、PCR-L、DHPLC的方法進行基因多態(tài)性檢測和個體基因型分析,通過各多態(tài)位點間的連鎖不平衡分析選擇標簽SNP并構(gòu)建單倍型,進而利用單位點不同基因型和不同單倍型分別與雞生長和體組成性狀進行關(guān)聯(lián)分析,旨在探A-FABP基因多態(tài)性對雞生長和體組成性狀的影響。主要研究結(jié)果如下:
(1)以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)肉雞高、低脂雙向選擇品系第十世代雞群為試
4、驗材料,通過測序、PCR-RFLP、PCR-LP、DHPLC的方法在A-FABP基因上共檢測到8個突變位點,其中5’-調(diào)控區(qū)檢測到5個突變位點,分別是g.-1376 G>A、g.-1117 C>T、g.-972_-963 del10、g.-846_-845 ins22、g.-415_-409 del7;外顯子1、外顯子3及3’-調(diào)控區(qū)各檢測到1個突變位點,分別是g.51 C>T、g.1729 G>A、g.3163 T>C。連鎖不平衡分析
5、表明,g.-1376 G>A、g.-1117 C>T、g.-972_-963 del10、g.-846_-845 ins22處于強連鎖狀態(tài),位于一個單倍型塊中,g.-415_-409 del7與g.51 C>T、g.1729 G>A處于第二個單倍型塊中。g.-1376G>A、g.-1117C>T、g.-972_-963 del10、g.-415_-409del7、g.3163T>C為標簽SNPs。以NEAU-F2資源群體為試驗材料,進行
6、連鎖不平衡分析,發(fā)現(xiàn)g.-972_-963 del10、g.-846_-845 ins22、g.51 C>T、g.1729 G>A處于強連鎖狀態(tài),位于一個單倍型塊中。g.-846_-845 ins22、g.1729 G>A為標簽SNPs。
(2)以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)肉雞高、低脂雙向選擇品系第十世代雞群為試驗材料,對A-FABP基因的8個突變位點(g.-1376 G>A、g.-1117 C>T、g.-972_-963 del10、
7、g.-846_-845 ins22、g.-415_-409 del7、g.51 C>T、g.1729 G>A、g.3163 T>c)進行基因型檢測。將產(chǎn)生的不同基因型在高、低脂系第十世代雞群進行基因型頻率分析及等位基因頻率分析,并對等位基因頻率進行卡方獨立性檢驗(x2)。結(jié)果表明,基因型頻率在高脂系和低脂系中分布差異很大,尤其是g.-415_-409 del7位點,僅有9個Ⅱ基因型。等位基因頻率分析表明除g.-1117 C>T、g.-9
8、72_-963del10外,其它6個多態(tài)位點等位基因頻率在十世代兩系間存在極顯著差異(P<0.01)。
(3)以東北農(nóng)業(yè)大學(xué)肉雞高、低脂雙向選擇品系第十世代雞群為試驗材料,進行8個單位點及4種單倍型與雞生長和體組成性狀的相關(guān)分析。兩方面結(jié)果表明不同基因型和單倍型對肌胃重、肌胃率有顯著影響;以NEAU-F2資源群體為試驗材料,進行4個單位點及4種單倍型與雞生長和體組成性狀的相關(guān)分析,結(jié)果表明不同基因型和單倍型對雞6周齡體重、
9、12周跖長、脾臟比率、肌胃重、肌胃比率、跖爪重有顯著影響(P<0,05),對龍骨長、股骨長、小胸肌重、小胸肌率有極顯著影響(P<0.01)。以AA肉雞隨機群體為試驗材料,進行2個單位點與雞生長和體組成性狀的相關(guān)分析,結(jié)果表明g.-972_-963 del10異位點不同基因型對所有性狀均無顯著影響(P>0.05):g.-846_-845 ins22變異位點不同基因型對雞5周齡體重、脾臟重有顯著影響(p<0.05),對其它性狀均無顯著影響(
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