微生物標本正確采集及運送

1、微生物標本正確采集及運送,標本采集的意義,明確診斷真正致病菌病情追蹤指導制定治療措施抗生素選擇抗生素更換預后推測減少細菌耐藥性,,,,,,,,結果無意義,規(guī)范化采集,不符合要求,,提供重要臨床感染信息,處理失當造成 污染,誤導臨床,,,,標本,,,,檢驗前誤差,檢驗前誤差：病人準備、標本采集、標本儲存及運送不規(guī)范,Clin Chem. 2007 Jul;53(7):1338-42. Epub 2007 May 24

2、Clin Chem Lab Med. 2006;44(6):750-9,檢驗前誤差是導致檢驗結果失真的最主要原因之一,細菌診斷標本采集原則,用抗菌素前采集，不同時期、不同標本采樣時嚴格執(zhí)行無菌操作，避免污染采集真正病灶處且足量標本→避免假陰性標本需新鮮，不可添加防腐劑立即送檢→愈新鮮標本愈容易分離病原菌,痰液標本采集,采集時間：晨痰，因晨痰量多，且含菌量也多先以冷開水漱口刷牙，有假牙者應取下假牙做深呼吸數(shù)次后收腹用力深咳將

3、痰吐到寬口無菌加蓋容器2小時內(nèi)送達檢驗室（未能及時送檢于4℃保存）（苛養(yǎng)菌如肺炎鏈球菌減少，正常菌過度生長）年老體弱、無力咳痰、下呼吸道分泌物不多時,怎辦？,痰標本采集,耐心宣講，取得患者合作翻身叩背，附著痰液松動易于排出霧化吸入生理鹽水或高滲鹽水，使痰液稀薄，痰液增多，而易于排出,標本質量,帶血痰,唾液,膿痰,白色粘液痰,黃色粘液樣痰,唾液痰,,,粘液絲,,衛(wèi)生部醫(yī)政司《全國臨床檢驗操作規(guī)程》,鱗狀上皮細胞SBC>2

4、5 白細胞WBC25 /每低倍視野為合格痰 =接受培養(yǎng),衛(wèi)生部醫(yī)政司《全國臨床檢驗操作規(guī)程》,鱗狀上皮細胞SBC>25 白細胞WBC>25 /每低倍視野鱗狀上皮細胞SBC10-25 白細胞WBC>25 /每低倍視野,衛(wèi)生部醫(yī)政司《全國臨床檢驗操作規(guī)程》,白細胞吞噬革蘭陰性桿菌 / 革蘭陽性球菌未見白細胞吞噬,,,血液標本采集,采集時機消毒規(guī)范雙側雙瓶,最佳采血時機-1,,研究指出：在使用抗生素前采血

5、，陽性率是用藥后采血的2.2倍！,最佳采血時機-2,病人準備：正確消毒方式,培養(yǎng)瓶消毒：以75%酒精消毒瓶口皮膚消毒：采血點由內(nèi)往外，以75%酒精用力涂抹皮膚內(nèi)往外劃圈用力涂抹皮膚，待干燥以達殺菌效果（等待時間：碘伏約1-3分鐘，碘酊約30秒）75%酒精由內(nèi)往外去除碘液，避免污染,血培養(yǎng)采集,綠色蓋子：含活性炭需氧橘色蓋子：含活性炭厭氧紫色蓋子：普通厭氧藍色蓋子：普通需氧黃色蓋子：普通小兒瓶,血培養(yǎng)采集,雙側雙瓶,為何

6、？,提高陽性率,判斷污染與否,影響血培養(yǎng)陽性率因素,,血培養(yǎng)的組合與檢出率,J Clin Microbiol. 2007; 45:3546-3548,致病菌和污染菌的鑒別,真正菌血癥：分離有毒力的菌株肺炎鏈球菌克雷伯菌屬假單胞菌屬金黃色葡萄球菌腸桿菌科念珠菌屬存在危險因素免疫抑制假體手術留置導管多部位分離相同菌株,污染菌培養(yǎng)時間長后續(xù)培養(yǎng)沒有可重復性分離多種微生物臨床情況不提示存在感染分離皮膚定植菌凝

7、固酶陰性葡萄球菌：類白喉桿菌桿菌屬,3天陰性的血培養(yǎng)->需重送檢,有臨床意義的分離菌：在2天內(nèi)被檢出占94%，在3天內(nèi)被檢出占97%,J Clin Microbiol. 2005; 43:2506-2509,97％,,,做厭氧血培養(yǎng)的價值？,只做需氧瓶不做厭氧瓶培養(yǎng)19%-29%的菌株不能發(fā)現(xiàn)5%的血培養(yǎng)延遲1天報告陽性結果采集厭氧瓶同時增加采血量每增加1 ml血液?陽性率增加3%Clin Infect Dis

8、, 1999,29:1309-1311中華檢驗醫(yī)學雜志，2000，23：285Eur J Clin Microbiol Infect DDis, 2001,20:217-219,采集方式嚴格無菌皮膚消毒穿刺針穿刺抽取無菌試管或針筒直接送檢(亦可直接打入血瓶內(nèi)送檢-同時具增菌功能，縮短TAT)即時送檢、不能冷藏做厭氧培養(yǎng)輸送過程嚴禁接觸環(huán)境氧,無菌體液采集,腦脊液采集,采集方式：碘酒、酒精消毒皮膚L3，L4間穿刺入蜘蛛膜

9、穿刺后分裝3-5 ml至無菌試管檢測細菌、病毒 >1 ml檢測真菌、抗酸菌> 2 ml注意事項：迅速送至實驗室細菌培養(yǎng)保存于35℃溫箱或室溫，因嗜血桿菌及奈瑟氏菌對溫度敏感檢測病毒、真菌、分支桿菌4℃保存,L3 L4 L5,尿液,清潔中段尿（自然排尿）直接導尿?可能下尿道細菌引入膀胱，導致繼發(fā)感染常規(guī)法消毒尿道外圍以無菌方式將導管插入膀胱恥骨上膀胱穿刺法 (厭氧檢查適用)導管消毒后以空針抽取5-10m

10、l尿液有尿路感染癥狀但中段尿培養(yǎng)菌數(shù)很少小兒收集包留置尿導管收集法O 穿刺導尿管吸取尿液X 尿液收集袋中采集,女性肥皂清洗尿道外圍以無菌紗布擦拭用手分開大陰唇先排出前段尿液，再以無菌寬口容器收集中段尿液,男性肥皂清洗尿道外圍以無菌紗布擦拭扶起莖陰翻上包皮先排出前段尿液，再以無寬口容器收集中段尿液,最好留取早晨清潔中段尿標本,自然排尿-中段尿,尿標本采集注意事項,留取尿培養(yǎng)標本時需以無菌操作

11、注明是否使用抗生素女患者月經(jīng)期不宜留取尿標本會陰部分泌物過多，應先清潔沖洗再收集4-8℃保存不可超過24小時標本如不能立即送檢，應存放于冰箱,生殖泌尿道標本,依不同感染種類和病變特征采集不同標本尿道標本，用生理鹽水局部清洗，無菌棉拭子插入尿道口1-2 cm停留十余秒，輕輕旋轉拭子外陰部糜爛、潰瘍，生理鹽水清洗后取病灶邊緣分泌物陰道和宮頸口分泌物須在窺陰器下用長拭子采集子宮內(nèi)分泌物用無菌導管外套一層保護膜，插入子宮后再刺穿

12、該膜予負壓吸引，可減少陰道菌群污染女性盆腔膿腫，應局部消毒陰道由子宮陷凹處進針抽取,生殖泌尿道標本,2支無菌棉花拭子分2次收集，其中一支直接涂片發(fā)育期或成年婦女抹片：尿道口、子宮頸或直腸年幼女童：外陰部位取標本男性：前列腺液需進行前列腺按摩獲取懷疑急性淋?。耗虻婪置谖飸岩陕粤懿。呵傲邢倩蚓易⒁馐马棧毫芫炔≡鷻z測需避免正常菌污染，取時盡量小心淋菌低溫會死亡，采取后請勿延誤，速送細菌室培養(yǎng),傷口、膿瘍、膿,以70%

13、 酒精消毒采檢表面開放式傷口：以棉棒采取深部標本封閉式傷口：以空針抽?。s1ml）如需厭氧培養(yǎng)，避免接觸空氣并及時送檢，最好床邊接種，可直接打入?yún)捬跹浚ㄔ鼍Ч眩?糞便,自然排便挑取帶膿或血部分（> 2g）液狀糞便取絮狀物（> 2ml）置于無菌容器或置于保存液或增菌液送檢直腸拭子肥皂、水和70%的酒精清潔肛門周圍棉棒插入括約肌約 4-5cm（幼兒約2-3cm）輕輕的旋轉數(shù)圈后送檢,注意事項,注意事項：

14、調(diào)取糞便的粘液、組織、膿或血液部分送檢前與微生物科聯(lián)絡，注明培養(yǎng)項目。沙門和志賀菌、致病性大腸桿菌、弧菌、念珠菌、菌群失調(diào)（難辨梭菌）懷疑沙門菌感染應在發(fā)病2周后采集標本,標本運送、儲存溫度,標本送檢時間限制,15 分鐘,導管CSF眼結膜/角結膜檢體體液胃液羊水鼻咽組織,標本送檢時間限制,2小時,膿瘍、傷口、濃血液培養(yǎng)耳直腸拭子生殖道標本痰、呼吸道標本尿液,所有送檢的檢體都不要超過2小時的時間,病原微生物