臨床微生物標(biāo)本采集規(guī)范

1、臨床微生物標(biāo)本采集規(guī)范,天祝縣人民醫(yī)院蔡福元2017-04-13,主要內(nèi)容,標(biāo)本規(guī)范化采集的重要性國內(nèi)微生物標(biāo)本的采集目前存在的問題 微生物標(biāo)本采集基本原則臨床微生物標(biāo)本的采集,標(biāo)本規(guī)范化采集的重要性,正確采集、處理與運送細菌培養(yǎng)的標(biāo)本直接關(guān)系到致病菌培養(yǎng)的正確性與陽性率的高低，是臨床細菌檢驗成功的關(guān)鍵。標(biāo)本質(zhì)量的好壞直接影響診斷結(jié)果的正誤，不當(dāng)?shù)臉?biāo)本可導(dǎo)致假陰性、假陽性結(jié)果的出現(xiàn)，因此標(biāo)本采集與處理的規(guī)范化是準(zhǔn)確、及時

2、地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎(chǔ)。好的微生物檢驗標(biāo)本可提升實驗室工作效率及病患照顧質(zhì)量，降低醫(yī)療成本。,國內(nèi)微生物標(biāo)本的采集目前存在的問題 標(biāo)本送檢率低 從全國來看，抗感染治療前，送檢相關(guān)標(biāo)本可能只占應(yīng)送標(biāo)本的一半左右，與抗菌藥物應(yīng)用率之高形成鮮明的反差。一些醫(yī)師在經(jīng)驗性治療受挫后方送標(biāo)本，此時已失去陽性培養(yǎng)的機會。 標(biāo)本有缺陷 正確收集各種臨床標(biāo)本，關(guān)注特檢標(biāo)本采樣與送檢的方法和條件，是完成病原學(xué)診

3、斷的先決條件。,如何提高細菌陽性檢出率,標(biāo)本采集時機標(biāo)本采集方法標(biāo)本的質(zhì)與量標(biāo)本的運送與保存鏡檢篩選合格標(biāo)本高質(zhì)量、多種分離培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境臨床醫(yī)生對報告單的解讀及抗生素合理使用,,,微生物標(biāo)本采集基本原則1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本3.采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作4.采樣后立即送檢甚至床旁接種尤其是厭氧培養(yǎng)5.混有正常菌群污染標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)6.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒

4、劑7.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康?臨床微生物標(biāo)本采集（一）血培養(yǎng)檢測采血指征 臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血液感染的患者 1. 發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃） 2. 寒戰(zhàn) 3. 白細胞增多（>10×109/L，特別有“核左移”未成熟的或桿狀核白細胞增多） 4. 粒細胞減少（成熟的多核白細胞<1×109/L）,5 . 血小板減少6．皮膚粘膜出血7．昏迷，

5、休克8．多器官衰竭9. CRP升高在評估可疑新生兒敗血癥時，除發(fā)熱或低燒外，很少培養(yǎng)出細菌，應(yīng)該補充尿液和腦脊液培養(yǎng)。 對入院危重感染患者未進行系統(tǒng)性抗菌藥物治療之前，應(yīng)及時采集血培養(yǎng)。,要求：嚴(yán)格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手按壓靜脈，除非帶有無菌手套。不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭， 采用真空采血裝置能降低污染率。說明： 無論采用何種采血方法，血培養(yǎng)可接受的污染率通常是≤3%。研究表明，經(jīng)過專門

6、培訓(xùn)的熟練抽血者采集血培養(yǎng)的污染率為3%，而未經(jīng)培訓(xùn)的住院醫(yī)生和護士污染率則達11%。因此對臨床護士就血培養(yǎng)標(biāo)本采集進行專門的、嚴(yán)格的培訓(xùn)是非常必要的。,（二）血培養(yǎng)標(biāo)本采集和運送 1.采集時間 要求：對懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，在考慮使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。必須同時或間隔短時間內(nèi)采集2套（每套包括1只普通血培養(yǎng)瓶及1只厭氧血培養(yǎng)瓶）以上血培養(yǎng)標(biāo)本。,,說明：實驗數(shù)據(jù)表明細菌入血后約1小時，寒戰(zhàn)和發(fā)燒開始出現(xiàn)2

7、小時內(nèi)，此時為采集血培養(yǎng)標(biāo)本進行病原菌培養(yǎng)的最佳時機。在不同的時間點采血只有在以下情況才有必要：疑似感染性心內(nèi)膜炎或其他血管內(nèi)（如導(dǎo)管相關(guān)性感染）感染患者的連續(xù)性菌血癥。,,為了提高病人血培養(yǎng)的陽性率，最好的抽血時間是：,A.發(fā)熱開始時 　　B.寒戰(zhàn)開始時 　　C.發(fā)熱最高峰時 　　D.寒戰(zhàn)結(jié)束時 　　E.預(yù)計寒戰(zhàn)發(fā)熱前,2.采集部位 要求：從兩側(cè)上肢靜脈采血，“雙瓶雙側(cè)”采血培養(yǎng)。至

8、少做到“雙側(cè)雙瓶”。必要時從下肢靜脈采血做第三套血培養(yǎng)。 說明：不建議采集（1）動脈血，因其診斷價值沒有比靜脈血更大；（2）靜脈留置導(dǎo)管，因其常伴有高污染率。如果必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血，也應(yīng)同時從外周靜脈采集另外一個血培養(yǎng)標(biāo)本，以幫助陽性結(jié)果的判讀。,所謂“雙瓶雙側(cè)”，是指從一個部位采血接種一套培養(yǎng)瓶，再從另一部位采血接種另一套培養(yǎng)瓶。（通常是雙臂） 所謂“雙側(cè)雙瓶”，是指從一個部位采血接種一個需氧瓶，再從另一部位采血接

9、種另一個厭氧瓶。 一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單個血培養(yǎng)。,3.采集次數(shù)要求：對懷疑菌血癥、真菌血癥的成人患者，推薦同時采集2~3套（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本（即雙瓶雙臂同時采集血培養(yǎng)標(biāo)本）。 嬰幼兒患者，推薦同時采集2次（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本。說明：除特殊情況之外，在采取血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，無需重復(fù)采取血培養(yǎng)。因為抗菌治療的2至5天內(nèi)，血液中的細菌不會立即消失。研究證明，血培養(yǎng)只做1套的檢出率為65%，做2套和

10、3套的檢出率分別為80%和96%。單瓶的血培養(yǎng)檢出率不高，而且結(jié)果很難做出臨床解釋。,4.采血量要求： 成年患者推薦的采血量為每套不少于10ml， 每瓶不少于5ml。 嬰幼兒患者推薦的采血量為每瓶不少于2ml。,說明： 血標(biāo)本采集的量是影響檢出率的最重要的因素。成人血培養(yǎng)采血量在2~30ml之間，病原菌檢出率與采血量成正比例增長。每增加1ml的血液，病原菌的檢出率增加3.2%。兒童患者因為血液中病原菌濃

11、度較高，血培養(yǎng)量無需等同于成人。對血液病患者或者血容量相對較低的患者建議使用兒童瓶來減少血液的采集量增加病原菌的檢出率。,5.血液標(biāo)本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配要求：一個需氧瓶和一個厭氧瓶為一套血培養(yǎng)，作為常規(guī)血培養(yǎng)的組合。說明：采用一對需氧瓶+厭氧瓶組合，比采用二個需氧瓶的組合可檢出能更多的葡萄球菌、腸桿菌科細菌和厭氧菌。而且，采兩瓶可以保證足夠的采血量。當(dāng)被用來做培養(yǎng)的采血量少于推薦值時，血必須首先接種需氧瓶，然后將剩余的血液接種

12、入?yún)捬跗?。因為多?shù)菌血癥是由需氧和兼性需氧細菌造成的，而這些細菌從需氧瓶中更好的被分離。,由于嬰幼兒患者厭氧菌所致菌血癥比較罕見，嬰幼兒血培養(yǎng)可以僅用需氧瓶，為提高檢出率、區(qū)分污染菌，應(yīng)采用兩只需氧瓶為一組血培養(yǎng)。仍然采用雙側(cè)雙瓶的采血方式。,6.血培養(yǎng)標(biāo)本的運送要求：（1）采集后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)在1小時之內(nèi)送往實驗室。（2）血培養(yǎng)瓶在接種前和接種后均不得冷藏和冷凍。說明：血培養(yǎng)瓶冷藏或冷凍會將一些微生物殺滅，將裝著液體的容器冰凍也會

13、使容器破裂。,二 、下呼吸道（痰培養(yǎng)）標(biāo)本采集規(guī)范標(biāo)本采集方法醫(yī)師或護士直視下采集標(biāo)本病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液,臨床上約半數(shù)咳痰標(biāo)本不合格！咳痰途徑口咽部不可避免地受到污染。唾液中口咽部定植菌的濃度可達108 ～109/ml。研究顯示，國內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。,合格標(biāo)本的判斷標(biāo)準(zhǔn)： 外觀：觀察顏色、粘度、有無血絲或膿。若標(biāo)本為水狀且很明顯是唾液，則應(yīng)拒收。為

14、了判定是否來自下呼吸道的痰，需檢查是否為合格的痰標(biāo)本。白細胞＞25個/低倍鏡視野、鱗狀上皮細胞＜10個/低倍鏡視野為合格標(biāo)本。采集合格標(biāo)本對細菌的診斷極為重要。,,合格痰液標(biāo)本,不合格痰液標(biāo)本,（一）采集指征凡是發(fā)熱、咳嗽和咳痰，痰呈膿性、粘稠或血性，并伴有胸痛、氣急，肺部聞及濕羅音，外周白細胞總數(shù)及中性粒細胞比例明顯增高，X線檢查提示肺部有炎性浸潤或胸腔積液，甚至出現(xiàn)感染性休克和呼吸衰竭等患者，應(yīng)采集痰液或下呼吸道標(biāo)本。,對可疑烈性

15、呼吸道傳染?。ㄈ鏢ARS、肺炭疽、肺鼠疫等）患者采集檢驗標(biāo)本時必須注意生物安全防護。對于細菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)2-3天；不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀改變；懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢,（二）采集方法1、自然咳痰法 以晨痰為佳。用清水反復(fù)漱口，用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入無菌容器中，盡快送檢。否則有的細菌（如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌）在外界可能死亡。不能及時送檢的標(biāo)本，室溫保存≤

16、2h。要求采到肺深部的痰液，不要唾液。,在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本;標(biāo)本采集后1-2h內(nèi)必須立即進行實驗室處理；咳痰標(biāo)本應(yīng)用最早且廣泛，但也是最受爭議的標(biāo)本 ;取標(biāo)本前應(yīng)摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口;深咳，采集標(biāo)本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo);,2.小兒取痰法　用彎壓舌板向后壓舌，用棉拭子深入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部和氣管分泌物，粘在棉拭子上送檢。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。3.支氣管鏡采集法

17、 –-經(jīng)支氣管鏡直接吸引 –-支氣管肺泡灌洗 –-防污染樣本毛刷,（三）注意事項1. 痰標(biāo)本不能及時送檢者，可暫存4℃冰箱。室溫下耽擱數(shù)小時，定植于口咽部的非致病菌過度生長而肺炎鏈球菌、葡萄球菌和流感嗜血桿菌檢出率則明顯降低。,2. 在臨床上咳痰仍是診斷肺部感染最常用的標(biāo)本，但咳痰也最易被口咽部正常菌群污染。痰液標(biāo)本的細菌學(xué)檢驗，必須區(qū)分是病原菌還是來自上呼吸道的正常菌群。經(jīng)過洗滌處理的痰液或自氣管鏡采集及氣管穿刺

18、所獲標(biāo)本，結(jié)果比較可靠。,3.由于口腔和咽部存在大量的革蘭陽性和革蘭陰性厭氧細菌，而且缺乏可靠的方法區(qū)分它們究竟是致病菌還是定植菌，因此不主張對咳痰標(biāo)本進行厭氧菌培養(yǎng)。4. 約有1/4-1/2肺部感染患者可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時做血培養(yǎng)。,三 、尿培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范（一）尿培養(yǎng)標(biāo)本送檢指征1. 有典型的尿路感染癥狀；2. 有肉眼膿尿或血尿；3. 尿常規(guī)檢查白細胞或亞硝酸鹽陽性；4. 有不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；5. 留置

19、導(dǎo)尿管的患者出現(xiàn)發(fā)熱；6. 膀胱排空功能受損；,7. 泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前；8. 有尿路感染癥狀者，前次培養(yǎng)結(jié)果陰性或抗菌治療48h后仍持續(xù)發(fā)熱。9. 抗生素停藥后，感染癥狀再次出現(xiàn)。,（二）尿培養(yǎng)標(biāo)本采集方法 1．清潔中段尿 留取清晨清潔中段尿標(biāo)本，先用肥皂水仔細清洗會陰部，再用清水沖洗尿道口周圍；將前段尿排去，留取中段尿10ml左右于無菌容器內(nèi)，立即加蓋送檢，2h內(nèi)接種。該方法簡單、易行，是最常用的尿標(biāo)本收集方法，但是容易

20、受到會陰部細菌污染。,2．恥骨上膀胱穿刺 使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮膚消毒穿入膀胱吸取尿液，是評估膀胱內(nèi)細菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法，主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本的采集。 3．直接導(dǎo)尿 按常規(guī)方法對會陰局部進行消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液，可減少尿液標(biāo)本污染，準(zhǔn)確地反映膀胱感染情況。但有可能下尿道細菌進入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。,4．小兒收集包 無自控能力的小兒可用收集包收集尿液，

21、這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗結(jié)果為陰性時才有意義。如果檢驗結(jié)果為陽性，應(yīng)結(jié)合臨床進行分析，必要時可使用膀胱上穿刺或?qū)蚍羧?biāo)本進行復(fù)檢。,5．留置導(dǎo)尿管收集尿液 用導(dǎo)尿管導(dǎo)取10-15ml尿液置滅菌容器內(nèi)送檢。長期留置導(dǎo)尿管者，應(yīng)在更換新導(dǎo)尿管后留取尿標(biāo)本。留置導(dǎo)尿患者應(yīng)消毒導(dǎo)尿管外部及尿管口，采取無菌操作方法，用注射器通過導(dǎo)尿管吸取尿液。注意防止混入消毒劑，不能從尿液收集袋中采集尿液。,（三）采集時

22、間和標(biāo)本運送 1.應(yīng)選擇在抗菌藥物應(yīng)用前或停用抗菌藥物5天后采集尿液。2.通常采集清晨第1次尿液送檢，確保尿液在膀胱內(nèi)停留4h以上，使細菌有足夠時間繁殖。囑患者睡前少飲水以免尿液稀釋。3.懷疑沙門菌感染時應(yīng)在發(fā)病2周左右采集尿液培養(yǎng)。,4.對無癥狀的患者應(yīng)連續(xù)采集3天晨尿送檢。5.懷疑結(jié)核分枝桿菌感染時，患者應(yīng)停藥1-2天后采集晨尿或24h尿的沉渣部分10-15ml送檢。6. 標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢、及時接種，室溫下保存時間不得

23、超過2h（夏季保存時間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存），冷藏保存標(biāo)本必須在6h內(nèi)進行接種，但冷藏保存的標(biāo)本不能用于淋病奈瑟菌培養(yǎng)。,（四）注意事項1. 由于自然排尿收集的標(biāo)本很難避免會陰部及下尿道細菌污染，所以需要定量接種、合理評價才能判斷培養(yǎng)的細菌是否與尿路感染有關(guān)。尿標(biāo)本菌落計數(shù)中革蘭陰性桿菌數(shù)>105CFU/ml 或革蘭陽性球菌數(shù)>104CFU/ml時有臨床診斷意義。 （不是絕對的，受多因素影響，綜合判斷）,2. 尿液標(biāo)本的采

24、集和培養(yǎng)中的問題是污染雜菌，故應(yīng)嚴(yán)格進行無菌操作。3. 尿標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，以免污染，尿液中不得加防腐劑和消毒劑。4.除非是流行病學(xué)調(diào)查，長期留置導(dǎo)尿管患者常規(guī)尿培養(yǎng)沒有臨床意義，大量病原菌?？稍谶@類患者中檢出，導(dǎo)尿管留置時間延長易導(dǎo)致與引起患者尿道感染不一致的微生物定植生長；,5.不可從集尿袋的下端管口留取標(biāo)本，集尿袋內(nèi)的尿液也不能用于培養(yǎng)，可能會引起污染；6.臨床常讓患者留取清潔中段尿，應(yīng)該在醫(yī)護人員監(jiān)督指導(dǎo)下讓患者正確的

25、留取清潔中段尿；7.由于種種原因，患者常常不能正確地留取清潔中段尿，實驗室只是針對尿液標(biāo)本培養(yǎng)的結(jié)果進行評估，或常常由于分析前尿液標(biāo)本污染了多種細菌無法正確解釋的結(jié)果，可能延誤了臨床的正確診斷和治療。,四、 大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范 （一）采集時間腹瀉患者應(yīng)在急性期，并盡可能在使用抗生素之前采集新鮮糞便；傷寒患者在發(fā)病2周以后。（二）采集方法1．自然排便采集法 自然排便后，挑取有膿血或黏液部位的糞便2-3g ，液狀糞便取絮狀物

26、盛于無菌的容器內(nèi)或置于保存液或增菌液中送檢。,2．直腸拭子采集法 對不易獲得糞便或排 便困難的患者及嬰幼兒，可采用直腸拭子 法采集標(biāo)本，其方法是將拭子前端用甘油 濕潤。然后插入肛門約4～5cm（幼兒約 2～3cm）處，輕輕在直腸內(nèi)旋轉(zhuǎn)，擦取直 腸表面粘液后取出，盛入無菌試管或保存 液中送檢。,（四）注意事項,在腹瀉發(fā)病的正確時間收集標(biāo)本，病人應(yīng)盡量在急性期（3d）內(nèi)和用藥前采集標(biāo)本，以提高檢出率。大便標(biāo)本中含

27、有很多雜菌，糞便標(biāo)本的采集須注意防止外界臟物污染，盡量采用無菌容器。為提高陽性檢出率，要采集新鮮標(biāo)本，立即送檢。,五、 泌尿生殖道標(biāo)本采集規(guī)范 （一）標(biāo)本采集 1、尿道分泌物 （1）女性尿道：患者排尿1小時后采集，首先拭去尿道口的滲出物；再用拭子通過陰道，靠著恥骨聯(lián)合，按摩尿道，采集分泌物；如未獲得分泌物，清洗外尿道，用滅菌紗布或棉球擦拭，用泌尿生殖道拭子插入尿道2－4cm，旋轉(zhuǎn)拭子2秒。,（2） 男性尿道：用泌尿生殖

28、道拭子插入尿道腔2－4cm，旋轉(zhuǎn)拭子，至少停留20秒，而使之容易吸收。2、生殖道分泌物 （1）陰道分泌物:擦除過多的分泌物和排出液，用無菌棉拭子采取陰道口內(nèi)4厘米內(nèi)側(cè)壁或后穹窿處分泌物，如果需要涂片，需再用一個拭子。,（2）男性前列腺：用前列腺按摩法采集前列腺液。清洗尿道口，沖洗尿道膀胱，從肛門用手指按摩前列腺，使前列腺液溢出，用無菌容器收集。無肉眼可見膿液時，可用滅菌拭子輕輕伸入前尿道內(nèi)，旋轉(zhuǎn)拭子采集標(biāo)本。,（二）注意

29、事項 1.生殖器是開放性器官，標(biāo)本采集過程中 應(yīng)嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)程以減少雜菌污 染。 2.由于陰道正常菌群的存在而使細菌的分 離鑒定受到干擾，所以在采集女性生殖 道標(biāo)本時應(yīng)注意盡量減少或避免正常菌 群的污染。,3.疑有宮腔感染，如遇產(chǎn)婦需行剖宮產(chǎn)，待胎兒娩出后取宮腔分泌物，并同時取嬰兒耳拭子一同送檢。4.沙眼衣原體和病毒均在宿主細胞內(nèi)繁殖，取材

30、時拭子應(yīng)在病變部位（移行上皮處稍內(nèi)）停留十幾秒鐘，并采集盡可能多的上皮細胞。,5. 生殖道感染厭氧菌也較多見，疑有厭氧 菌 感染時，標(biāo)本采集和運送應(yīng)避免與氧氣接 觸， 最佳方法是床邊采樣，直接接種至厭 氧裝置內(nèi)。 6. 淋病奈瑟菌檢查時，取材的深度一定要夠， 因為淋球菌好發(fā)于柱狀上皮細胞而不是復(fù) 層鱗狀上皮細胞。不論男女尿道及子宮頸 均需用拭子插入尿道及子宮頸

31、3cm深轉(zhuǎn)動 并停留10-30s取樣送檢。,7. 淋病奈瑟菌抵抗力低，對外環(huán)境變化頗 為敏感，對寒冷和干燥抵抗力很弱。因此， 為了保證培養(yǎng)有足夠的成功率，取材后 要盡快送檢，立即接種，標(biāo)本離體時間越 短越好。,六、 化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本采集規(guī)范（一）標(biāo)本采集1．開放性感染和已潰破的化膿灶 標(biāo)本采集 前先用滅菌生理鹽水拭去表面滲出物，盡可 能用抽吸或

32、將拭子深入傷口，緊貼傷口前沿 取樣，從膿腫底部或膿腫壁取樣，效果最好。 慢性感染，污染嚴(yán)重，很難分離到致病菌， 可取感染部位下的組織，研磨成組織勻漿接 種于適宜的培養(yǎng)基。,2．封閉性膿腫 局部消毒后用針及注射器抽 吸膿腫壁，將所有物質(zhì)置于無菌試管內(nèi)送檢， 疑為厭氧菌感染時立即作床邊接種或置于厭 氧轉(zhuǎn)運裝置送檢（針頭插一橡皮塞隔絕空 氣）。但取樣時，可能會帶入與感染過程無

33、 關(guān)的定植細菌。3．大面積創(chuàng)傷感染：可取感染組織塊或沾有 膿汁的內(nèi)層敷料送檢。,（二）注意事項 細菌對干燥敏感或只能采集少量標(biāo)本時， 用棉拭子采集標(biāo)本后立即放入液體培養(yǎng)基 內(nèi)，或采標(biāo)本前先將棉拭子沾少許肉湯以 保持標(biāo)本濕度。對于不能立即送檢的標(biāo)本，應(yīng)放4℃保存， 培養(yǎng)淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌的標(biāo)本除外。盡可能在用藥前采集標(biāo)本。采樣前病灶局部應(yīng)避免用抗菌藥物或消毒劑。,革蘭染色對標(biāo)本進行評估。涂

34、片中如出現(xiàn) 上皮細胞提示標(biāo)本已被污染。沒有上皮細胞 而有白細胞說明標(biāo)本采集正確。有的創(chuàng)傷均可有細菌污染，但不一定發(fā)生 感染，因此對分離到的細菌要根據(jù)創(chuàng)傷的 情況、菌量和種數(shù)，收集標(biāo)本的處理過程、 機體免疫力及抗生素的使用情況等多種因 素來分析判斷。,七、 穿刺液標(biāo)本采集規(guī)范 （一）腦脊液1. 采集時間： 懷疑為腦膜炎的病人，應(yīng)立即采集腦脊液，最好在使用抗菌藥物以前采集標(biāo)本。2. 采集方法： 用

35、腰穿方法采集腦脊液3-5ml，分裝到3個無菌試管中，每個試管1-2ml。第一管用于細菌培養(yǎng)! 也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶,用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。,3.標(biāo)本運送和保存： 腦膜炎奈瑟菌離體后會迅速自溶,肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌也很容易死亡,因此,標(biāo)本應(yīng)立即送檢,并注意保溫、防干燥。切不可置冰箱保存,否則會影響檢出率。 腦脊液標(biāo)本送檢的理想時間為15分鐘內(nèi)，半小時送檢是可接受的，如果送檢時間超過1小時，則會影響結(jié)果。如不能及時送檢，可

36、使用血培養(yǎng)瓶（懷疑腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染時，請勿使用血培養(yǎng)瓶）,（二）膽汁及其它穿刺液（胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液及鞘膜液等）1. 采集時間 ： 懷疑感染存在，應(yīng)盡早采集標(biāo)本，一般在患者使用抗菌藥物之前或停止用藥后2-3天采集。2. 采集方法①無菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本。②標(biāo)本采集量應(yīng)＞1ml。 胸腔積液、腹水可抽取10ml, 心包液、 關(guān)節(jié)液等可抽取2-5ml 。,③標(biāo)本采集后注入無菌小瓶或無菌試管

37、 中送檢也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶， 用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。為防止穿刺液的凝固，應(yīng)在無菌試管中 預(yù)先加入滅菌肝素，再注入穿刺液。,小結(jié),標(biāo)本采集和運送的規(guī)范化是微生物檢驗分析前質(zhì)量控制的重要內(nèi)容之一。ISO 15189的技術(shù)要素部分將實驗室檢驗全過程質(zhì)量保證分為三部分,即分析前質(zhì)量保證;分析中質(zhì)量保證;分析后質(zhì)量保證。有報道，有93%的實驗室誤差來自分析前，分析前階段的質(zhì)量控制是整個檢驗質(zhì)量控制中一個非常重要的環(huán)節(jié)，