醫(yī)學免疫學雙擴凝集反應

1、請不要開電腦,沉淀反應與凝集反應,,抗原（antigen, Ag）: 能夠刺激機體產生抗體和致敏淋巴細胞，并能與之特異性結合的物質。,抗體(antibody, Ab)： B細胞識別抗原后增殖分化為漿細胞所產生的可特異性結合抗原的一組糖蛋白。,,,抗原-抗體反應的特點與影響因素,反應條件： 適當的溫度 電解質 酸堿度,特點： 特異性 可逆性

2、 可見性（合適的抗原抗體比例）,凝集反應(agglutination):顆粒性抗原與抗體的反應。,沉淀反應(precipitation):可溶性抗原與抗體的反應。,補體參與的反應,免疫標記技術（immunolabelling technique）:用示蹤物質標記抗原或抗體，進行抗原-抗體反應的檢測。,,抗原-抗體反應的基本檢測方法,沉淀反應 ——雙向免疫擴散試驗,原理 用半固

3、體瓊脂凝膠作為介質，可溶性抗原、抗體在其中能自由擴散。將可溶性抗原和抗體分別加入瓊脂板上相對應的孔中，兩者各自向四周擴散，如果抗原和抗體相對應，則在兩者比例適當處形成白色沉淀線。,主要材料,器材：載玻片、EP管、微量加樣器、槍頭、 試劑：生理鹽水 抗原（正常小鼠IgG）、 抗體（兔抗小鼠IgG血清）,配制1%瓊脂：用生理鹽水配制，加熱溶解制板：趁熱將3.5ml融化瓊脂水平鋪在玻片上，

4、室溫下冷卻凝固打孔：用打孔器按圖示打孔稀釋抗體：取5支EP管，將抗體倍比稀釋加樣：周圍孔加入不同稀釋度的抗體，中間孔加入抗原瓊脂板放入濕盒內，置4℃，24-48小時后觀察結果。,實驗步驟,Ag,1,2,3,4,5,control,6,,結果判斷,,,應用,測定抗體的效價用特異性抗體檢測抗原檢查抗原和免疫血清的特異性、純度或濃度，比較抗原之間的異同點,凝集反應 ——ABO血型鑒定,原理

5、 顆粒性抗原(完整的病原微生物或紅細胞等)與相應抗體特異性結合，在有電解質存在的條件下，形成肉眼可見的凝集團塊。基本類型 直接凝集反應間接凝集反應、凝集抑制反應等。,直接凝集實驗（ABO血型鑒定）,器材：酒精棉球、滅菌干棉球、微量加樣器、 滅菌槍頭、玻片、一次性采血針試劑 抗A試劑（藍色）、抗B試劑（黃色）,主要材料,實驗原理,人類ABO血型抗原主要有A和B兩種，根據紅細胞表面這兩種抗原的有無可把血型

6、分為四種。據此，將抗A和抗B抗體分別與待測紅細胞混合，抗A或（和）抗B抗體與紅細胞表面上的相應抗原結合而引起紅細胞凝集，據其凝集情況便可判定出受試者的血型。,ABO血型的劃分,3,3,3,1,,ABO和Rh血型是與人類輸血關系最為密切的兩個血型系統。當一個人的紅細胞上存在一種D血型物質（抗原）時，則稱為Rh陽性，用Rh（+）表示；當缺乏D抗原時即為Rh陰性，用Rh（-）表示。,,Rh（-）的分布因種族不同而差異很大:白種人中的比例較

7、高，約百分之十五中國人群中； 新疆維吾爾等少數民族: 5%； 蒙古族人接近1%； 漢族人所占的比例極少，0.3%,1．取潔凈載玻片1塊，并標記（如圖）2．將抗A、B分型試劑分別加1滴于 標記有A、B的玻片兩側。3．用酒精棉消毒被檢者手指尖端，以采血針刺破皮膚，稍加擠壓，使血液流出。用另一載玻片一端取適量血液加入抗抗A分型試劑，并混勻；用另一端再取適量血液加入抗抗B分型試劑，并混勻。用干棉花止血。