草分支桿菌f.u.36對兒童急性白血病樹突狀細胞影響的研究_第1頁
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1、青島大學碩士學位論文草分支桿菌F.U.36對兒童急性白血病樹突狀細胞影響的研究姓名:葛云鵬申請學位級別:碩士專業(yè):兒科學(小兒血液與腫瘤)指導教師:孫立榮20080607第二部分:草分支桿菌E U .3 6 對兒童急性白血病外周血樹突狀細胞影響的研究目的探討草分支桿菌E U .3 6 混懸注射液( 烏體林斯,U t i l i n ' s ,L I ) 對兒童急性白血病外周血樹突狀細胞( D C ) 數(shù)量及功能的影響。方法應用F

2、 i c o l l .H y p a q u e 法分離急性白血病患者外周血單個核細胞( P B M C ) ,對照組:r h G M .C S F + r h I I 廠4 + 刪F - a ( G I T ) 誘導培養(yǎng)D C ;實驗組分為四組:單獨應用U t i l i n 7 s 組( U ) 和G I T 聯(lián)合不同濃度的U t i l i n ' s 組( G I T U l ,0 .8 6 n g /m l :G 1

3、 T U 2 ,1 .7 2 n g /m l ;G I T U 3 ,2 .5 8 n g /m 1 ) 誘導培養(yǎng)D C ,區(qū)別是于培養(yǎng)第3 天分別加入不同濃度的U t i l i n ' s 。光學顯微鏡下每日觀察D C 的形態(tài),培養(yǎng)8 天后收獲D C ,而后將D C與兒童急性白血病異體外周血淋巴細胞混合反應9 6 h 后觀察淋巴細胞的增殖情況,E L I S A 方法檢測上清中其I L - 1 2 、I F N - T 的

4、分泌情況;另將培養(yǎng)8 天后的H L - 6 0 抗原致敏后的D C 與已培養(yǎng)5 天淋巴細胞及H L - 6 0 細胞共孵育7 2 h ,觀察不同組別D C對淋巴細胞殺瘤作用影響的不同,M T I “ 法檢測其殺傷活性。結果培養(yǎng)8 天后,各組9 0 %以上的細胞表現(xiàn)出較為典型的樹突狀?;旌狭馨图毎磻@示:隨著刺激細胞的增加,T 細胞的擴增指數(shù)明顯增加,P 均< O .0 5 ;實驗各組其培養(yǎng)上清中I L - 1 2 、I F N

5、- T 的含量隨著U t i l i n ' s 濃度的增加,差異有顯著統(tǒng)計學意義,P 均< 0 .0 5 ;殺瘤活性結果顯示:實驗各組與對照組殺傷活性比較差異均有顯著統(tǒng)計學意義,( t 分別為3 .0 0 7 8 、2 0 .3 5 3 2 、2 4 .8 5 4 2 、2 6 .9 6 8 6 ;P 均< 0 .0 5 ) :而且隨著U t i l i n ' s 濃度的增加,殺傷活性顯著增大,P 均&l

6、t; 0 .0 5 ,且均較單獨應用U t i l i n 7 S 殺傷活性明顯增加,( t 分別為6 .5 9 5 9 、8 .9 0 4 9 、1 0 .5 3 4 5 ;P 均< 0 .0 5 ) 。結論U t i l i n ' s 誘導后的D C 一定程度上促進T 細胞的增殖和分泌,且隨著其濃度的增加,作用進一步增強;T 細胞殺瘤活性隨著U t i l i I I ,S 濃度的增加逐步增強。在G I T聯(lián)合U t

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