香菇多糖對(duì)急性髓系白血病患者樹(shù)突狀細(xì)胞的成熟和功能影響的體內(nèi)外研究.pdf

1、目的：通過(guò)體內(nèi)外試驗(yàn)研究香菇多糖(lentinan，LNT)對(duì)急性髓系白血病(AML)患者樹(shù)突狀細(xì)胞(DC)的促成熟及功能調(diào)節(jié)的機(jī)制，進(jìn)一步闡明香菇多糖的免疫學(xué)活性，并探索白血病免疫治療的新途徑。
　　 方法：體外試驗(yàn)用Ficoll密度梯度離心法分離急性髓系白血病完全緩解期(AML-CR)患者的骨髓單個(gè)核細(xì)胞(BMNC)用含重組人粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(rhGM-CSF)1000U/ml和重組人白細(xì)胞介素4(rhIL-4)50

2、0U/ml的RPMI-1640完全培養(yǎng)基在37℃5％CO2孵箱中培養(yǎng)至第7天。陽(yáng)性對(duì)照組加常規(guī)量的脂多糖(LPS)，實(shí)驗(yàn)組分別用LNT1ug、3ug、5ug刺激DC，陰性對(duì)照組加相同體積的培養(yǎng)液，培養(yǎng)48小時(shí)后；經(jīng)形態(tài)學(xué)觀察(倒置顯微鏡、Wright-Giemsa染色)，免疫學(xué)(CD80、CD83、CD86、CD1a、HLA-DR)的鑒定，ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)DCs上清液白細(xì)胞介素12(IL-12)的水平。體內(nèi)試驗(yàn)用免疫磁珠法(M

3、ACS)分離AML-CR患者經(jīng)LNT治療前、后的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMNC)的DCs；ELISA雙抗體夾心法檢測(cè)DCs上清液IL-12的水平。
　　 結(jié)果：體外試驗(yàn)，高劑量組LNT作用的DC呈典型形態(tài)；能夠提高DC表面分子CD80、CD83、CD86、CD1a及HLA-DR的表達(dá)(P＜0.05)；DC分泌IL-12較陰性對(duì)照組顯著增高(P＜0.05)，且呈LNT濃度依賴性。體內(nèi)試驗(yàn)，經(jīng)LNT治療后分離純化的DC分泌IL-12的