梗阻性黃疸及膽汁引流方法對大鼠腸道sIgA的影響.pdf

1、背景：梗阻性黃疸患者易發(fā)生內(nèi)毒素血癥、術(shù)后感染等并發(fā)癥，提示梗黃可損傷機體免疫防御功能。既往研究提示梗阻性黃疸可損傷腸黏膜機械屏障，腸黏膜通透性增加，內(nèi)毒素吸收入血導(dǎo)致敗血癥的發(fā)生。梗黃對腸黏膜免疫屏障的影響成為近來的研究熱點，分泌型免疫球蛋白(sIgA)是維持腸道黏膜免疫的主要免疫球蛋白，是腸道黏膜免疫的第一道防線，梗阻性黃疸能降低腸道內(nèi)sIgA含量，損傷腸黏膜免疫屏障。但關(guān)于膽汁內(nèi)外引流能否改善梗黃大鼠腸道內(nèi)的低sIgA狀態(tài)及膽汁內(nèi)

2、引流術(shù)與外引流術(shù)的優(yōu)劣性，目前尚無相關(guān)報道。腸道內(nèi)sIgA來源于腸道自身分泌和膽汁，腸道自身來源的sIgA形成需經(jīng)過兩個步驟：一、腸黏膜固有層IgA+漿細胞合成IgA mRNA經(jīng)蛋白翻譯過程分泌IgA，通過J鏈連接形成二聚體IgA；二、二聚體IgA經(jīng)過腸黏膜上皮細胞表達的多聚免疫球蛋白受體(pIgR)轉(zhuǎn)運至腸腔，經(jīng)蛋白酶水解，pIgR的胞外片段(SC)脫落與二聚體IgA形成具有穩(wěn)定結(jié)構(gòu)和功能的sIgA。目前關(guān)于梗阻性黃疸及膽汁引流影響腸

3、道內(nèi)sIgA的機制尚無相關(guān)報道。
　　 目的：探討梗阻性黃疸及膽汁內(nèi)外引流術(shù)對腸道內(nèi)sIgA的影響，進一步比較膽汁內(nèi)引流術(shù)與外引流術(shù)在恢復(fù)腸道內(nèi)sIgA含量，增強黏膜免疫功能方面的優(yōu)劣性，探討梗黃影響腸道內(nèi)sIgA含量的初步機制。
　　 材料與方法：采用成年雄性SD大鼠60只，隨機分為四組，分別建立梗阻性黃疸(OJ=15)、膽汁外引流(ED=15)、膽汁內(nèi)引流(ID=15)、假手術(shù)(SH=15)模型。實驗第一天進行膽管結(jié)

4、扎切斷術(shù)和假手術(shù)分別建立OJ和SH模型，實驗第八天留取OJ和SH標本，對OJ大鼠分別進行膽汁外引流術(shù)和膽汁內(nèi)引流術(shù)，第十五天留取ED和ID標本。取近段空腸5cm腸段內(nèi)容物，離心取上清液通過雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測大鼠腸道內(nèi)sIgA含量。通過RT-PCR方法測定近段空腸黏膜內(nèi)IgA mRNA和pIgR mRNA相對表達量的變化分別反映IgA的腸道合成過程和腸道自身轉(zhuǎn)運過程，預(yù)測sIgA的腸道來源的變化。
　　 結(jié)

5、果：梗阻性黃疸形成后，大鼠腸道內(nèi)sIgA含量較假手術(shù)組明顯降低(OJ=14.97±1.62μg/ml，P=0.001 vs SH=17.71±1.95μg/ml)，膽汁外引流術(shù)不能恢復(fù)腸道內(nèi)sIgA含量(ED=15.88±1.77μg/ml，P=0.187 vs OJ)，而膽汁內(nèi)引流術(shù)能逆轉(zhuǎn)腸道內(nèi)的低sIgA狀態(tài)(ID=17.32±1.75μg/ml，P=0.596 vs SH)，膽汁內(nèi)引流在恢復(fù)腸道內(nèi)sIgA方面優(yōu)于外引流(P=0.0

6、48，ID vs ED)。OJ組大鼠的腸黏膜IgAmRNA(OJ=0.666±0.184，P=0.047，vs SH=0.478±0.186)和pIgRmRNA(OJ=0.642±0.188，P=0.014，vs SH=0.415±0.161)表達增強；接受膽汁外引流的ED組大鼠IgA mRNA(ED=0.652±0.134，P=0.863，vs OJ)和pIgRmRNA(ED=0.599±0.152，P=0.598，vs OJ)與OJ

7、組相比無明顯變化；而內(nèi)引流組大鼠的IgAmRNA(ID=0.459±0.162，P=0.014，vs ED；P=0.824，vs SH)和pIgR mRNA(ID=0.439±0.133，P=0.03，vs ED；P=0.731，vs SH)表達量明顯下降，幾乎恢復(fù)至SH水平。
　　 結(jié)論：梗阻性黃疸可明顯降低大鼠腸道內(nèi)sIgA含量，影響腸道黏膜免疫屏障功能，膽汁內(nèi)引流可有效改善腸道的低sIgA狀態(tài)，而外引流作用不明顯，膽汁內(nèi)引