膽汁內(nèi)外引流術(shù)對梗阻性黃疸大鼠血漿二胺氧化酶活性及腸源性防御素-5mRNA表達水平的影響.pdf

1、【研究目的】1、觀察梗阻性黃疸(梗黃)形成與解除大鼠腸黏膜組織形態(tài)、血漿二胺氧化酶(Diamine Oxidase,DAO)的活性變化,探討二者之間的關(guān)系,為臨床建立敏感無創(chuàng)的檢測方法來判斷腸黏膜屏障功能的損傷和修復(fù)狀況提供實驗及理論依據(jù);2、觀察大鼠防御素-5(Rat Defensin-5,RD-5)mRNA的變化,探討膽汁內(nèi)引流術(shù)優(yōu)于外引流術(shù)的機制,為臨床治療方式的選擇提供實驗依據(jù)。
　　【材料與方法】將60只成年雄性SD大鼠

2、隨機分為四組:梗阻性黃疸組(obstructive jaundice,OJ)、膽汁外引流組(external drainage,ED)、膽汁內(nèi)引流組(internal drainage,ID)及假手術(shù)對照組(shame operation,SH),各組均15只。建立動物模型:第一次手術(shù)建立SH模型(只分離膽管不結(jié)扎)和OJ模型(分離膽管并結(jié)扎、切斷),OJ術(shù)后7天行二次手術(shù),建立ED模型(膽管插管經(jīng)皮引流至體外)和ID模型(膽管與十二指

3、腸間建立引流)。造模成功后,處死大鼠并采集標(biāo)本,下腔靜脈取血ELASA方法檢測各組大鼠血漿DAO的活性;取末段回腸病理切片、HE染色,光鏡下觀察末端回腸組織黏膜形態(tài)學(xué)變化;取末段回腸RT-PCR方法檢測RD-5mRNA的表達水平。
　　【結(jié)果】1.膽管梗阻形成后,OJ組大鼠腸黏膜損傷明顯,黏膜變薄、絨毛稀疏、上皮完整性受到破壞并伴有炎性細(xì)胞浸潤,Chiu氏評分為2.158±0.579, ID、ED組大鼠腸黏膜有不同程度的恢復(fù)(Ch

4、iu氏評分分別為0.633±0.144,1.329±0.289),ID組更接近SH組(0.315±0.080),四組間兩兩比較P值均<0.01;OJ組血漿DAO水平顯著升高,明顯高于SH、ID、ED組(8.183±0.211 vs3.570±0.280、3.978±0.269、5.051±0.328 U/L,P<0.01),引流術(shù)后DAO水平下降,ID組較ED組下降更明顯,二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),ID組血漿DAO水平略高于

5、SH組,二者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);各大鼠血漿DAO水平與腸粘膜損傷評分的相關(guān)系數(shù)r=0.89(P<0.01),大鼠血漿DAO變化與腸黏膜組織病理學(xué)變化一致,呈正相關(guān)。2.OJ組回腸RD-5mRNA的表達水平顯著降低,明顯低于SH、ID、ED組(0.0708±0.0061 vs0.1895±0.0124、0.1903±0.0143、0.1601±0.0078,P<0.01),引流術(shù)后RD-5mRNA的表達水平升高,ID組較ED

6、組升高更明顯,二者差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01),ID組RD-5mRNA表達水平略高于SH組,二者差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　【結(jié)論】梗黃后,機體高膽紅素血癥及腸道膽汁缺乏致腸黏膜上皮受損,血漿DAO活性升高,膽汁內(nèi)外引流術(shù)可修復(fù)腸黏膜屏障,逆轉(zhuǎn)血漿DAO水平, RD-5mRNA表達水平增高,且以內(nèi)引流效果更佳。血漿DAO水平變化與腸黏膜形態(tài)學(xué)改變具有一致性,可反映梗黃大鼠腸黏膜屏障損傷及修復(fù)情況;膽汁內(nèi)引流優(yōu)于外引