膽汁內(nèi)外引流術(shù)對梗阻性黃疸大鼠腸黏膜巨噬細胞及TNF-α表達的影響.pdf

1、【研究背景】梗阻性黃疸是臨床常見病,多發(fā)病,目前外科手術(shù)是解除梗黃的最有效方法,然而圍手術(shù)期多臟器損害的發(fā)生率和病死率并未隨著手術(shù)技術(shù)的提高而明顯下降,其原因除手術(shù)創(chuàng)傷和術(shù)后并發(fā)癥外,與梗阻性黃疸腸黏膜屏障功能受損細菌移位引發(fā)的內(nèi)毒素血癥密切相關(guān)。大量研究表明梗阻性黃疸時腸黏膜通透性增加,內(nèi)毒素吸收入血及腸黏膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)顯著降低,腸黏膜清除細菌與內(nèi)毒素的能力下降。目前關(guān)于梗阻性黃疸時腸黏膜巨噬細胞及細胞因子TNF-α

2、的表達變化鮮有報道,亦未見膽汁內(nèi)外引流術(shù)解除梗阻對腸黏膜巨噬細胞及細胞因子TNF-α的影響的研究。巨噬細胞作為機體重要免疫細胞,可分泌多種細胞因子,其中最重要的細胞因子是TNF-α,可激活免疫系統(tǒng),具有防御功能。然而,免疫系統(tǒng)過度激活,可導(dǎo)致細胞因子分泌紊亂,嚴重破壞腸黏膜防御功能,引起內(nèi)毒素血癥及細菌移位,因此開展對梗黃時腸黏膜巨噬細胞及其分泌因子TNF-α的研究具有重要意義。
　　【研究目的】探討膽汁內(nèi)、外引流術(shù)對梗阻性黃疸大

3、鼠腸黏膜巨噬細胞及細胞因子TNF-α表達的影響,闡明梗阻性黃疸形成后腸黏膜免疫屏障受損的機理,以及膽汁內(nèi)引流術(shù)優(yōu)于外引流術(shù)的機制,為臨床梗阻性黃疸患者的治療提供實驗依據(jù)。
　　【材料與方法】成年雄性健康Sprague–Dawley大鼠60只,隨機分為四組:梗阻性黃疸組(OJ,n=15)、膽汁外引流組(ED,n=15)、膽汁內(nèi)引流組(ID,n=15)及假手術(shù)組(SH,n=15)。采用改進的造模方法建立動物模型:第一次手術(shù)建立OJ模型

4、(開腹分離膽管結(jié)扎并切斷)和SH模型(開腹僅分離膽管不結(jié)扎),第八天留取OJ和SH的標本,在OJ模型的基礎(chǔ)上實施二次手術(shù),建立ID模型(膽管與十二指腸間建立引流)和ED模型(膽管插管經(jīng)皮引流體外),第15天留取ID和ED的標本。取大鼠末端回腸,采用免疫組織化學染色的方法測定各組大鼠腸黏膜巨噬細胞及細胞因子TNF-α表達的變化。
　　【結(jié)果】四組大鼠模型均成功建立。梗黃時大鼠腸黏膜CD68及TNF-α的表達水平較假手術(shù)組明顯增強,平

5、均光密度升高(0.58±0.050,0.28±0.037,P<0.01;0.34±0.040,0.14±0.021,P<0.01)。膽汁內(nèi)引流術(shù)解除黃疸后,大鼠腸黏膜CD68的表達與梗阻性黃疸組相比明顯減少,平均光密度降低(0.49±0.049,P<0.05);膽汁外引流術(shù)解除黃疸后,大鼠腸黏膜CD68表達水平雖有減少,平均光密度降低(0.55±0.076),但與梗黃組相比沒有統(tǒng)計學差異(P>0.05)。經(jīng)膽汁內(nèi)外引流術(shù)解除黃疸后,大鼠