膽汁內(nèi)外引流術(shù)對(duì)梗阻性黃疸大鼠腸黏膜巨噬細(xì)胞及TNF-α表達(dá)的影響.pdf

1、【研究背景】梗阻性黃疸是臨床常見病,多發(fā)病,目前外科手術(shù)是解除梗黃的最有效方法,然而圍手術(shù)期多臟器損害的發(fā)生率和病死率并未隨著手術(shù)技術(shù)的提高而明顯下降,其原因除手術(shù)創(chuàng)傷和術(shù)后并發(fā)癥外,與梗阻性黃疸腸黏膜屏障功能受損細(xì)菌移位引發(fā)的內(nèi)毒素血癥密切相關(guān)。大量研究表明梗阻性黃疸時(shí)腸黏膜通透性增加,內(nèi)毒素吸收入血及腸黏膜分泌型免疫球蛋白A(sIgA)顯著降低,腸黏膜清除細(xì)菌與內(nèi)毒素的能力下降。目前關(guān)于梗阻性黃疸時(shí)腸黏膜巨噬細(xì)胞及細(xì)胞因子TNF-α

2、的表達(dá)變化鮮有報(bào)道,亦未見膽汁內(nèi)外引流術(shù)解除梗阻對(duì)腸黏膜巨噬細(xì)胞及細(xì)胞因子TNF-α的影響的研究。巨噬細(xì)胞作為機(jī)體重要免疫細(xì)胞,可分泌多種細(xì)胞因子,其中最重要的細(xì)胞因子是TNF-α,可激活免疫系統(tǒng),具有防御功能。然而,免疫系統(tǒng)過度激活,可導(dǎo)致細(xì)胞因子分泌紊亂,嚴(yán)重破壞腸黏膜防御功能,引起內(nèi)毒素血癥及細(xì)菌移位,因此開展對(duì)梗黃時(shí)腸黏膜巨噬細(xì)胞及其分泌因子TNF-α的研究具有重要意義。
　　【研究目的】探討膽汁內(nèi)、外引流術(shù)對(duì)梗阻性黃疸大

3、鼠腸黏膜巨噬細(xì)胞及細(xì)胞因子TNF-α表達(dá)的影響,闡明梗阻性黃疸形成后腸黏膜免疫屏障受損的機(jī)理,以及膽汁內(nèi)引流術(shù)優(yōu)于外引流術(shù)的機(jī)制,為臨床梗阻性黃疸患者的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　【材料與方法】成年雄性健康Sprague–Dawley大鼠60只,隨機(jī)分為四組:梗阻性黃疸組(OJ,n=15)、膽汁外引流組(ED,n=15)、膽汁內(nèi)引流組(ID,n=15)及假手術(shù)組(SH,n=15)。采用改進(jìn)的造模方法建立動(dòng)物模型:第一次手術(shù)建立OJ模型

4、(開腹分離膽管結(jié)扎并切斷)和SH模型(開腹僅分離膽管不結(jié)扎),第八天留取OJ和SH的標(biāo)本,在OJ模型的基礎(chǔ)上實(shí)施二次手術(shù),建立ID模型(膽管與十二指腸間建立引流)和ED模型(膽管插管經(jīng)皮引流體外),第15天留取ID和ED的標(biāo)本。取大鼠末端回腸,采用免疫組織化學(xué)染色的方法測(cè)定各組大鼠腸黏膜巨噬細(xì)胞及細(xì)胞因子TNF-α表達(dá)的變化。
　　【結(jié)果】四組大鼠模型均成功建立。梗黃時(shí)大鼠腸黏膜CD68及TNF-α的表達(dá)水平較假手術(shù)組明顯增強(qiáng),平

5、均光密度升高(0.58±0.050,0.28±0.037,P<0.01;0.34±0.040,0.14±0.021,P<0.01)。膽汁內(nèi)引流術(shù)解除黃疸后,大鼠腸黏膜CD68的表達(dá)與梗阻性黃疸組相比明顯減少,平均光密度降低(0.49±0.049,P<0.05);膽汁外引流術(shù)解除黃疸后,大鼠腸黏膜CD68表達(dá)水平雖有減少,平均光密度降低(0.55±0.076),但與梗黃組相比沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P>0.05)。經(jīng)膽汁內(nèi)外引流術(shù)解除黃疸后,大鼠