膽汁內(nèi)外引流術(shù)對(duì)解除梗阻性黃疸作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、[背景與目的]:梗阻性黃疸患者術(shù)后并發(fā)癥及死亡率較高。目前對(duì)于術(shù)前是否解除梗阻、解除梗阻的時(shí)機(jī)以及內(nèi)外引流術(shù)哪種方式更好尚存在爭(zhēng)議。我們之前研究發(fā)現(xiàn)，梗阻性黃疸大鼠肝臟枯否細(xì)胞產(chǎn)生大量具有細(xì)胞毒性的一氧化氮，膽汁內(nèi)引流術(shù)可以逆轉(zhuǎn)這種改變，而外引流卻不能，但機(jī)理不清楚。本研究通過(guò)比較膽汁內(nèi)外引流術(shù)對(duì)梗阻性黃疸大鼠血漿內(nèi)毒素水平、血清細(xì)胞因子濃度及肝臟誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)表達(dá)水平的不同影響，進(jìn)一步探討膽汁內(nèi)引流術(shù)解除術(shù)前黃疸優(yōu)于外

2、引流術(shù)的機(jī)制。 [材料與方法]:采用成年SD雄性大鼠69只，隨機(jī)分為四組，分別建立梗阻性黃疸(OJ，n=18)、膽汁內(nèi)引流術(shù)(ID，n=18)、膽汁外引流術(shù)(ED，n=18)及假手術(shù)(SH，n=15)模型。第一次手術(shù)建立梗阻性黃疸模型；飼養(yǎng)7天后，第二次手術(shù)建立膽汁內(nèi)、外引流模型。于第二次術(shù)后第7d留取血液標(biāo)本及肝臟組織標(biāo)本。通過(guò)鱟試驗(yàn)動(dòng)態(tài)濁度法測(cè)定大鼠血漿內(nèi)毒素(LPS)水平，采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)血清

3、白介素-2(IL-2)、及白介素-6(IL-6)水平，并通過(guò)SABC免疫組化方法測(cè)定肝臟組織iNOS的表達(dá)情況。 [結(jié)果]:成功建立了四組大鼠動(dòng)物模型。梗阻性黃疸時(shí)，大鼠血漿內(nèi)毒素水平(42.463 pg/mL±3.486 pg/mL)明顯高于假手術(shù)對(duì)照組(4.136±2.002pg/mL)(OJ vs ED，P=0)；血清IL-6及IL-2濃度升高(212.949 pg/mL±56.546pg/mL，212.718 pg/mL

4、±62.419 pg/mL)；肝組織iNOS表達(dá)陽(yáng)性面積增加(30.539±6.255)，平均光密度升高(0.296±0.055)。行膽汁外引流術(shù)后，大鼠內(nèi)毒素血癥得到改善(6.224±2.996 pg/mL)(ED vs OJ，P=0)，血清IL-2及IL-6水平不降反升(264.890±62.322 pg/mL，269.363+76.199 pg/mL)(P=0.017，P=0.014)，肝組織iNOS表達(dá)陽(yáng)性面積及平均光密度亦增加

5、(38.186±7.495，0.399±0.086)(P=0，P=0.004)。而通過(guò)膽汁內(nèi)引流術(shù)解除黃疸后，大鼠血漿LPS及血清IL-6濃度均明顯下降(4.190±1.970 pg/mL，169.713±49.053 pg/mL)(ID vs OJ，P=0，P=0.014)，幾乎恢復(fù)至正常水平，與假手術(shù)對(duì)照組相比無(wú)明顯差異(P=0.787，P=0.256)；血清IL-2水平雖有所下降(184.313±52.408 pg/mL)，但與梗