黃瓜離體再生的影響因素研究.pdf

1、黃瓜（Cucumis sativusL.）是一類重要的蔬菜作物，在世界上被廣泛栽培。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)已成為許多作物品種改良的重要手段。但由于黃瓜組織培養(yǎng)具有很強(qiáng)的基因特異性，所以高頻率完整植株的再生還比較困難，因此也影響了這些技術(shù)在黃瓜育種中的應(yīng)用。本課題從基因型、激素及其配比、外植體類型、外植體苗齡、再生芽生根等方面進(jìn)一步研究黃瓜離體再生的影響因素，建立了完整的黃瓜帶柄子葉高效再生體系，主要研究結(jié)果如下:

2、　　1.基因型是黃瓜離體再生能力高低的主要影響因素之一，不同基因型黃瓜品種之間的再生能力差異很大。黃瓜帶柄子葉再生體系建立所用的3個(gè)品種（津綠3號(hào)、綠園8號(hào)和新四號(hào)）中，以津綠3號(hào)和新四號(hào)的再生能力較強(qiáng)，在培養(yǎng)基MS+0.5 mg.L-16-BA+0.6 mg.L-1 IAA上，再生頻率和外植體出芽數(shù)分別為75％、77％和5.6個(gè)、5.2個(gè);而綠園8號(hào)的再生頻率和外植體出芽數(shù)為30％和3.3個(gè)。
　　2.植物激素是植物離體再生所必

3、需的，6-BA是黃瓜離體分化中最常用的植物激素之一。本研究所使用的3種基因型的黃瓜在MS+0.5 mg.L-16-BA+0.6mg.L-1 IAA的培養(yǎng)基上再生頻率和外植體出芽數(shù)達(dá)到最高，因此津綠3號(hào)、綠園8號(hào)和新四號(hào)的最佳芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+0.5 mg.L-16-BA+0.6 mg.L-1 IAA。
　　3.黃瓜不同外植體的再生能力差異很大，在上述最佳芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，苗齡為5d的津綠3號(hào)、綠園8號(hào)和新四號(hào)，帶柄子葉的分化再生頻

4、率為75％、30％、70％，而不帶柄子葉、下胚軸不能產(chǎn)生不定芽。所以在本研究中，帶柄子葉為再生體系建立的最適外植體。
　　4.苗齡是黃瓜再生頻率高低的重要影響因素。試驗(yàn)中在3-7d苗齡的帶柄子葉中，津綠3號(hào)在5d苗齡時(shí)再生頻率和外植體出芽數(shù)最高，分別為75％和5.6個(gè)，而新四號(hào)和綠園8號(hào)在苗齡為4d時(shí)再生頻率和外植體出芽數(shù)最高，分別為77％、25％和5.2個(gè)、4.3個(gè)。因此津綠3號(hào)最佳苗齡為5d，新四號(hào)和綠園8號(hào)的最佳苗齡為4d。