哮喘大鼠模型嗜酸粒細(xì)胞趨化因子及受體的研究.pdf

1、研究背景和目的：支氣管哮喘(以下簡(jiǎn)稱哮喘)是兒童和青少年一種常見(jiàn)病，無(wú)論在發(fā)達(dá)國(guó)家還是發(fā)展中國(guó)家，哮喘均是社會(huì)健康問(wèn)題，是小學(xué)生輟學(xué)的最主要原因。世界衛(wèi)生組織(WHO)估計(jì)，在全球大約有3億人患哮喘。近年來(lái)哮喘的發(fā)病率呈增加趨勢(shì)，特別是兒童哮喘更加明顯，因此哮喘的發(fā)病機(jī)制和治療一直是人們研究的熱點(diǎn)。 哮喘的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，目前研究表明哮喘是由多種因素所導(dǎo)致氣道的慢性炎癥性疾病，這種慢性炎癥在哮喘患者氣道持續(xù)存在。嗜酸粒細(xì)胞(E

2、os)被認(rèn)為是哮喘發(fā)病機(jī)制中強(qiáng)有力的關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞，在哮喘患者氣道聚集和激活是哮喘發(fā)作的一個(gè)中心環(huán)節(jié)，Eos浸潤(rùn)是氣道病理的主要特征。Eos選擇性從外周血募集入氣道，激活后釋放多種不同細(xì)胞因子、趨化因子和炎性介質(zhì)如嗜酸粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白、主要堿性蛋白等在肺部引起氣道上皮細(xì)胞損傷，平滑肌細(xì)胞增生，多種炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，引起氣道高反應(yīng)性和氣道結(jié)構(gòu)的重建，導(dǎo)致哮喘的發(fā)生。 眾多學(xué)者對(duì)Eos的氣道募集進(jìn)行深入的研究，骨髓是生成Eos的主要器官，

3、但對(duì)Eos從骨髓趨化到肺組織的機(jī)制尚未明了。嗜酸粒細(xì)胞特異性趨化因子(Eotaxin)屬C-C趨化因子家族成員，通過(guò)趨化因子受體3(CCR-3)而發(fā)揮作用，CCR-3在Eos膜上大量存在，因此Eotaxin對(duì)Eos有高度特異性。本實(shí)驗(yàn)用SD大鼠制作哮喘模型，探討Eotaxin及其受體在哮喘發(fā)病機(jī)制中的作用；觀察地塞米松及白三烯受體拮抗劑孟魯司特對(duì)哮喘大鼠Eotaxin及CCR-3的影響。 方法：將健康雄性SD大鼠60只，隨機(jī)分為

4、五組，生理鹽水對(duì)照組(A組)，哮喘組(B組)，地塞米松治療組(C組)，孟魯司特治療組(D組)，地塞米松+孟魯司特治療組(E組)；卵蛋白(OVA)致敏及誘發(fā)哮喘；制備大鼠肺組織病理標(biāo)本,HE染色，原位雜交方法觀察肺組織中EotaxinmRNA的表達(dá)，免疫組化技術(shù)觀察肺組織Eotaxin蛋白表達(dá)及肺組織和骨髓組織中CCR-3蛋白表達(dá)。 結(jié)果：(1)與生理鹽水對(duì)照組相比較，哮喘組大鼠外周血、骨髓、肺組織嗜酸粒細(xì)胞數(shù)目(Eos)顯著增高

5、(P＜0.01)，肺組織中EotaxinmRNA及蛋白表達(dá)明顯升高(p＜0.01)，肺組織中浸潤(rùn)的Eos數(shù)目和肺組織中EotaxinmRNA及蛋白陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān)(p＜0.05)，肺組織和骨髓組織表達(dá)CCR-3蛋白明顯增高(P＜0.01)。(2)地塞米松治療組、孟魯司特治療組、地塞米松+孟魯司特治療組和哮喘組相比，肺組織、外周血及骨髓涂片Eos數(shù)目明顯減少(P＜0.05)，肺組織EotaxinmRNA及蛋白、肺組織和骨髓組織CCR-3

6、蛋白的表達(dá)明顯下降(P＜0.01)；(3)地塞米松+孟魯司特治療組分別和地塞米松治療組和孟魯司特治療組相比，肺組織和骨髓CCR-3蛋白表達(dá)明顯下調(diào)(P＜0.05或P＜0.01)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)論：(1)哮喘大鼠模型肺組織EotaxinmRNA及及Eotaxin蛋白表達(dá)增高，肺組織及骨髓中CCR-3蛋白增高；外周血、骨髓、肺組織Eos顯著增高，而且肺組織中浸潤(rùn)的Eos數(shù)目和肺組織中EotaxinmRNA及蛋白陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān)