甜菜根對拘束應(yīng)激致小鼠肝損傷的保護(hù)作用及機(jī)制研究.pdf

1、近年來，隨著社會的發(fā)展和人們生活方式的改變，應(yīng)激性疾病和亞健康越來越受到人們的關(guān)注，情緒應(yīng)激性肝損傷也逐漸引起人們的重視，如何利用現(xiàn)有的天然產(chǎn)物資源開發(fā)針對情緒應(yīng)激性疾病相關(guān)的營養(yǎng)保健產(chǎn)品受到醫(yī)藥保健行業(yè)的廣泛關(guān)注。甜菜根具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤能等生物活性功效，被世界衛(wèi)生組織（WHO）和美國防癌協(xié)會評為具有抗癌功效的日常食用保健蔬菜，具有顯著的營養(yǎng)保健功能和巨大的開發(fā)利用前景。本論文全面系統(tǒng)的研究國內(nèi)主要產(chǎn)地甜菜根的體外抗氧化活性，再

2、通過拘束應(yīng)激建立情緒應(yīng)激模型，探討甜菜根對拘束應(yīng)激誘導(dǎo)小鼠肝損傷的保護(hù)及相關(guān)作用機(jī)制，為我國甜菜根保肝護(hù)肝類藥品和保健品的開發(fā)利用提供理論基礎(chǔ)。
　　本研究首先對中國黑龍江、吉林、內(nèi)蒙古、江蘇、重慶、寧夏、新疆等地區(qū)的甜菜根榨汁提取物的抗氧化活性進(jìn)行研究，結(jié)果顯示各大產(chǎn)地的甜菜根都具有較好的抗氧化活性，但是不同產(chǎn)地之間也存在著差別，其中江蘇地區(qū)甜菜根對DPPH·清除能力（0.301μmol TE/mg樣品）、ABTS+·清除能力（

3、0.536μmol TE/mg樣品）、抗氧化能力指數(shù)（1.72±0.01μmol TE/mg樣品）最為顯著，新疆地區(qū)甜菜根的鐵離子還原能力最好（0.626±0.01μmol TE/mg樣品），寧夏、內(nèi)蒙古地區(qū)甜菜根抗氧化活性相對較差。
　　基于上述體外抗氧化實(shí)驗(yàn)結(jié)果，選用江蘇地區(qū)甜菜根榨汁提取物（0.076 g固體/1 mL鮮汁）為實(shí)驗(yàn)樣品，以拘束負(fù)荷誘發(fā)應(yīng)激性肝損傷為模型，研究甜菜根對其的干預(yù)作用。結(jié)果顯示，小鼠拘束18 h后，

4、出現(xiàn)明顯的肝損傷，表現(xiàn)為小鼠肝臟指數(shù)上升、血漿中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）和谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）水平及肝臟中丙二醛（MDA）含量顯著升高，通過病理切片發(fā)現(xiàn)拘束應(yīng)激會導(dǎo)致肝臟組織的病理損傷及炎癥細(xì)胞浸潤；在拘束前連續(xù)28 d給予甜菜根汁（8 mL/kg·bm,16 mL/kg·bm）可以顯著降低拘束應(yīng)激小鼠肝臟指數(shù)、血漿中 ALT和 AST水平及其肝臟中 MDA含量，肝臟組織的病理損傷及其炎癥浸潤也得到了一定程度的緩解。這表明甜菜根對拘束應(yīng)激導(dǎo)

5、致的小鼠肝損傷具有一定的保護(hù)作用。
　　從上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，拘束應(yīng)激導(dǎo)致的肝臟損傷的原因主要是肝臟的過氧化和炎癥的浸潤兩個方面，接下來我們對甜菜根緩解小鼠拘束應(yīng)激導(dǎo)致肝損傷的作用機(jī)制進(jìn)行了研究。研究發(fā)現(xiàn)，甜菜根可以增加拘束應(yīng)激小鼠肝臟中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）和過氧化氫酶（CAT）酶活力來增強(qiáng)肝臟的內(nèi)源性抗氧化能力來緩解肝臟的氧化損傷，并且通過 RT-P C R得到一致結(jié)果；通過 Western