高膽紅素血癥及膽紅素腦病新生大鼠模型的建立及評(píng)價(jià).pdf

1、目的：
　　建立可行可靠、步驟簡單且具有良好模擬性的高膽紅素血癥及膽紅素腦病的7日齡SD大鼠模型，為在臨床實(shí)踐中探究高膽紅素血癥及膽紅素腦病的發(fā)病機(jī)制及并發(fā)癥的防治提供模型基礎(chǔ)。
　　方法：
　　選取7日齡的SD（Sprague-Dawley，SD）大鼠50只隨機(jī)分成5組，分別給予生理鹽水，50mg/kg、100mg/kg、150mg/kg、200mg/kg晶體膽紅素腹腔內(nèi)注射。在實(shí)驗(yàn)處理24h后取大鼠腦組織及心臟取血

2、，測定血清、腦組織的膽紅素水平及S-100β濃度，進(jìn)行腦組織HE染色觀察海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞的病理改變，用TUNEL法測定神經(jīng)細(xì)胞凋亡數(shù)，計(jì)算凋亡率（Apoptotic index，AI）并及時(shí)記錄各組各指標(biāo)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，計(jì)算相關(guān)數(shù)據(jù)并對(duì)其進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，得出結(jié)論。進(jìn)一步評(píng)價(jià)新生大鼠模型的可靠性及穩(wěn)定性。
　　結(jié)果：
　?。?）觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況：實(shí)驗(yàn)前，各組大鼠一般情況良好，皮膚顏色紅潤，彈性好，對(duì)外界刺激反應(yīng)靈敏，活動(dòng)正常。干

3、預(yù)24小時(shí)后觀察：生理鹽水組的大鼠皮膚顏色紅潤，對(duì)外界刺激反應(yīng)靈敏；50mg/kg組的大鼠皮膚欠紅潤，彈性較差，對(duì)外界刺激反應(yīng)遲緩；100mg/kg組與150 mg/kg組新生大鼠的皮膚顏色黃染，彈性差，對(duì)外界刺激反應(yīng)遲鈍，有肌張力降低所致的翻滾及俯伏；200 mg/kg組的大鼠皮膚呈黃綠色，彈性極差，對(duì)外界刺激無反應(yīng)甚至昏迷。
　?。?）HE染色：生理鹽水組海馬區(qū)神經(jīng)細(xì)胞排列整齊，結(jié)構(gòu)完整，形態(tài)正常；50mg/kg組可見神經(jīng)細(xì)胞

4、之間輕度的腫脹、變性；100mg/kg組與150mg/kg組神經(jīng)元結(jié)構(gòu)紊亂，細(xì)胞之間腫脹、變形明顯，部分細(xì)胞核染色質(zhì)致密濃縮，胞漿空化；200mg/kg組神經(jīng)細(xì)胞之間極度腫脹、變形，可見多數(shù)細(xì)胞核染色質(zhì)致密濃縮，胞漿空化。
　?。?）血清及腦組織膽紅素水平及S-100β濃度：與生理鹽水組相比，各組的血清及腦組織膽紅素水平及S-100β濃度均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；與50mg/kg組相比，100mg/kg組血清及腦組織的S-1

5、00β無顯著性差異（P＞0.05）。
　?。?）TUNEL法測凋亡指數(shù)（AI）：與生理鹽水組相比，各組的凋亡指數(shù)均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05）；與150mg/kg組相比，200mg/kg組凋亡指數(shù)無顯著性差異（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　（1）7d SD大鼠腹腔注射50 mg/kg晶體膽紅素可建立高膽紅素血癥動(dòng)物模型。
　?。?）7d SD大鼠腹腔注射100mg/kg與150 mg/kg晶體膽紅素可建立穩(wěn)定