吳茱萸、穿心蓮等中藥材化學(xué)成分分離純化方法研究.pdf

1、我國(guó)傳統(tǒng)中藥種類繁多，各種藥材所含有的化學(xué)成分很是復(fù)雜，含量也相對(duì)較少。因而，從傳統(tǒng)中藥中分離純化出有效成分對(duì)于臨床醫(yī)學(xué)的藥理作用研究及含量的測(cè)定具有較為深遠(yuǎn)的影響。
　　本文分別應(yīng)用超臨界流體色譜(supercritical fluid chromatography, SFC)和制備型高效液相色譜(preparative high performance liquid chromatography, PHPLC)對(duì)吳茱萸、穿心蓮

2、、木蝴蝶及知母中的化學(xué)成分進(jìn)行分離與純化，所得到的化合物的純度經(jīng)高效液相色譜(high performance liquid chromatography, HPLC)進(jìn)行了檢測(cè)，并采用質(zhì)譜(MS)、紫外光譜(UV)和核磁共振波譜(NMR)對(duì)所得到的化合物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定。
　　1. SFC分離純化吳茱萸中兩種生物堿類成分研究
　　使用超臨界二氧化碳(SC-CO2)作為SFC流動(dòng)相的主體，添加一定量的改性劑(如：甲醇、乙醇、

3、異丙醇、乙腈等)，建立了從吳茱萸中分離純化吳茱萸堿與吳茱萸次堿等成分的 SFC方法。在一定研究范圍內(nèi)，通過考察色譜柱的類型、改性劑種類及含量、流速、壓力和溫度等條件對(duì)分離效果的影響，最終確立了從吳茱萸中分離純化吳茱萸堿與吳茱萸次堿的最適宜的色譜條件。從吳茱萸中分離純化得到的化合物的純度經(jīng)HPLC檢測(cè)分別為99.5％和99.8%，經(jīng)UV和NMR鑒定得到吳茱萸堿與吳茱萸次堿的化學(xué)結(jié)構(gòu)。通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，擬合得到van’t Hoff曲線，進(jìn)一步探

4、討了SFC分離過程的熱力學(xué)變化規(guī)律。將吳茱萸堿與吳茱萸次堿從流動(dòng)相到固定相分配過程中的焓變差值與熵變差值進(jìn)行比較，結(jié)果表明：在該條件下，從吳茱萸中分離純化吳茱萸堿與吳茱萸次堿的SFC過程為焓控制的過程。
　　2. SFC分離純化穿心蓮中兩種二萜內(nèi)酯類成分研究
　　使用SC-CO2作為 SFC流動(dòng)相的主體，添加一定量的改性劑(如：甲醇、乙醇、異丙醇、乙腈等)，建立了從穿心蓮中分離純化穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿心蓮內(nèi)酯等化學(xué)成分的SFC

5、方法。在一定研究范圍內(nèi)，通過考察色譜柱的類型、改性劑種類及含量、流速、壓力、溫度等條件對(duì)分離效果的影響，最終確立了從穿心蓮中分離純化穿心蓮內(nèi)酯和脫水穿心蓮內(nèi)酯的最適宜的色譜條件。從穿心蓮中分離純化得到的化合物的純度經(jīng)HPLC檢測(cè)分別為99.1%和98.5%，經(jīng)UV和NMR鑒定得到穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿心蓮內(nèi)酯的化學(xué)結(jié)構(gòu)。通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，擬合得到van’t Hoff曲線，進(jìn)一步探討了SFC分離過程的熱力學(xué)變化規(guī)律。將穿心蓮中的穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿

6、心蓮內(nèi)酯從流動(dòng)相到固定相分配過程中的焓變差值與熵變差值進(jìn)行比較，結(jié)果表明：在該條件下，從穿心蓮中分離純化穿心蓮內(nèi)酯與脫水穿心蓮內(nèi)酯的SFC過程為焓控制的過程。
　　3. PHPLC分離純化木蝴蝶中的兩種黃酮類成分
　　實(shí)驗(yàn)中以甲醇-水為流動(dòng)相，建立了從木蝴蝶中分離純化黃芩素-7-O-葡萄糖苷和黃芩素-7-O-雙葡萄糖苷的PHPLC方法。采用C18柱(250 mm×25.4 mm I.D.,10μm)，以甲醇-水(45:55,

7、 V/V)作為流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫，上樣量為20 mg，流速為30 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)定為280 nm。從木蝴蝶中分離純化所得到的兩種化合物的純度經(jīng) HPLC檢測(cè)分別為98.1%和98.9%；然后再采用MS、UV、NMR鑒定，得到黃芩素-7-O-葡萄糖苷和黃芩素-7-O-雙葡萄糖苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
　　4. PHPLC分離純化知母中的兩種黃酮類成分
　　實(shí)驗(yàn)中以甲醇-水為流動(dòng)相，建立了從知母中分離純化的芒果苷和新芒果苷的PH