葉下珠提取物對(duì)血吸蟲病肝纖維化的作用及IL-13-miR-21-Smad7信號(hào)通路的干預(yù)機(jī)制研究.pdf

1、第一部分葉下珠制劑——海珠益肝膠囊對(duì)血吸蟲病肝纖維化患者血清Interleukin-13（IL-13）水平的影響
　　目的：探討葉下珠制劑——海珠益肝膠囊對(duì)血吸蟲病肝纖維化患者血清中IL-13水平的影響。方法：選取血吸蟲肝纖維化患者20例，隨機(jī)分為治療組患者和對(duì)照組，每組各10例，對(duì)照組患者給予基礎(chǔ)治療，治療組患者在基礎(chǔ)治療的基礎(chǔ)上加用海珠益肝膠囊，兩組患者均接受1個(gè)月治療。Elisa法檢測(cè)兩組患者血清中IL-13的水平。結(jié)果：經(jīng)

2、1個(gè)月治療后，兩組患者血清中IL-13水平分別較治療前明顯下降（P<0.01）；治療后，治療組血清中IL-13水平較對(duì)照組水平降低（P<0.05）。結(jié)論：葉下珠提制劑——海珠益肝膠囊可明顯降低血吸蟲病肝纖維化患者血清中IL-13的水平，擴(kuò)大了海珠益肝膠囊的應(yīng)用范圍。
　　第二部分葉下珠提取物對(duì)血吸蟲病肝纖維化小鼠模型肝臟組織病理學(xué)影響
　　目的：建立血吸蟲病肝纖維化小鼠模型，研究葉下珠提取物對(duì)血吸蟲感染所致肝纖維化小鼠肝臟病

3、理學(xué)的影響。方法：利用日本血吸蟲尾蚴感染BALB/c小鼠建立感染模型，將50只小鼠隨機(jī)分為葉下珠提取物高、中、低濃度組，正常組和模型組，每組各10只。血吸蟲感染4周后，各組分別給予相應(yīng)的藥物干預(yù)，模型對(duì)照組、正常對(duì)照組僅給予生理鹽水，不予藥物干預(yù)。連續(xù)灌胃4周后，記錄小鼠的生存狀況。實(shí)驗(yàn)開始8周后處死小鼠取標(biāo)本，免疫組化法檢測(cè)結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(Connective tissue growth factor，CTGF)的表達(dá)；Hemato

4、xylin-eosin（HE）染色、MASSON染色觀察小鼠肝臟病理學(xué)變化。結(jié)果：與造模組小鼠肝臟相比，高、中、低葉下珠提取物濃度干預(yù)組小鼠肝臟肉芽腫面積較?。≒<0.01或0.05），纖維化程度較輕（P<0.01或0.05），肝組織CTGF蛋白表達(dá)水平較低（P <0.01或0.05）。結(jié)論：葉下珠提取物可明顯減輕日本血吸蟲對(duì)小鼠感染模型肝病理學(xué)損傷，緩解肝肉芽腫所致肝纖維化程度。
　　第三部分葉下珠提取物對(duì)血吸蟲病肝纖

5、維化小鼠體內(nèi)IL-13/miR-21/smad7信號(hào)通路的影響
　　目的：研究葉下珠提取物對(duì)血吸蟲病肝纖維化小鼠體內(nèi)IL-13/miR-21/smad7信號(hào)通路的作用。方法：利用日本血吸蟲尾蚴感染BALB/c小鼠模型，將50只小鼠隨機(jī)分為葉下珠提取物高濃度組、中濃度組、低濃度組，正常組和模型組，每組各10只。血吸蟲尾蚴感染四周后，各組分別給予相應(yīng)的藥物，空白組給予生理鹽水，連續(xù)灌胃四周后。取肝臟及血清標(biāo)本，Elisa法檢測(cè)血清中I

6、L-13水平，RT-PCR檢測(cè)miR-21、smad7和CTGF mRNA的水平，western blot檢測(cè)Smad7、Smad1、p-Smad1、Smad2、p-Smad2、ERK1/2、p-ERK1/2和 TGF-β receptor I蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果：與正常組相比，模型組miR-21和CTGF mRNA水平明顯升高（P<0.01），Smad7 mRNA和蛋白水平明顯下降（P<0.01），p-Smad1、p-Smad2、p-

7、ERK1/2和TGF-β receptor蛋白水平明顯升高（P<0.01）。相比模型組，隨著葉下珠提取物濃度的增高，抑制 miR-21 mRNA的表達(dá)越明顯（P<0.01或0.05），在轉(zhuǎn)錄水平和翻譯水平促進(jìn)smad7 mRNA和蛋白的表達(dá)越顯著(P<0.01或0.05），葉下珠提取物同時(shí)可以降低 p-smad1、p-smad2、p-ERK1/2和 TGF-β receptor I的蛋白表達(dá)水平（p<0.01或0.05）。結(jié)論：在血吸蟲