當歸和當歸補血湯指紋圖譜及對兔血吸蟲病肝纖維化的藥理藥效研究.pdf

1、中藥色譜指紋圖譜是中藥(包括中藥單味藥與中藥復方制劑)整體性的化學表征。指紋圖譜質(zhì)量控制模式的提出使得中藥(材)的研究方法和質(zhì)量分析手段也由針對一個或者少數(shù)幾個活性成分(指標成分)的分析，發(fā)展成為對整味中藥化學成分的綜合分析成為可能。本論文根據(jù)當前中藥色譜指紋圖譜研究中的一些難點和熱點問題，利用聯(lián)用色譜儀器，結(jié)合能有效利用色譜和光譜/質(zhì)譜信息的化學計量學方法，實現(xiàn)對中藥及其生物樣品等復雜體系的定性定量分析。論文主要涉及四個方面：當歸揮發(fā)

2、性和非揮發(fā)性化學成分的色譜指紋圖譜研究；色譜指紋圖譜技術(shù)用于當歸化學成分在家兔體內(nèi)的吸收和代謝分析；當歸補血湯復方及其單味藥的化學組分歸屬分析；當歸補血湯復方及其單味藥治療家兔血吸蟲病肝纖維化的藥理藥效研究。 一、用GC-MS和HPLC-DAD-MS色譜指紋圖譜技術(shù)對當歸的揮發(fā)性和非揮發(fā)性化學成分進行了定性定量分析(第二章、第三章)。并采用直觀推導式演進特征投影法(HELP)對重疊組分進行分辨以獲取每個組分的純色譜和純光譜，從而

3、提高了組分定性和定量的準確性。用HPLC-DAD-MS聯(lián)用儀器對當歸的醇提化學成分進行色譜指紋圖譜分析。通過解析化合物在APCI-MS和ESI-MS不同電離模式下的質(zhì)譜行為，可以比較容易地找到被測物質(zhì)的分子離子峰，從而確定其分子量。結(jié)合紫外光譜并與文獻報道的實驗數(shù)據(jù)進行對照，實現(xiàn)了當歸中部分苯酞類物質(zhì)的初步定性分析。并為當歸指紋圖譜數(shù)據(jù)庫的建立提供豐富的信息。 二、在中藥色譜指紋圖譜技術(shù)的基礎上，分析了當歸中化學成分在家兔體內(nèi)的

4、吸收和代謝(第四章)。結(jié)合HPLC-DAD-MS聯(lián)用儀器和化學計量學方法，首次提出利用色譜指紋圖譜技術(shù)，通過對當歸及灌胃當歸前后兔血漿的色譜指紋圖譜的對比分析，可同時分析篩選當歸中被吸收到家兔體內(nèi)的多種活性成分及血液中的代謝成分。并通過分析其進入體內(nèi)活性成分的濃度消長和變化，對血液中測定的各組分的生物活性進行判斷和預測。本研究提示，色譜指紋圖譜技術(shù)可以用于同時分析中藥中多種成分在體內(nèi)的吸收代謝和藥代動力學研究。 三、利用HPLC

5、-DAD提供的二維化學數(shù)據(jù)信息，結(jié)合化學計量學方法，對統(tǒng)一試驗條件下的當歸補血湯及其單味藥的色譜組分進行了比較和歸屬分析(第五章、第六章)。在中藥各組分不完全清楚的情況下，利用聯(lián)用色譜儀器和光譜相關色譜方法，可以直接判斷中藥復方及其單味藥的不同流出色譜指紋圖譜中相關物質(zhì)歸屬，而不用對各色譜峰簇進行組分分辨和化學定性，快捷實現(xiàn)中藥復方與單味藥化學成分比較研究和追蹤，對中藥復方的物質(zhì)組成和質(zhì)量控制以及藥效物質(zhì)基礎研究提供一種快捷的比較方法。

6、 四、當歸補血湯復方及其單味藥治療家兔血吸蟲病肝纖維化的藥理藥效研究(第七章)。首次發(fā)現(xiàn)當歸補血湯復方對家兔血吸蟲病肝纖維化有較好的治療效果。結(jié)合吡喹酮治療家兔血吸蟲病肝纖維化，用B超聲圖像評估當歸、黃芪和當歸補血湯治療血吸蟲病肝纖維化的效果。研究發(fā)現(xiàn)當歸補血湯對血吸蟲病肝纖維化的治療作用優(yōu)于單味藥當歸或黃芪。并對當歸補血湯復方及其單味藥的化學成分用色譜指紋圖譜技術(shù)進行了分析檢測。分析了當歸補血湯復方與單味藥的歸屬。初步在色譜指