新型骨靶向磁共振成像造影劑的研究.pdf

1、磁共振成像造影劑在疾病診斷上有重要作用，但現(xiàn)有臨床用造影劑缺乏組織靶向性、弛豫率低、穩(wěn)定性差。骨肉瘤發(fā)生率占骨腫瘤疾病的35％，但目前臨床無(wú)骨靶向磁共振成像造影劑。本文設(shè)計(jì)并合成了一種新型骨靶向磁共振成像造影劑Gd2-DTPA-bis(ALN)，進(jìn)行了體內(nèi)外評(píng)價(jià)，并與臨床用造影劑馬根維顯（Gd-DTPA, Magnevist(R)）對(duì)照。
　　1.新型骨靶向磁共振成像造影劑的設(shè)計(jì)與合成。將骨靶向藥物阿侖膦酸鈉和臨床用造影劑釓-二乙

2、基三胺五乙酸通過(guò)共價(jià)鍵偶聯(lián)，通過(guò)多步化學(xué)反應(yīng)，生成骨靶向造影劑釓-二乙基三胺五乙酸雙阿侖膦酸鈉（Gd2-DTPA-bis(ALN)），并用核磁、質(zhì)譜、紅外等方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。
　　2.新型骨靶向磁共振成像造影劑的含量測(cè)定。骨靶向造影劑Gd-DTPA-bis(ALN)分子內(nèi)無(wú)雙鍵、苯環(huán)等結(jié)構(gòu)，無(wú)紫外吸收，現(xiàn)有光譜學(xué)等方法無(wú)法測(cè)定其含量。本文用電感耦合等離子體質(zhì)譜法（ICP-MS）測(cè)定造影劑中Gd3+含量，進(jìn)一步得到造影劑含量，測(cè)得G

3、d3+的百分含量為23.8%。該方法具有靈敏度高、操作方便等優(yōu)點(diǎn)。通過(guò)考察DTPA-bis(ALN)的穩(wěn)定性常數(shù)，得到logKβML為23.17，與市售造影劑Gd-DTPA的22.46相近，說(shuō)明Gd2-DTPA-bis(ALN)穩(wěn)定性較好。
　　3.羥基磷灰石吸附骨靶向磁共振成像造影劑的研究。羥基磷灰石是骨主要成分，測(cè)定Gd2-DTPA-bis(ALN)與羥基磷灰石的結(jié)合率較高，平均吸附率為39.925%，市售造影劑Gd-DTPA

4、幾乎與羥基磷灰石沒(méi)有結(jié)合。因此我們制備的新型造影劑具有很強(qiáng)的羥基磷灰石結(jié)合性能，也預(yù)測(cè)其在體內(nèi)有較好骨靶向性。
　　4.新型骨靶向磁共振成像造影劑弛豫率的測(cè)定。順磁性磁共振造影劑通過(guò)增強(qiáng)水質(zhì)子的弛豫效率提高磁共振造影效果。在醫(yī)用磁共振設(shè)備上顯示，Gd2-DTPA-bis(ALN)的弛豫率為3.806 mmol-1.L.s-1，高于市售藥Gd-DTPA的弛豫率(2.718 mmol-1.L.s-1)。前者弛豫率比后者高1.4倍。該結(jié)

5、果證明我們制備的新型造影劑的磁共振成像效果高于市售藥Gd-DTPA。
　　5.新型骨靶向磁共振成像造影劑的小鼠急性毒性研究。給小鼠靜脈注射不同劑量Gd2-DTPA-bis(ALN)，觀察毒理反應(yīng)，確定其半數(shù)致死劑量（ID50）為0.66 g/Kg，零致死量為0.375mmol/Kg，100%致死量為3.0mmol/Kg。
　　6.新型骨靶向磁共振成像造影劑的骨肉瘤細(xì)胞的靶向性研究。Gd2-DTPA-bis(ALN)具有偕二膦

6、酸基團(tuán)，與破骨細(xì)胞和成骨細(xì)胞都有較強(qiáng)親和性。用骨肉瘤細(xì)胞UMR106作為模型，考察Gd2-DTPA- bis(ALN)和Gd-DTPA對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，發(fā)現(xiàn)Gd2-DTPA-bis(ALN)的濃度低于10-5mol/L時(shí)，對(duì)細(xì)胞無(wú)影響；當(dāng)濃度提高至10-3mol/L時(shí)，能部分促進(jìn)細(xì)胞增殖，而Gd-DTPA無(wú)此作用。因此Gd2-DTPA-bis(ALN)與骨肉瘤細(xì)胞有較強(qiáng)親和能力。
　　7.新型骨靶向磁共振成像造影劑的骨肉瘤動(dòng)物模型

7、的影像學(xué)研究。裸鼠股骨遠(yuǎn)端脛骨近端注射骨肉瘤UMR106細(xì)胞，建立原位骨肉瘤模型并通過(guò)X射線影像確認(rèn)。骨肉瘤模型裸鼠靜脈注射造影劑后，在不同時(shí)間點(diǎn)通過(guò)磁共振成像儀進(jìn)行影像學(xué)研究。Gd2-DTPA-bis(ALN)在0～5min主要在血管中顯影，在25～50min主要在骨肉瘤顯影，75min后主要在肝腎顯影，說(shuō)明藥物被排泄。而對(duì)照藥Gd-DTPA在0～5min主要在血管中顯影，之后在各組織均有強(qiáng)度相當(dāng)?shù)娘@影。因此與市售造影劑比較，Gd2-