臍血維生素D結(jié)合蛋白預(yù)測(cè)早產(chǎn)兒早發(fā)型敗血癥價(jià)值的研究.pdf

1、新生兒敗血癥(Neonatal sepsis)是指發(fā)生在新生兒出生28天以內(nèi)的系統(tǒng)性感染，其中早發(fā)型敗血癥(early on-set sepsis，EOS)是指發(fā)生在生后7天內(nèi)的新生兒敗血癥，但是國(guó)外傾向于將新生兒早發(fā)型敗血癥定義為生后72小時(shí)內(nèi)發(fā)病。早產(chǎn)兒（preterm infant）的特異性免疫功能不完善，是病原菌感染的高危人群，因此早產(chǎn)兒EOS的發(fā)病率及死亡率均高于足月兒，是目前導(dǎo)致早產(chǎn)兒死亡的主要因素之一。EOS的早期臨床癥狀

2、及體征均不典型，而且實(shí)驗(yàn)室感染指標(biāo)敏感性較差，對(duì)早期臨床診斷的指導(dǎo)意義不夠理想。因此，EOS的早期診斷仍是對(duì)新生兒醫(yī)師的一大挑戰(zhàn)。臍血作為可在新生兒期獲得的最早的血液標(biāo)本，理論上講臍血感染指標(biāo)的檢測(cè)對(duì)早期預(yù)測(cè)及診斷 EOS具有參考價(jià)值，而且臍血降鈣素原（procalcitonin, PCT）、白細(xì)胞介素-6（interleukin-6，IL-6）等感染指標(biāo)對(duì)早期預(yù)測(cè)、診斷EOS價(jià)值的研究已獲得一定的成果。本實(shí)驗(yàn)在于探討臍血維生素D結(jié)合蛋

3、白（vitamin D binding protein， VDBP）、25-羥基維生素 D（25-Hydroxyvitamin D，25-(OH)D）、降鈣素原（PCT）水平在早期預(yù)測(cè)早產(chǎn)兒早發(fā)型敗血癥中的價(jià)值。
　　維生素 D是一種脂溶性維生素，其主要生物學(xué)功能是參與體內(nèi)骨及礦物質(zhì)的代謝，但是維生素D在免疫調(diào)節(jié)中的重要作用近年來(lái)備受關(guān)注。VDBP是體內(nèi)維生素 D代謝的主要蛋白，其主要功能是結(jié)合、轉(zhuǎn)運(yùn)維生素D及其衍生物，近年研究發(fā)

4、現(xiàn)VDBP在炎癥及機(jī)體損傷過(guò)程中發(fā)揮作用。一項(xiàng)關(guān)于成人敗血癥的研究顯示敗血癥患者體內(nèi)25-(OH)D、VDBP水平均顯著低于健康組，且與疾病的不良愈后有關(guān)。另一項(xiàng)關(guān)于危重癥患者體內(nèi)VDBP研究發(fā)現(xiàn)患有敗血癥的危重癥患者VDBP水平明顯低于未患敗血癥的危重癥患者，而且血清低 VDBP水平影響患者的生存率。以上結(jié)果顯示在成人敗血癥患者中25-(OH)D、VDBP水平均降低，且均與疾病的不良愈后有關(guān)。Mehmet NC在2015年就 EOS新

5、生兒臍血25-(OH)D水平是否降低進(jìn)行研究，指出EOS新生兒臍血25-(OH)D水平明顯低于正常對(duì)照組，低25-(OH)D水平可增加新生兒早發(fā)型敗血癥的風(fēng)險(xiǎn)。但是EOS早產(chǎn)兒血清VDBP水平變化目前尚未見(jiàn)報(bào)道。
　　目的：
　　1.通過(guò)檢測(cè)早發(fā)型敗血癥（EOS）早產(chǎn)兒與對(duì)照組早產(chǎn)兒臍血維生素D結(jié)合蛋白（VDBP）、25羥基維生素D（25-(OH)D）、降鈣素原（PCT）水平，探究臍血VDBP、25-(OH)D、PCT水平變

6、化對(duì)早產(chǎn)兒EOS的預(yù)測(cè)價(jià)值及VDBP、25-(OH)D是否可作為預(yù)測(cè)早產(chǎn)兒EOS的新指標(biāo)；
　　2.通過(guò)對(duì)比檢測(cè)EOS早產(chǎn)兒與對(duì)照組早產(chǎn)兒臍血VDBP、25-(OH)D及PCT水平變化，探究臍血VDBP、25-(OH)D對(duì)早產(chǎn)兒EOS早期預(yù)測(cè)價(jià)值與傳統(tǒng)指標(biāo)PCT相比是否存在優(yōu)勢(shì)；
　　3.探究EOS早產(chǎn)兒及對(duì)照組早產(chǎn)兒血清VDBP與25-(OH)D的關(guān)系，了解兩者在EOS病程中是否存在協(xié)同關(guān)系。
　　方法：
　　

7、1.研究對(duì)象及分組
　　研究對(duì)象選取2015-10至2016-12在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院產(chǎn)科出生并轉(zhuǎn)入河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院新生兒重癥監(jiān)護(hù)病房（neonatal intensive care unit, NICU）的早產(chǎn)兒。除外存在其他系統(tǒng)嚴(yán)重畸形、遺傳代謝性疾病、產(chǎn)傷或分娩中發(fā)生窒息缺氧；生后72小時(shí)內(nèi)死亡及自動(dòng)放棄治療者；住院時(shí)疾病分類不明、出院時(shí)診斷為晚發(fā)型敗血癥者；標(biāo)本量采集不足及血液標(biāo)本溶血者。共納入早產(chǎn)兒85例，記錄早產(chǎn)

8、兒性別、體重及胎齡等基本臨床特征。根據(jù)其病情轉(zhuǎn)歸及胎齡分為四組，EOS組1（EOS group1，27周≤GA<34周），EOS組2（EOS group2，34周≤GA<37周），對(duì)照組1（Control group1,27周≤GA<34周），對(duì)照組2（Control group2，34周≤GA<37周）。所有入組早產(chǎn)兒病情變化均由河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院經(jīng)驗(yàn)豐富的新生兒科醫(yī)生參與觀察（包括分娩、早產(chǎn)兒轉(zhuǎn)運(yùn)、進(jìn)入NICU直至出院）。新生兒早

9、發(fā)型敗血癥（EOS）診斷標(biāo)準(zhǔn)按照2011年第四版實(shí)用新生兒學(xué)中的EOS診斷標(biāo)準(zhǔn)。
　　2.標(biāo)本留取及制備
　　所納入早產(chǎn)兒出生后立即抽取臍動(dòng)脈血2-3ml，并于生后72小時(shí)內(nèi)抽取外周靜脈血1.5ml-2ml，診斷為早發(fā)型敗血癥早產(chǎn)兒于有效抗生素治療10-14天后采集外周靜脈血1.5ml-2ml。所有血液標(biāo)本采集后離心收集血清，于-80℃低溫保存待測(cè)VDBP、25-(OH)D、及PCT。
　　3.實(shí)驗(yàn)指標(biāo)測(cè)定
　　

10、采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（enzyme-linked immunoso-rbent assay，ELISA）的方法檢測(cè)血清VDBP、25-(OH)D、PCT水平；
　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　本實(shí)驗(yàn)所有數(shù)據(jù)均應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS13.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析處理，符合正態(tài)分布的計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X±S）表示，偏態(tài)分布的計(jì)量資料采用中位數(shù)（四分位數(shù)間距）（M(Q)）表示，計(jì)數(shù)資料采用率（％）表示。
　　計(jì)量資料

11、：兩樣本均數(shù)的比較采用 t檢驗(yàn)（t-test），非正態(tài)兩樣本比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)；相關(guān)性分析采用Spearman’s線性相關(guān)。計(jì)數(shù)資料：采用卡方檢驗(yàn)或Fisher確切概率法。采用ROC曲線（ROC Curve）檢測(cè)不同指標(biāo)的診斷價(jià)值。統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用雙側(cè)檢驗(yàn)，P<0.05視為差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　1.EOS組與對(duì)照組早產(chǎn)兒基本臨床特征分析：兩組早產(chǎn)兒在性別、出生體重、胎齡方面組間平衡分析均P

12、>0.05，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　2.兩組早產(chǎn)兒臍血VDBP、25-(OH)D及PCT水平變化：
　　EOS組與對(duì)照組早產(chǎn)兒臍血 VDBP、25-(OH)D水平分別為69.37±13.42、91.30±17.07ng/ml與22.09±7.13、31.01±12.63ng/ml，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異均具有顯著性（P<0.05）；PCT水平分別為131.79、95.89 pmol/L，經(jīng)Mann-Whitney U檢驗(yàn)，差異具有顯著性

13、（P<0.05）。
　　3.不同胎齡早產(chǎn)兒臍血VDBP、25-(OH)D、PCT水平變化：
　　EOS組：EOS1組與EOS2組早產(chǎn)兒臍血VDBP、25-(OH)D水平分別為65.22±12.22、76.00±12.93ng/mL與19.99±8.83、25.45±7.90ng/mL，經(jīng) t檢驗(yàn)，差異均具有顯著性（P<0.05）；PCT水平分別為138.71、110.83pmol/L，經(jīng)Mann-Whitney U檢驗(yàn)，差異

14、具有顯著性（P<0.05）。
　　對(duì)照組：對(duì)照1組與對(duì)照2組早產(chǎn)兒臍血VDBP、25-(OH)D水平分別為87.50±15.52、94.49±17.95ng/mL與27.52±12.86、33.94±11.91ng/mL，經(jīng) t檢驗(yàn)，差異均無(wú)顯著性（P>0.05）； PCT水平分別為95.64、89.51 pmol/L，經(jīng)Mann-Whitney U檢驗(yàn)，差異無(wú)顯著性（P>0.05）。
　　4.早產(chǎn)兒25-(OH)D與VDB

15、P水平相關(guān)性分析：
　　采用Spearman’s相關(guān)分析：EOS組早產(chǎn)兒臍血及生后72小時(shí)靜脈血25-(OH)D與VDBP無(wú)明顯相關(guān)性（r=0.272，P=0.086及r=0.170，P=0.299）；對(duì)照組早產(chǎn)兒臍血及生后72小時(shí)靜脈血25-(OH)D與VDBP均呈正相關(guān)（r=0.315，P=0.033及r=0.303，P=0.041）。
　　5.EOS組與對(duì)照組早產(chǎn)兒生后72小時(shí)靜脈血VDBP、25-(OH)D、PCT水

16、平變化：
　　EOS組早產(chǎn)兒與對(duì)照組早產(chǎn)兒生后72小時(shí)靜脈血VDBP、25-(OH)D分別為64.60±11.32、93.96±14.25ng/mL與23.52±6.03、34.23±10.71ng/mL，經(jīng)t檢驗(yàn)，差異均具有顯著性（P<0.05）；PCT水平分別為186.48、125.29 pmol/L，經(jīng)Mann-Whitney U檢驗(yàn)，差異具有顯著性（P<0.05）。
　　6.EOS早產(chǎn)兒生后72小時(shí)靜脈血與應(yīng)用抗生素

17、后靜脈血 VDBP、25-(OH)D、PCT水平變化：
　　EOS組早產(chǎn)兒生后72小時(shí)靜脈血、應(yīng)用抗生素后靜脈血的VDBP、25-(OH)D水平分別為64.60±11.32、91.09±12.99ng/ml與23.52±6.03、28.52±8.46ng/ml，經(jīng) t檢驗(yàn)，差異均具有顯著性（P<0.05）；PCT水平分別為186.48、89.83 pmol/L，經(jīng)Mann-Whitney U檢驗(yàn)，差異具有顯著性（P<0.05）。<

18、br>　　7.臍血VDBP、25-(OH)D、PCT對(duì)EOS預(yù)測(cè)的臨床價(jià)值：
　　以臍血VDBP、25-(OH)D、PCT繪制ROC曲線，曲線下面積（AUC）分別為0.777（95%CI0.678~0.876）、0.807（95%CI0.710~0.904）、0.840（95%CI0.754~0.926），提示臍血VDBP、25-(OH)D、PCT均具有早期預(yù)測(cè)早產(chǎn)兒EOS的價(jià)值。
　　結(jié)論：
　　1.臍血VDBP、2

19、5-(OH)D、PCT水平變化均具有早期預(yù)測(cè)EOS的價(jià)值。
　　2.EOS早產(chǎn)兒臍血及生后72小時(shí)靜脈血VDBP、25-(OH)D水平明顯降低，且抗生素治療后其水平明顯升高，提示有望成為早期預(yù)測(cè)、診斷早產(chǎn)兒EOS及評(píng)估療效的新指標(biāo)。
　　3.對(duì)照組早產(chǎn)兒臍血及生后72小時(shí)靜脈血中VDBP與25-(OH)D呈正相關(guān)，EOS組早產(chǎn)兒臍血及生后72小時(shí)靜脈血中VDBP與25-(OH)D無(wú)明顯關(guān)系，提示在正常生理狀態(tài)下VDBP與25