神經(jīng)病理性疼痛小鼠海馬orexins的變化及其信號機制研究.pdf

1、研究目的：
　　本研究擬采用形態(tài)學、行為學、分子生物學和免疫學手段，在小鼠坐骨神經(jīng)慢性壓迫性損傷模型上，探討orexin系統(tǒng)在神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生發(fā)展中的作用及其可能的信號機制，為慢性疼痛的防治提供理論依據(jù)。
　　研究方法：
　　雄性bal b/c成年小鼠隨機分為假手術組（Sham組）和CCI組，測定各組小鼠機械痛閾和熱痛閾基礎值后，參考Bennett和Xie等的方法建立小鼠左側CCI模型。Sham組進行同樣的手術，暴露

2、坐骨神經(jīng)但不結扎。分別于術后1、4、7、14、21、28天測定各組小鼠的機械痛閾和熱痛閾。模型動物在深麻醉下處死，取下丘腦、海馬，采用實時熒光定量PCR方法檢測下丘腦p-orexin、海馬OXR-1、OXR-2的表達，并用免疫印跡(Western blot)方法檢測海馬pCREB、pERK的表達。
　　研究結果：
　　1，兩組小鼠術前的機械刺激縮足反應閾(Paw mechanical withdrawal threshold

3、，PMWT)、熱刺激縮足反應閾（Paw thermal withdrawal latency，PTWL）沒有顯著性差異(P＞0.05)。術后第4天至28天的各時間點CCI組小鼠PMWT較sham組明顯降低(P＜0.05)。術后第1天至28天的各時間點CCI組小鼠PTWL較sham組明顯降低（P＜0.05）。
　　2，應用實時熒光定量PCR技術，海馬OXR-2基因在CCI后21、28天較Sham組表達降低（P＜0.01）。下丘腦p-

4、orexin基因在CCI后7天內(nèi)的表達較Sham組有上升趨勢（P＜0.05），CCI術后14天較sham組開始有下降趨勢（P＜0.01）。海馬OXR-1基因在CCI后14、21天較sham組的表達升高(P＜0.05)。
　　3，應用western blot技術，海馬pCREB、pERK在CCI后21、28天較Sham組明顯減低（P＜0.05），海馬CREB、ERK在CCI后各天表達未見明顯變化。
　　研究結論：
　　1