β-七葉皂甙鈉治療神經(jīng)病理性疼痛的研究.pdf

1、目的:
　　觀察鞘內(nèi)分別注入β-七葉皂甙鈉20μ g和40μg的抗神經(jīng)病理性疼痛作用，分析脊髓背角細(xì)胞因子表達(dá)譜的變化，明確鞘內(nèi)β-七葉皂甙鈉抗神經(jīng)病理性疼痛作用與脊髓背角細(xì)胞因子TNF-a、IL-1β和IL-6表達(dá)的相關(guān)性。
　　方法:
　　1.建立實(shí)驗(yàn)動物模型:雄性體重180-200g的SD大鼠，腹腔內(nèi)注入咪唑安定(2mg/kg)和氯胺酮(40mg/kg)麻醉后，將PE-10導(dǎo)管從大鼠枕骨大孔入蛛網(wǎng)膜下腔向尾側(cè)插入

2、7.0-7.5cm至脊髓腰骶段，另一端固定在頸外供注實(shí)驗(yàn)藥物。7天后，無運(yùn)動功能障礙大鼠者，在同樣的麻醉下，結(jié)扎SD大鼠一側(cè)腰5-6神經(jīng)，建立神經(jīng)病理性疼痛模型，7天后，用于下一步實(shí)驗(yàn)。
　　2.藥物實(shí)驗(yàn):生理鹽水、β-七葉皂甙鈉20μ g和40μ g分別從PE-10導(dǎo)管注入蛛網(wǎng)膜下腔。
　　3.傷害刺激實(shí)驗(yàn):(1)機(jī)械性閾值的測定。將SD大鼠置于實(shí)驗(yàn)容器中適應(yīng)20min后，用vonFrey纖維絲垂直于大鼠結(jié)扎側(cè)后肢足底中部

3、，然后給予刺激，持續(xù)刺激時間≤6秒，當(dāng)大鼠出現(xiàn)舔足、抬腳反應(yīng)時，則認(rèn)為是陽性反應(yīng)。從2g刺激開始進(jìn)行反應(yīng)測試，若該初始2g力度的刺激不能有效的誘導(dǎo)陽性反應(yīng)，則調(diào)整使用比2g相鄰大一級別的力度進(jìn)行持續(xù)刺激。當(dāng)調(diào)整刺激力度使陽性反應(yīng)被引發(fā)產(chǎn)生時，則改變成級別相鄰小一級的力度進(jìn)行刺激實(shí)驗(yàn)。通過數(shù)次連續(xù)的不同力度傷害刺激以后，出現(xiàn)第一次陽性反應(yīng)測定結(jié)果和陰性測定反應(yīng)結(jié)果的改變，再繼續(xù)連續(xù)測定四次，并將該值結(jié)果記錄，最大力度閾值限制在15g，若對

4、大鼠持續(xù)刺激的力度大于15g時則記成15g，每次進(jìn)行持續(xù)刺激的相鄰間隔時間為30s。(2)熱痛閾值的測定。將SD大鼠放入有機(jī)玻璃箱內(nèi)的玻璃板上，在大鼠結(jié)扎側(cè)足底緊靠玻璃板的部位使用熱輻射刺激儀照射。記錄開始照射至大鼠出現(xiàn)抬足的時間間隔，如此重復(fù)測定5次，記錄后3次的平均值。每次間隔5min進(jìn)行下一次測定。
　　4.使用實(shí)時熒光定量RT-PCR方法分析脊髓背角細(xì)胞因子表達(dá)譜的變化。
　　結(jié)果:
　　β-七葉皂甙鈉組的最大

5、效應(yīng)百分比(MPE)隨實(shí)驗(yàn)藥物劑量的增加而增大，七葉皂苷鈉20μ g、40μ g組MPE均明顯高于生理鹽水組(P＜0.05);七葉皂苷鈉可明顯減緩大鼠的熱痛閾值的降低(Paw Withdraw al Latency，PWL);并降低脊髓背角細(xì)胞因子TNF-a、IL-1β、IL-6的水平。
　　結(jié)論:
　　大鼠鞘內(nèi)注射β-七葉皂甙鈉可以產(chǎn)生劑量依賴性抗神經(jīng)病理性疼痛作用，其作用機(jī)制可能與其抑制TNF-a、IL-1β、IL-6的