利用PET技術(shù)評價(jià)羅匹尼羅對大鼠多巴胺受體的占有率及其藥動-藥效研究.pdf

1、目的：
　　采用以18F-Fallypride為顯像劑的正電子發(fā)射型計(jì)算機(jī)斷層成像掃描（PET）技術(shù)，研究抗帕金森病藥物羅匹尼羅對紋狀體多巴胺D2受體的受體占有率；并考察羅匹尼羅在大鼠血漿和紋狀體的藥動學(xué)特性；通過藥動-藥效研究，探討羅匹尼羅的血藥濃度和受體占有率之間的相關(guān)性。
　　方法：
　　選用雄性SD大鼠，尾靜脈注射不同劑量的羅匹尼羅溶液，給藥劑量分別為5、15、30和60 mgkg-1。
　?。?）18F

2、-Fallypride多巴胺D2受體PET顯像研究：每劑量組每掃描時(shí)間點(diǎn)4只大鼠，每批掃描同時(shí)隨行4只大鼠進(jìn)行基線掃描，于尾靜脈注射18F-Fallypride后接受10 min PET靜態(tài)掃描，勾畫紋狀體和小腦為感興趣區(qū)，計(jì)算感興趣區(qū)的標(biāo)準(zhǔn)攝取值，采用簡單參考組織模型（SRTM）計(jì)算結(jié)合位能（BP）與受體占有率；
　?。?）羅匹尼羅在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)研究：每劑量組6只大鼠進(jìn)行血漿藥代動力學(xué)實(shí)驗(yàn)，給藥前后各時(shí)間點(diǎn)采集血樣；每劑量組

3、每取樣時(shí)間點(diǎn)4只大鼠進(jìn)行紋狀體藥代動力學(xué)實(shí)驗(yàn)，給藥后設(shè)定時(shí)間點(diǎn)同時(shí)采集血樣和紋狀體。使用超高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用法（UPLC-MS/MS）測定血漿和紋狀體勻漿中羅匹尼羅的濃度，WinNonlin軟件的非房室模型分析血漿和紋狀體藥動學(xué)參數(shù)；評價(jià)血漿和紋狀體中羅匹尼羅濃度的相關(guān)性；
　　（3）羅匹尼羅的血藥濃度和受體占有率的藥動-藥效研究：使用WinNonlin軟件對羅匹尼羅在大鼠的血漿藥動學(xué)和受體占有率數(shù)據(jù)分析，擬合最佳藥動-藥效

4、（PK-PD）模型，預(yù)測羅匹尼羅對紋狀體多巴胺D2受體的受體占有率隨血藥濃度變化的規(guī)律。應(yīng)用自舉法和蒙特卡洛模擬對模型的穩(wěn)定性和可信度進(jìn)行驗(yàn)證。
　　結(jié)果：
　?。?）羅匹尼羅與紋狀體多巴胺D2受體的結(jié)合情況：對基線掃描的18F-Fallypride BP值進(jìn)行單因素方差分析，各次掃描結(jié)果間無顯著性差異（p>0.05），證明掃描方法穩(wěn)定可靠，重復(fù)性好。15 mgkg-1劑量組的掃描結(jié)果顯示時(shí)間依賴性變化，隨給藥后時(shí)間的延長，

5、羅匹尼羅的受體占有率由56.23±6.39％下降至15.19±13.60%（p<0.05）；給藥后0.17 h的掃描結(jié)果顯示劑量依賴性變化，隨著給藥劑量的升高，羅匹尼羅的受體占有率由6.09±15.32%上升至92.89±2.83%（p<0.05）；
　?。?）血漿和紋狀體勻漿中羅匹尼羅濃度測定的方法學(xué)確證：使用UPLC-MS/MS方法測定大鼠血漿和紋狀體勻漿液中羅匹尼羅的濃度，線性范圍為1~5000 ngmL-1，線性良好（r2

6、>0.99）。方法的批內(nèi)、批間精密度，回收率，基質(zhì)效應(yīng)，穩(wěn)定性等均符合生物樣本檢測要求；
　?。?）羅匹尼羅在大鼠血漿的藥動學(xué)特征：羅匹尼羅給藥后在血漿中迅速消除。經(jīng)非房室模型分析，四個(gè)劑量水平的消除半衰期（t1/2）分別為0.84±0.12、0.75±0.25、0.98±0.17和1.17±0.13 h，表觀分布容積（Vz）分別為8593.79±1363.21、3964.02±1345.75、6897.94±974.83和528

7、4.12±543.23 mLkg-1，清除率（Cl）分別為7044.32±316.91、3685.73±488.32、4912.63±520.31和3135.86±96.61 mLh-1kg-1；
　?。?）羅匹尼羅在大鼠紋狀體的藥動學(xué)特征：羅匹尼羅在紋狀體中的濃度變化和受體占有率的變化趨勢一致，并和血藥濃度存在良好的線性相關(guān)性（r2=0.9424，p<0.05）。經(jīng)非房室模型分析，15 mgkg-1劑量組的紋狀體羅匹尼羅的半衰期

8、為1.31±0.25 h；
　?。?）羅匹尼羅在大鼠的藥動-藥效模型的建立：以一級消除的二房室模型為藥動學(xué)基礎(chǔ)模型，以最大效應(yīng)模型為藥效學(xué)基礎(chǔ)模型，擬合藥動-藥效模型參數(shù)得：中央室表觀清除率（Cl）為3309.09±565.13 mLh-1kg-1，中央室表觀分布容積（V1）為523.54±96.03 mLkg-1，室間清除率（Q）為7511.72±1114.50 mLh-1kg-1，外周室表觀分布容積（V2）為1526.57±2

9、51.00 mLkg-1，半數(shù)占有血藥濃度（EC50）為1390.70±96.49 ng?mL-1，平衡解離常數(shù)（ke0）為1.09±0.08 h-1。自舉法證明模型穩(wěn)定有效，蒙特卡洛模擬得到不同劑量和給藥后時(shí)間的血藥濃度和受體占有率的相關(guān)性。
　　結(jié)論：
　　羅匹尼羅與紋狀體多巴胺D2受體的結(jié)合具有劑量依賴性和時(shí)間依賴性；羅匹尼羅在大鼠的血漿和紋狀體具有相似的藥動學(xué)特征；羅匹尼羅的藥動-藥效模型可動態(tài)、定量的描述大鼠羅匹尼