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文檔簡介
1、白紋伊蚊(Aedes albopictus Skuse)和埃及伊蚊(Aedes aegypti Linnaeus)是熱帶傳染性疾病登革熱(Dengue Fever,DF)是傳播媒介。由于該病的發(fā)病率在最近幾十年里大幅度上升,現(xiàn)今無安全有效的藥物用于登革熱的特異性預(yù)防和治療。因此,當(dāng)今大多數(shù)國家多采用控制和監(jiān)測其傳播媒介伊蚊的方法來防治登革熱。其中,驅(qū)避劑的使用一直是阻止該病傳播的一個重要手段。國內(nèi)外關(guān)于驅(qū)避劑研究報道較多,但隨著合成驅(qū)避
2、劑DEET的抗性和副作用問題越來越引起大眾的擔(dān)憂,研究者們開始更多的從植物中尋找更加高效安全低毒的天然驅(qū)避劑來替代DEET。本研究以白紋伊蚊(主)和埃及伊蚊(次)為實驗對象,綜合運用多種生物測定方法來評估24種精油的驅(qū)避活性,具體研究內(nèi)容如下:
1.伊蚊類蚊蟲標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)方法改進研究。在比較國內(nèi)外實驗室飼養(yǎng)蚊蟲的差異基礎(chǔ)上優(yōu)化實驗室內(nèi)蚊蟲飼養(yǎng)步驟,如更快更好分離蚊蟲蛹與幼蟲,成功組裝一套人工血膜裝置,可代替動物用于蚊蟲飼養(yǎng)與繁殖,
3、也可改裝成離體模型生物測定方法來評價待測物的驅(qū)避活性;
2.植物精油驅(qū)避蚊蟲效果生物測試方法的改進研究。本章綜合探討四種離體生物測試模型的組裝和應(yīng)用。實驗摸索后確定K&D模型的最佳叮咬膜界面為Parafilm封口膜,其引誘率達到66.7%,確定Y型嗅覺行為測試儀的最佳測試條件為:流速0.3 L/min,135s,195s和255s時其引誘率達到穩(wěn)定值83%;
3.24種植物精油對伊蚊的驅(qū)避效果研究。采用Y型嗅覺儀初篩
4、24種植物精油后證實以H油,生姜油,丁香花蕾油,廣藿香油等13種精油在內(nèi)表現(xiàn)出95%以上的驅(qū)避率,再用人手涂膚蚊籠實驗評價9種精油,對白紋伊蚊的驅(qū)避效果最好的是30%的丁香花蕾油,其完全保護時間(CPT)達到130min,其次是廣藿香油90min,同時丁香花蕾油的ED50值為0.002μg/cm2[95%,0.000-0.005],該濃度顯著低于廣藿香油的2.496μg/cm2[95%,0.504-5.068],丁香花蕾油CPT中值為6
5、0min與廣藿香的36min差異不顯著,丁香花蕾油比廣藿香油在更低濃度能展示更好的驅(qū)避活性,但持效性差異不大。對三種不同產(chǎn)地的H精油用Hemotek人工血膜系統(tǒng)離體方法評價其驅(qū)避率,以DEET為陽性對照,確定3個H系列精油的驅(qū)避率極佳。
4.陳年精油與新鮮精油驅(qū)避持效性比較研究。通過對比9種新鮮的和陳年的精油驅(qū)避活性,發(fā)現(xiàn)同濃度下,陳年精油的持效性得到大力延長,如生姜最高可以比新鮮精油的CPT高8倍之多,由最初的15min改善
6、到120min。
5.白紋伊蚊對三種植物精油的嗅覺電位反應(yīng)測定。通過結(jié)合GC-MS和GC-EAD兩種蚊蟲化學(xué)生態(tài)學(xué)方法鑒定三個H精油,廣藿香油及丁香花蕾油的驅(qū)避活性成分。證實蚊蟲對多種化合物呈現(xiàn)強烈的嗅覺活性電生理反應(yīng),常見的已報道具有驅(qū)避活性的如芳樟醇,石竹烯等化合物,同時茉莉酮,二氫茉莉酮酸甲酯也具有很明顯的觸角電生理反應(yīng),可能是很好的潛在驅(qū)避活性單體。
綜上所述,本論文以白紋伊蚊和埃及伊蚊為研究對象,組裝了一套
7、膜系統(tǒng)喂血裝置用于蚊蟲飼養(yǎng),改進了包括K&D離體模型和Y-tube嗅覺行為測試儀等在內(nèi)的多種離體生物測定方法,用Y型嗅覺儀初篩24種植物精油,有10種包括A油在內(nèi)的精油達到95%以上的驅(qū)避率,用Hemotek離體方法進一步證實A油的良好驅(qū)蚊活性,對丁香花蕾油和廣藿香油等多種精油采用人手涂膚方法評價其驅(qū)避率和完全保護時間,結(jié)論是丁香花蕾油能在更低濃度下保護人類不被蚊蟲叮咬。用GC-MS和GC-EAD等生化生理方法確定了白紋伊蚊對多種植物精
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