白紋伊蚊引誘劑的研制及登革熱預警指標的初步探討.pdf

1、研究背景：
　　 登革熱(dengue fever,DF)是由登革病毒引起,主要通過埃及伊蚊(Aedesaegypti)和白蚊伊蚊(Aedes albopictus)傳播的急性蟲媒傳染病,主要流行于熱帶和亞熱帶地區(qū)。隨著經濟全球化以及全球氣候變暖,環(huán)境的日益惡劣,登革熱已經成為了世界上流行最廣,發(fā)病人數最多的蟲媒傳染病之一。同時,該病所具有突發(fā)性,傳播迅速,發(fā)病率高的流行特點,已經令其成為了世界性的公共衛(wèi)生問題。在我國,登革熱主

2、要發(fā)生于廣東、海南、廣西、福建和臺灣,其中,廣東是我國登革熱流行的重災區(qū),發(fā)病人數占到了全國的90％左右。近年來,該病有向北擴散之跡。白紋伊蚊作為廣東登革熱的主要傳播媒介,其分布、密度與登革熱的流行有著十分密切的聯(lián)系。在特異性疫苗尚未研制成功之前,對白紋伊蚊的密度監(jiān)測與控制仍是遏制登革熱流行勢態(tài)的主要手段。
　　 長期以來,國內外多采取被動的監(jiān)測方法如人帳誘捕法來獲得蚊媒的密度與分布。但是此類方法涉及到倫理學問題,易對監(jiān)測人員的

3、健康構成威脅,操作困難,科學性欠佳。近年來,容器監(jiān)測方法開始應用于世界各國公共衛(wèi)生部門的常規(guī)監(jiān)測中,可其誘蚊誘卵的效率并不是很好。為了更加準確的反映蚊媒密度的真實情況,需要尋找有效的蚊蟲引誘劑配方來提高監(jiān)測容器的引誘效率。同時,由于布雷圖指數(BI),容器指數(CI)等傳統(tǒng)監(jiān)測指標在城市里操作十分困難,急需對容器監(jiān)測法中相配套的監(jiān)測指標進行進一步的完善,使之更加合理準確地反映蚊媒密度。
　　 研究目的：
　　 1、研究高

4、效的白紋伊蚊引誘劑；
　　 2、利用戶外蚊媒常規(guī)監(jiān)測的數據進行登革熱容器監(jiān)測法配套指標的初步探討。
　　 研究方法
　　 一、白紋伊蚊引誘劑的篩選優(yōu)化
　　 據文獻報道,乳酸引誘力最強的濃度是1mg/ml,故以1mg/ml為中心,取三個濃度水平,加入到正交實驗中。對二甲基二硫醚(Dimethyl disμlfide),丙酮(acetone),二甲苯(xylene),氨水,魚粉浸泡液(fish flour

5、soak)五種試劑進行篩選,并對有效引誘試劑篩出最佳的三個水平。利用正交實驗對有效試劑進行優(yōu)化。
　　 1、魚粉浸泡液的制取及化學試劑濃度的選取
　　 將不同劑量的魚粉(fish flour)加入到50ml的去離子水中。得到1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml、6mg/ml、7mg/ml、8mg/ml、9mg/ml、10mg/ml十個濃度水平的魚粉浸泡液。十個濃度水平所捕獲的蚊子數進行比較

6、,得到最佳濃度水平為2mg/ml。由于,在以上十個濃度水平下,魚粉會引起去離子水的混濁,從而降低對成蚊的引誘力,因此,只從2mg/ml這個濃度水平的魚粉浸泡液中分別取25μl、50μl、75μl、100μl、125μl、150μl、175μl、200μl加入到引誘劑的篩選優(yōu)化實驗。
　　 二甲基二硫醚、丙酮、二甲苯、氨水等作為化學試劑,如果濃度過高,會腐蝕監(jiān)測容器,造成監(jiān)測成本升高；而濃度過低,則揮發(fā)較快,不利于長期引誘。因此,

7、每種試劑的濃度范圍定為0.5μl-4μl/ml,并在這一范圍內將試劑劃分為0.5μl/ml、1.5μl/ml、2μl/ml、2.5μ/ml、3μl/ml、3.5μl/ml和4μl/ml共8個等級。而乳酸如果降低到太低的濃度,基本引誘不到成蚊(<5只),綜合考慮,決定乳酸濃度不變,以原定最佳濃度(1mg/ml)為中心劃定三個水平(0.5mg/ml,1mg/ml,2mg/ml)進行實驗。
　　 2、引誘劑單獨成分與去離子水的對比實驗

8、:
　　 對每種試劑分別進行下列處理。取25μl、50μl、75μl、100μl、125μl、150μl、175μl和200μl試劑分別加入到裝有50ml去離子水的八個監(jiān)測容器作為實驗組,并用50ml去離子水作為對照組,放入長1.2m,短0.8m的蒙式蚊帳中,隨后在蚊帳放入約110只吸過血的白紋伊蚊成蚊,四天后回收容器并計數。實驗重復兩次。
　　 (1)二甲基二硫醚與去離子水的對比實驗；
　　 (2)丙酮與去離子

9、水的對比實驗；
　　 (3)二甲苯與去離子水的對比實驗:
　　 (4)氨水與去離子水的對比實驗；
　　 (5)魚粉浸泡液(2mg/ml)與去離子水的對比實驗。
　　 3、對每種試劑的有效引誘濃度進行優(yōu)選,尋找最佳濃度
　　 (1)二甲基二硫醚不同濃度的比較；
　　 (2)丙酮不同濃度的比較；
　　 (3)二甲苯不同濃度的比較；
　　 (4)魚粉浸泡液(2mg/ml)不同濃度

10、的比較。
　　 4、交互作用的篩選
　　 第一步,固定第一種試劑在第一個濃度時,變化第二種試劑的濃度,分別得到實驗組A1,A2；固定第一種試劑在第二個濃度時,變化第二種試劑的濃度,分別得到實驗組a1,a2。第二步,固定第二種試劑在第一個濃度時,變化第一種試劑的濃度,分別得到實驗組B1,B2；固定第二種試劑在第二個濃度時,變化第一種試劑的濃度,分別得到實驗組b1,b2。將以上幾個實驗組分別放入內有約110只成蚊的蚊帳中,四

11、天后回收并觀察兩步實驗引誘力變化趨勢的不同。實驗重復兩次。
　　 (1)二甲基二硫醚與丙酮的交互作用；
　　 (2)二甲基二硫醚與二甲苯的交互作用；
　　 (3)二甲基二硫醚與魚粉浸泡液的交互作用；
　　 (4)丙酮與二甲苯的交互作用；
　　 (5)丙酮與浸泡液的交互作用；
　　 (6)二甲苯與浸泡液的交互作用；
　　 (7)二甲基二硫醚與乳酸的交互作用；
　　 (8)丙酮

12、與乳酸的交互作用；
　　 (9)二甲苯與乳酸的交互作用；
　　 (10)魚粉浸泡液與乳酸的交互作用。
　　 5、利用正交表對引誘劑組成成分及濃度進行優(yōu)化,從而得到最佳搭配組合。
　　 二、容器監(jiān)測法配套指標的初步探討
　　 1、容器監(jiān)測法配套指標與傳統(tǒng)監(jiān)測指標的相關性分析；
　　 2、以傳統(tǒng)監(jiān)測指標為因變量,新型監(jiān)測指標為自變量,利用多元回歸分析,得到預警方程。同時以蚊媒總數和蚊卵總數為因

13、變量,氣候因素為自變量,利用多元回歸分析,得到預警方程。
　　 二、容器監(jiān)測法配套指標的初步探討
　　 1、容器監(jiān)測法配套指標與傳統(tǒng)監(jiān)測指標的相關性分析
　　 布雷圖指數與誘蚊指數,誘卵指數,誘蚊誘卵指數等均有相關性。其中,布雷圖指數與誘蚊指數(r=0.758,P=0.007),布雷圖指數與誘卵指數(r=0.667,P=0.025),布雷圖指數與誘蚊誘卵指數(r=0.758,P=0.007)。
　　 2、

14、利用多元回歸分析,得到預警方程。
　　 ① Y=-702.837+47.035a
　　 Y:蚊卵總數,a:溫度
　　 對方程進行檢驗,方程成立(F=22.213,P=0.001)。方程復相關系數R2=0.712,方程擬合效果好。
　　 ② Y=-18.358+1.297a
　　 Y:白紋伊蚊總數,a:溫度
　　 對方程進行檢驗,方程成立(F=59.075,P=0.000)。方程復相關系數R

15、2=0.868。方程擬合效果好。
　　 ③ Y=1.045+0.677a-0.590b
　　 Y:布雷圖指數,a:誘蚊指數,b:誘卵指數
　　 對方程進行檢驗,(F=13.580,P=0.003),方程復相關系數R2=0.772。方程擬合較好。
　　 研究結論
　　 1、利用正交設計對白紋伊蚊引誘劑進行優(yōu)化,得到了較為成熟的引誘劑配方。
　　 2、利用戶外常規(guī)監(jiān)測的數據,對容器常規(guī)監(jiān)測方法