靶向微泡、尿激酶溶栓后預(yù)防微循環(huán)再栓塞的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：利用親和素-生物素法（BAS）制備攜RGDS、尿激酶的靶向超聲造影劑，并對(duì)其理化特性及對(duì)血栓的靶向親和力進(jìn)行研究。研究低頻診斷超聲聯(lián)合攜尿激酶的靶向微泡造影劑對(duì)兔股動(dòng)脈血栓的溶解效應(yīng)，探討影響體內(nèi)溶栓效果的主要因素，確定最優(yōu)溶栓參數(shù)組合及預(yù)防微循環(huán)再栓塞現(xiàn)象。
　　方法：將制備產(chǎn)物靶向超聲造影劑通過(guò)流式細(xì)胞儀，進(jìn)行攜帶率和穩(wěn)定性檢測(cè)。制作新西蘭大白兔單側(cè)股動(dòng)脈血栓模型，將造影劑靜脈注入兔體內(nèi)，聯(lián)合超聲照射對(duì)血栓進(jìn)行溶栓治療。

2、實(shí)驗(yàn)采用析因設(shè)計(jì)表對(duì)超聲頻率(因素 A：1.6MHz、2.2MHz、2.8MHz)、尿激酶劑量(因素 B：1.5mg/Kg、3mg/Kg)、超聲照射時(shí)間(因素C：30 min、60 min)的3因素不同水平實(shí)驗(yàn)組合，分12組，每組6只，共72只試驗(yàn)動(dòng)物隨機(jī)入組進(jìn)行溶栓實(shí)驗(yàn)。評(píng)價(jià)溶栓效果為股動(dòng)脈血栓部位遠(yuǎn)心端在溶栓前后多普勒血流儀檢測(cè)的血流量變化（溶栓率）。溶栓治療120分鐘，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后取出血栓部位血管及下肢腓腸肌標(biāo)本，進(jìn)行HE染色，光鏡

3、下及電鏡下觀察溶栓后血栓結(jié)構(gòu)的病理變化、判別有無(wú)末梢組織微循環(huán)再栓塞。檢測(cè)兔血6-酮-前列腺素Fla(6-Keto-PGF1a)、血栓素B2(TXB2)、6-keto-PGF1a/TXB2（P/T比值）、P-選擇素（SP）血清學(xué)指標(biāo)。
　　結(jié)果：流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示Targestar SA微泡成功攜帶了RGDS及尿激酶，攜帶率均達(dá)到98％以上，其穩(wěn)定性不受洗滌與否的影響。所有動(dòng)物溶栓再通率為68.11%，血栓的溶解平均時(shí)間為50mi

4、n。超聲頻率的高低、尿激酶的劑量高低這2個(gè)因素對(duì)溶栓效果有影響(P均＜0.05)。最優(yōu)溶栓參數(shù)為超聲頻率為2.2MHz、尿激酶為1.5mg/Kg，而超聲照射時(shí)間（應(yīng)用30 min或60 min)對(duì)溶栓效果無(wú)顯著影響。最優(yōu)溶栓組為 A2B1C1組和 A3B1C1組，其溶栓后血管再通率（93%、88.1%），提示血管完全溶通。光鏡下見(jiàn)兔股動(dòng)脈血栓溶栓后，血栓纖維網(wǎng)架被破壞，證實(shí)血栓完全溶解或部分溶解。A2B1C1組溶栓后血管完全溶通、未見(jiàn)微

5、栓塞，其余各組均有未溶通情況發(fā)生，有11只兔出現(xiàn)再栓塞。兔血清6-Keto-PGF1a含量在溶栓后無(wú)微栓塞組比發(fā)生再栓塞組有明顯升高。
　　結(jié)論：Targestar SA微泡通過(guò)BAS法與RGDS、尿激酶結(jié)合，攜帶率高。將局部低頻診斷超聲照射+靶向微泡+尿激酶的三者聯(lián)合應(yīng)用，對(duì)股動(dòng)脈血栓溶栓治療有效。其中超聲照射頻率為2.2MHz、尿激酶劑量為1.5mg/Kg可獲得最好的溶栓效果，實(shí)現(xiàn)了血管的完全溶通，并且未見(jiàn)微循環(huán)再栓塞；而應(yīng)用