臺(tái)灣海峽專性海洋放線菌篩選、鑒定和次級(jí)代謝產(chǎn)物研究.pdf

1、天然產(chǎn)物是藥物的重要來(lái)源。海洋具有高壓、低溫、高鹽度等極端環(huán)境，生活在其中的海洋放線菌已發(fā)展出獨(dú)特的代謝方式，這不僅確保其在極端環(huán)境中生存，也提供了產(chǎn)生新穎次級(jí)代謝產(chǎn)物的潛力?，F(xiàn)已從專性海洋放線菌中分到了很多結(jié)構(gòu)新穎、生物活性廣泛的新化合物，為新藥物的發(fā)現(xiàn)提供了寶貴的先導(dǎo)化合物資源。
　　 本論文從采集自臺(tái)灣海峽的海洋沉積物中分離、篩選專性海洋放線菌以及具有生物活性的海洋放線菌，并對(duì)專性海洋放線菌的次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行初步研究，旨在

2、發(fā)掘海洋放線菌資源及先導(dǎo)藥物，為創(chuàng)制新型微生物藥物奠定基礎(chǔ)。
　　 采用選擇性分離方法，從9份海洋沉積物中分離到243株海洋放線菌，其中小單孢菌樣215株，占88.5％。對(duì)450株海洋放線菌進(jìn)行海水依賴性測(cè)定，考察鹽分對(duì)海洋放線菌的生長(zhǎng)及活性的影響，發(fā)現(xiàn)菌株23、46、174、196、S02和X08等6株菌為嚴(yán)格海水依賴性菌株；采用瓊脂塊法，對(duì)這些菌株的抗菌活性進(jìn)行初篩，結(jié)果顯示，79.9%的菌株對(duì)一種或多種指示菌有抑制作用。<

3、br>　　 根據(jù)初篩結(jié)果，進(jìn)一步對(duì)100株菌株進(jìn)行兩種不同液體培養(yǎng)基發(fā)酵，并對(duì)發(fā)酵液粗提物的抗菌、抗腫瘤活性進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，對(duì)8種指示菌中的一種或者多種具有抗菌活性的菌株占90%，對(duì)HeLa和/或HepG2細(xì)胞有顯著抑制作用的菌株占36%。
　　 根據(jù)抗菌、抗腫瘤活性測(cè)定結(jié)果，挑選74株菌進(jìn)行16S rDNA序列分析，發(fā)現(xiàn)這些菌株分布于Micromonospora、Verrucosispora、Solwaraspora、

4、Salinispora和Streptomyces等5個(gè)屬中，其中小單孢菌屬(Micromonospora)的菌株數(shù)量最多，占供測(cè)菌株59%，專性海洋放線菌有6株，都?xì)w屬于Salinispora。
　　 考察不同鹽梯度對(duì)4株專性海洋放線菌生長(zhǎng)狀況及生物活性影響，發(fā)現(xiàn)4株菌在含100%海鹽濃度及天然海水的培養(yǎng)基上均長(zhǎng)勢(shì)最好，生物活性測(cè)定結(jié)果顯示，海鹽濃度對(duì)供測(cè)菌株的抗菌、抗腫瘤活性也具有顯著的影響。
　　 選取兩株專性海洋放

5、線菌46和196菌株進(jìn)行次級(jí)代謝產(chǎn)物研究，從菌株46發(fā)酵產(chǎn)物中分離純化并鑒定了4個(gè)化合物，其中3個(gè)為已知化合物（ljx-3、ljx-6和ljx-9)，1個(gè)新化合物(ljx-11)。從菌株196的發(fā)酵產(chǎn)物中分離鑒定了4個(gè)化合物，其中有3個(gè)是新化合物（ljx-14、ljx-15和ljx-27），1個(gè)為已知化合物(ljx-36)。
　　 化合物生物活性測(cè)定結(jié)果表明，化合物ljx-3、ljx-6、ljx-14、ljx-15、ljx-36