血漿長鏈非編碼RNA作為肝細胞癌腫瘤標志物的實驗研究.pdf

1、目的:原發(fā)性肝癌作為世界范圍內(nèi)常見的惡性腫瘤，具有較高的發(fā)病率及致死率。由于缺乏理想的診斷及治療手段，肝癌患者5年生存率較低。最新研究顯示，長鏈非編碼RNA在肝癌的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及侵襲等多種生物學行為中扮演著重要角色。與癌周正常肝組織相比，長鏈非編碼RNA在肝癌組織中存在表達失調(diào)并表現(xiàn)出作為新興腫瘤標志物的潛力。然而，獲取肝癌組織的侵襲性操作不適用于臨床篩查。故本實驗擬通過對肝癌患者血漿中長鏈非編碼RNA表達水平的檢測以評價其作為肝癌

2、非侵襲性腫瘤標志物的價值。
　　研究方法:收集肝癌初治患者及對照組血液標本。根據(jù)文獻報道選擇9種在肝癌組織中表達失調(diào)的長鏈非編碼RNA(HOTAIR、MVIH、MALAT1、PVT1、UCA1、URHC、H19、HOTTIP、HEIH)，通過實時定量PCR及delta-Ct方法分別檢測其在肝癌患者及對照組血漿中的穩(wěn)定性及相對表達水平。篩選出在肝癌患者血漿中表達失調(diào)的長鏈非編碼RNA。通過繪制受試者工作曲線，評價目的基因在肝癌診斷中

3、的價值并與甲胎蛋白作比較。分析目的基因在血漿中的表達水平與肝癌患者臨床病例特點之間的關(guān)系。
　　研究結(jié)果:在9種肝癌相關(guān)的長鏈非編碼RNA中有6種可在血漿中被穩(wěn)定檢出，其余3種檢出率較低(PVT1、UCA1、URHC)。與對照組相比，肝癌患者血漿中MALAT1及HOTTIP的表達水平存在明顯失調(diào)。其中，MALAT1的表達水平明顯升高（Mean±SEM:0.5672±0.09358 vs0.02209±0.002799），而HOTT

4、IP的表達水平則顯著降低(Mean±SEM:0.001717±0.0005370 vs0.1310±0.02573)。分別繪制MALAT1、HOTTIP及甲胎蛋白的受試者工作曲線，結(jié)果顯示:MALAT1的曲線下面積為0.895(95％CI:0.834-0.956)略高于甲胎蛋白(AUC=0.84095％CI:0.749-0.930)，其敏感度及特異度分別為80.52％和86.17％;而HOTTIP的曲線下面積為0.770(95％CI:0

5、.645-0.896)，其敏感度及特異度分別為74.44％和85.14％。當MALAT1與HOTTIP聯(lián)合時，曲線下面積為0.914;兩種目的基因與甲胎蛋白聯(lián)合時，曲線下面積最大，為0.961。此外，肝癌患者血漿中MALAT1的表達水平與患者肝內(nèi)病灶單發(fā)或多發(fā)呈顯著相關(guān)，而HOTTIP則與腫瘤大小、門靜脈侵犯、乙肝及丙肝感染明顯相關(guān)。HOTAIR、MVIH、H19及HEIH在肝癌患者及對照組血漿中的表達水平無明顯差異。
　　結(jié)論: