長鏈非編碼RNA HOTAIR驅(qū)動食管癌惡性表型及作為臨床預后判斷標志的研究.pdf

1、目的:長鏈非編碼RNA HOTAIR表達于HOXC基因簇上，先前的研究表明它能夠同時結(jié)合PRC2復合體和LSD1-CoREST-REST復合體從而參與染色質(zhì)結(jié)構(gòu)的調(diào)控，并能調(diào)控促進腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因表達。臨床研究表明，在多種腫瘤的發(fā)生發(fā)展中，HOTAIR的過表達可以作為一個預示腫瘤進展和病人預后的有力的標志;然而，HOTAIR在食管癌中的表達與病人預后及其調(diào)控的分子機制仍不清楚，所以本研究旨在研究HOTAIR在食管癌中的功能和意義。

2、
　　方法:我們使用實時定量PCR的方法在100例食管癌標本，56例非配對的正常食管組織標本及食管癌腫瘤細胞系中檢測HOTAIR的表達水平;在本研究中進行以下實驗，包括細胞克隆形成實驗、非依賴錨著克隆生長實驗、CCK-8實驗、Transwell細胞侵襲實驗、AnnexinⅤ細胞凋亡等實驗來研究過表達和抑制HOTAIR對食管癌細胞的生物學行為的影響;應用裸鼠來研究HOTAIR的表達水平對食管癌細胞的體內(nèi)成瘤的影響;應用基因表達譜芯片

3、和人類甲基化芯片來研究HOTAIR在食管癌細胞中參與基因表達調(diào)控及相應的甲基化改變情況。
　　結(jié)果:與正常食管組織相比，HOTAIR的表達水平在食管癌組織和食管癌細胞系中呈現(xiàn)高表達且HOTAIR的表達水平與病人的疾病分期和生存時間具有相關(guān)性;在KYSE510和KYSE180細胞中，用小干擾RNA抑制HOTAIR的表達能夠顯著抑制細胞的增殖、侵襲轉(zhuǎn)移、細胞周期進程并能增加細胞對凋亡的敏感性;在裸鼠中，抑制HOTAIR同樣可以抑制腫瘤

4、的生長和轉(zhuǎn)移。基因芯片研究表明HOTAIR在食管癌細胞中參與調(diào)控一系列基因的表達，基因功能分析表明這些基因在腫瘤發(fā)生發(fā)展中具有重要的作用，包括涉及細胞侵襲、細胞周期調(diào)控。比較基因表達譜和基因的甲基化譜顯示在食管癌中HOTAIR調(diào)控的基因表達中，只有一小部分是由于HOTAIR改變了基因的甲基化狀態(tài)所導致的。
　　結(jié)論:HOTAIR的表達在食管癌中顯著上調(diào)，且HOTAIR促進食管癌細胞的增殖、侵襲轉(zhuǎn)移。HOTAIR參與一系列調(diào)控腫瘤發(fā)