2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、免疫測(cè)定技術(shù)已廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品檢測(cè)等領(lǐng)域,尤其是標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)近年來(lái)更是得到突飛猛進(jìn)的發(fā)展。從標(biāo)記物種類可將標(biāo)記免疫測(cè)定技術(shù)分放射性和非放射性兩種,針對(duì)全球綠色、安全、無(wú)污染的環(huán)保要求,非放射性免疫測(cè)定技術(shù)得到了更為迅速的發(fā)展。而在眾多的非放射性標(biāo)記免疫分析中,又以熒光標(biāo)記最為靈敏。本研究中所利用的藻膽蛋白,因其優(yōu)良的物理及光學(xué)特性而成為免疫測(cè)定技術(shù)中良好的熒光標(biāo)記物。
   本研究中,在實(shí)驗(yàn)室已成功構(gòu)建的質(zhì)

2、粒pET-cpcB基礎(chǔ)上,構(gòu)建了鏈霉親和素和脫輔基蛋白的融合表達(dá)質(zhì)粒pET-cpcB-sa,并將融合基因pET-cpcB-sa分別與藻藍(lán)色素、藻紅色素催化酶及藻膽蛋白裂和酶CpeS在大腸桿菌體內(nèi)共表達(dá),得到融合蛋白PCB-CpcB-SA、PEB-CpcB-SA,但以此方式得到的融合蛋白PCB-CpcB-SA、PEB-CpcB-SA中色素含量不高;在通過(guò)優(yōu)化體內(nèi)重組表達(dá)條件依然無(wú)法提高融合蛋白中色素含量的情況下,通過(guò)體外重組的方式,得到了

3、熒光活性和色素含量都較高的PEB-CpcB-SA,而體外重組得到的PCB-CpcB-SA與體內(nèi)重組的差別不大。利用PEB-CpcB-SA來(lái)檢測(cè)包被于聚苯乙烯微量反應(yīng)板的All5292蛋白,證實(shí)該融合蛋白確可用于免疫檢測(cè)。同時(shí),利用戊二醛交聯(lián)的方式得到了PEB-CpcB-SA、CPC-CpcB-SA,通過(guò)微孔板熒光免疫反應(yīng)檢測(cè),證實(shí)此種方式得到的融合蛋白亦可用于免疫檢測(cè)。
   鏈霉親和素標(biāo)記藻膽蛋白制成的熒光探針,融合了鏈霉親和

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