抑制骨細(xì)胞TGF-β-Smads信號(hào)對(duì)小鼠膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：
　　探討骨細(xì)胞TGF-β通路在OA的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用，以及與軟骨下骨骨吸收和骨形成偶聯(lián)轉(zhuǎn)化率的關(guān)系。
　　方法：
　　利用cre／loxp系統(tǒng)條件性的下調(diào)小鼠骨細(xì)胞TGF-β信號(hào)以及在小鼠10周齡時(shí)給予右側(cè)膝關(guān)節(jié)失穩(wěn)定手術(shù)制造小鼠OA模型，左側(cè)僅行切皮假手術(shù)。術(shù)后8周、16周番紅O固綠染色檢測(cè)膝關(guān)節(jié)軟骨受損情況；骨密度和μCT檢測(cè)小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨下骨骨量及微結(jié)構(gòu)情況；ALP和TRAP染色分別檢測(cè)軟骨下骨骨形成

2、和骨吸收情況。Real-time PCR和western檢測(cè)成骨與破骨分化特異性標(biāo)志物的表達(dá)。體外實(shí)驗(yàn)骨細(xì)胞與BMSCs共培養(yǎng)，通過(guò)ALP、alizarin red及TRAP染色檢測(cè)了下調(diào)骨細(xì)胞TGF-β信號(hào)對(duì)BMSCs成骨及破骨分化的作用。
　　結(jié)果：
　　對(duì)小鼠膝關(guān)節(jié)組織切片番紅O固綠染色結(jié)果進(jìn)行OARSI評(píng)分發(fā)現(xiàn)下調(diào)小鼠骨細(xì)胞TGF-β信號(hào)組OA的程度較野生型小鼠造模組明顯降低。膝關(guān)節(jié)軟骨下骨骨密度測(cè)定各組間無(wú)差異，但

3、是μCT檢測(cè)發(fā)現(xiàn)野生型小鼠 OA造模后軟骨下骨體積、骨體積比以及骨小梁厚度明顯增加，骨小梁數(shù)量和骨小梁間隙降低；而下調(diào)骨細(xì)胞TGF-β信號(hào)后骨體積、骨體積比以及骨小梁厚度的增加以及骨小梁數(shù)量和骨小梁間隙的降低都均受到抑制。野生型小鼠OA造模后軟骨下骨ALP及TRAP染色陽(yáng)性均增加，而下調(diào)骨細(xì)胞TGF-β信號(hào)后其染色陽(yáng)性明顯受到抑制。骨組織中成骨分化特異性標(biāo)志物 Runx2、osterix、ALP、osteocalcin及osteopon