耐輻射球菌DNA損傷響應基因ddrI的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、耐輻射球菌(Deinococcus radiodurans)是世界上最耐輻射的物種之一，對各種DNA損傷介質具有超強的抗性，已成為研究基因組完整性和穩(wěn)定性的一種理想模式生物。本實驗室的研究結果顯示，一個被注釋為CRP/FNR家族的基因ddrⅠ(基因編號為dr0997)，在DNA受損時被顯著誘導表達，可能貢獻于耐輻射球菌的極端抗性。因此，我們重點圍繞該基因進行了研究。
　　 1.分別構建了dr0997及其同源基因dr1646的基因

2、缺失突變株，并發(fā)現(xiàn)突變株相對于野生株，生長情況出現(xiàn)了明顯的延滯。
　　 2.分析了△DR0997突變株對DNA損傷因子的抗性。結果表明：dr0997和dr1646對UV和氧化損傷抗性的貢獻都不大。而△DR0997突變株對γ-射線輻照處理很敏感，表明該基因可能與電離輻射造成的雙鏈斷裂修復有關。
　　 3.用DNA微陣列技術分析了突變株相對于野生株的轉錄譜變化。本研究覆蓋了3033個基因，占整個基因組的95.26％。DR09

3、97的缺失導致28個基因的轉錄水平明顯上調，另外79個基因明顯下調，這些基因很多涉及NADPH、乙酰輔酶A合成酶等的轉錄合成，表明dr0997可能參與調控了相關途徑。
　　 4.表達并純化了DR0997重組蛋白。通過測序，我們證實對該基因在Genebank的ORF是錯誤的，其實際長度為612 bp，我們以新序列為標準克隆了dr0997基因，并最終成功在體外表達并純化了DR0997重組蛋白。
　　 綜上所述，耐輻射球菌的D

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