TLR-9相關因子在急性肺挫傷中的表達及意義.pdf

1、目的：Toll受體9（Toll-like receptors-9，TLR-9）在胸部創(chuàng)傷所致大鼠急性肺挫傷中表達的意義。
　　方法:選取2016年4月～5月購自貴州醫(yī)科大學動物實驗中心的40只健康、雄性SD（Sprague-Dawley，SD）大鼠作為研究對象。利用小型生物撞擊機（由第三軍醫(yī)大學予以提供），在500kpa下對大鼠胸部進行撞擊，形成重度肺挫傷。參照 AIS-90標準，對受傷后大鼠進行評分，大鼠受傷后會出現(xiàn)頻繁、深沉的

2、呼吸，較之前更明顯，呼吸急促、口唇發(fā)鉗、蘇醒延遲、精神萎靡、食欲減退、活動減少。上述提示：代謝性呼吸增快在大鼠身上已經出現(xiàn)，目的在于適應氧供。因此，采用500kpa撞擊較好的模擬了大鼠急性肺挫傷。隨機分為5組，每組8只：正常對照組；胸部創(chuàng)傷致急性肺挫傷模擬組（500kpa）撞擊后5，24，48，72小時，于股動脈放血處死。取大鼠血清及肺組織。HE染色觀察大鼠肺組織病理學改變、肺組織濕／干質量比、采用免疫組織化學法、Elisa法檢測血清及

3、肺泡灌洗液中 TLR-9受體的蛋白表達水平、予RT-PCR（Reverse transcription-PCR，RT-PCR）法檢測肺組織 TLR-9、IL-6（Interleukin-6，IL-6)的mRNA表達水平；Western blot法檢測肺組織TLR-9的蛋白水平。
　　結果：肺組織病理學檢查顯示：與空白對照組比較，胸部創(chuàng)傷組大鼠肺水腫、肺組織充血、中性粒細胞浸潤、炎性滲出較明顯。免疫組織化學法回示：胸部創(chuàng)傷組大鼠光鏡

4、下顯色呈明顯棕黃色，空白對照組大鼠光鏡下未見黃色，其中以胸部創(chuàng)傷48小時組大鼠染色最為明顯。胸部創(chuàng)傷組大鼠肺組織濕/干質量比：胸部創(chuàng)傷組大鼠與空白對照組大鼠相比，胸部創(chuàng)傷組大鼠肺組織濕/干質量比明顯低于空白對照組。ELISA：血清及肺泡灌洗液中TLR-9、IL-6表達水平，胸部創(chuàng)傷組高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。RT-PCR回示：胸部創(chuàng)傷組肺組織中TLR-9 mRNA、IL-6 mRNA的表達較空白對照組升高，差異有統(tǒng)計