血清白蛋白的功能化修飾及其對β-淀粉樣蛋白聚集的抑制作用.pdf

1、阿爾茨海默癥（AD）是臨床中常見的神經(jīng)退行性疾病，其患者會出現(xiàn)記憶力減退等癥狀。研究表明，β-淀粉樣蛋白（Aβ）的聚集是AD的主要致病機(jī)理。此外，金屬離子可以促進(jìn)Aβ聚集，形成細(xì)胞毒性更大的聚集體。因此，開發(fā)既可以結(jié)合金屬離子，又可以抑制Aβ聚集的多功能抑制劑成為了目前的研究熱點(diǎn)。
　　本論文首先研究了酸化血清白蛋白對Aβ聚集的抑制作用。前人研究表明，血清白蛋白（BSA/HSA）既可結(jié)合金屬離子，又可抑制Aβ聚集，然而其作用效果較

2、低，不足以構(gòu)成有效的抑制劑。本論文在BSA/HSA表面修飾二甘醇酐，提高其表面負(fù)電荷量，得到酸化血清白蛋白（A-BSA/A-HSA）。分析表明 A-BSA可有效抑制Aβ42聚集，并降低細(xì)胞毒性。此外，A-HSA還可以減弱Zn2+對Aβ42聚集的影響，從而抑制Zn2+誘導(dǎo)下的Aβ42聚集過程。機(jī)理分析發(fā)現(xiàn)，Aβ42與A-BSA/A-HSA間存在疏水結(jié)合和靜電排斥兩種相反作用力。當(dāng)這兩種作用力趨于平衡時(shí)，Aβ42在 A-BSA/A-HSA表

3、面保持為伸展?fàn)顟B(tài)，這有利于抑制其聚集形成毒性聚集體。同時(shí)，A-HSA表面更多的負(fù)電荷不僅可以增加對 Zn2+的親和力，還有利于降低Aβ42與Zn2+間的結(jié)合作用。
　　其次，本論文研究了A-HSA對弱酸性條件下Cu2+介導(dǎo)的Aβ42聚集和毒性的抑制作用。AD患者腦內(nèi)常出現(xiàn)酸中毒癥狀，而在弱酸性條件下，Cu2+-Aβ42更容易形成毒性聚集體。因此，本研究在 pH6.6條件下，探究了 A-HSA對Cu2+-Aβ42聚集的影響。結(jié)果表明

4、，A-HSA改變了Cu2+-Aβ42的聚集路徑，形成細(xì)胞毒性較低的不定型聚集體。此外， A-HSA在偏酸性條件下，可以改變Cu2+-Aβ42的結(jié)合方式，從而降低Cu2+-Aβ42的聚集速率，有效抑制聚集。
　　最后，本論文設(shè)計(jì)了金屬螯合劑修飾的HSA。由于腦脊液中存在的金屬離子濃度較高，而現(xiàn)有抑制劑結(jié)合金屬離子的能力有限，本研究在HSA表面修飾強(qiáng)金屬螯合劑亞氨基二乙酸（IDA），得到 IDA-HSA（I-HSA）。研究表明，I-H