TDCIPP對(duì)大鼠甲狀腺干擾和神經(jīng)毒性效應(yīng)及其機(jī)制研究.pdf

1、研究目的：
　　磷酸三（1,3-二氯-2-丙基）酯（TDCIPP）目前作為一種新型環(huán)境有機(jī)污染物得到廣泛關(guān)注。環(huán)境監(jiān)測(cè)研究發(fā)現(xiàn)，在家中、辦公室和汽車(chē)的灰塵等環(huán)境介質(zhì)中，以及尿液、乳液、精液等體液中均檢測(cè)到TDCIPP及其代謝物的存在。許多研究已表明TDCIPP能夠干擾魚(yú)和雞類(lèi)物種甲狀腺激素穩(wěn)態(tài)，是一種潛在內(nèi)分泌干擾物，同時(shí)又具有神經(jīng)毒性，但很少有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道TDCIPP對(duì)哺乳動(dòng)物的毒性效應(yīng)。本研究著重探討TDCIPP是否對(duì)哺乳動(dòng)物

2、大鼠也具有甲狀腺內(nèi)分泌干擾與神經(jīng)毒性作用，并嘗試闡釋其可能的分子機(jī)制。
　　研究方法：
　　1. TDCIPP對(duì)大鼠甲狀腺內(nèi)分泌干擾作用研究：青春期雌性SD大鼠分別以每天0，50，100，250 mg/kg/d劑量的TDCIPP從出生后21天(PND21)到PND42連續(xù)經(jīng)口灌胃染毒21天，每天觀察臨床癥狀并記錄體重。收集血清并檢測(cè)血清TSH、T3， T4和FT4激素水平變化；組織切片（HE染色）用于檢測(cè)甲狀腺形態(tài)學(xué)病變。另

3、外，利用RT-PCR和Western blot技術(shù)分析甲狀腺和肝臟組織中涉及甲狀腺功能的相關(guān)基因和蛋白表達(dá)，進(jìn)一步探究TDCIPP對(duì)SD大鼠甲狀腺系統(tǒng)相關(guān)分子水平的影響和作用機(jī)制。
　　2. TDCIPP對(duì)大鼠神經(jīng)毒性作用研究：4周齡雌性SD大鼠分別以0，50，100，250 mg/kg/d劑量TDCIPP連續(xù)經(jīng)口灌胃染毒60天，每天觀察臨床癥狀并記錄體重。Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)用于評(píng)估大鼠學(xué)習(xí)與記憶能力；HE染色用于檢查大鼠腦組

4、織病理?yè)p傷；為了進(jìn)一步探討TDCIPP與神經(jīng)毒性之間的內(nèi)在聯(lián)系，我們利用基于1H-NMR的代謝組學(xué)技術(shù)分析了大鼠腦組織特異神經(jīng)化學(xué)物質(zhì)水平變化。
　　研究結(jié)果：
　　1. TDCIPP對(duì)大鼠甲狀腺內(nèi)分泌干擾作用研究：
　　1.1 TDCIPP暴露能夠引起青春期雌性SD大鼠甲狀腺、肝、腎組織絕對(duì)重量、甲狀腺組織相對(duì)重量增加。
　　1.2 TDCIPP染毒可以引起大鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞增生病理變化。
　　1.3

5、 TDCIPP誘導(dǎo)大鼠血清T3水平升高，而不影響T4和FT4變化水平。
　　1.4 TDCIPP暴露可誘導(dǎo)大鼠肝臟組織中CYP3A1和UGT1A6 mRNA與蛋白水平呈劑量依賴(lài)性上調(diào)表達(dá)，上調(diào)了肝臟1型脫碘酶（DIO1）mRNA的表達(dá)，而下調(diào)了TRβmRNA與蛋白的表達(dá)水平。
　　1.5 TDCIPP上調(diào)了甲狀腺組織中NIS、Tg和TPO mRNA表達(dá)。
　　1.6血清 TSH水平和甲狀腺組織中 TSHr mRNA表達(dá)

6、僅在低劑量（50mg/kd/d）TDCIPP組出現(xiàn)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義下降，但在兩個(gè)高劑量組卻出現(xiàn)恢復(fù)到對(duì)照組水平的趨勢(shì)。
　　2. TDCIPP對(duì)大鼠神經(jīng)毒性作用研究：
　　2.1 TDCIPP染毒60天不影響大鼠體重獲得。
　　2.2 TDCIPP處理可以導(dǎo)致大鼠的學(xué)習(xí)與記憶能力顯著下降。
　　2.3 TDCIPP染毒可致大鼠海馬組織 CA1區(qū)椎體神經(jīng)元變性、壞死、甚至缺失；高劑量TDCIPP染毒組大鼠腦組織還可見(jiàn)炎

7、癥細(xì)胞侵入、鈣化/骨化灶病理改變。
　　2.4 TDCIPP處理可使大鼠腦組織內(nèi)乳酸、GABA、甘氨酸、脂肪酸、膽固醇等代謝物水平下降，而NAA、谷氨酸、膽堿、?；撬?、肌醇、肌酸等代謝物水平升高。
　　2.5大鼠腦組織內(nèi)與 TDCIPP染毒相關(guān)的神經(jīng)化合物主要參與體內(nèi)氨基酸與神經(jīng)遞質(zhì)代謝、能量代謝、細(xì)胞膜組成、抗氧化等重要的生理生化過(guò)程。
　　結(jié)論：
　　1. TDCIPP對(duì)大鼠甲狀腺內(nèi)分泌干擾作用研究：TDCI

8、PP暴露能夠干擾青春期雌性SD大鼠體內(nèi)肝臟解毒、甲狀腺激素合成、脫碘轉(zhuǎn)化、代謝、清除等生理功能，引起甲狀腺功能失調(diào)，造成機(jī)體甲狀腺激素平衡紊亂，誘發(fā)甲狀腺濾泡增生作為一種代償機(jī)制來(lái)維持機(jī)體甲狀腺激素穩(wěn)態(tài)，保證機(jī)體正常生理功能。不同劑量TDCIPP暴露對(duì)哺乳動(dòng)物甲狀腺毒性作用可能涉及不同的分子機(jī)制。
　　2. TDCIPP對(duì)大鼠神經(jīng)毒性作用研究：實(shí)驗(yàn)劑量的TDCIPP暴露對(duì)雌性SD大鼠有一定的神經(jīng)毒性。TDCIPP暴露引起大鼠腦組織