球形孢子絲菌雙相部分差異表達(dá)基因的RT-PCR驗(yàn)證.pdf

1、孢子絲菌是溫度依賴型的雙相真菌，其可引起急性或慢性以皮膚、淋巴感染組織病變?yōu)橹鞯逆咦咏z菌病（sporotrichosis）。申克孢子絲菌（Sporothrix schenckii）一直被認(rèn)為孢子絲菌病的唯一菌種，但近期系統(tǒng)發(fā)育學(xué)研究表明：廣義的申克孢子絲菌為一個(gè)復(fù)合體，至少由申克孢子絲菌(S. schenckii）、球形孢子絲菌（S. globosa）、巴西孢子絲菌（S. brasiliensis）、墨西哥孢子絲菌（S. mexican

2、a）、白孢子絲菌（S. pallida）及申克孢子絲菌盧艾里變種（S. schenckii var. luriei）6個(gè)菌種組成。而我國(guó)報(bào)道的孢子絲菌病被證實(shí)由球形孢子絲菌感染引起。研究表明申克孢子絲菌復(fù)合類群的致病性與其雙相性轉(zhuǎn)換緊密相關(guān)。不同菌種的分布地域不同，其毒力、致病性不同導(dǎo)致孢子絲菌病臨床類型也不相同。孢子絲菌雙相轉(zhuǎn)換機(jī)制復(fù)雜且申克孢子絲菌復(fù)合類群的分類地位得到澄清以后，前人研究中運(yùn)用的菌株分類地位并不清楚，這些形態(tài)相似但各

3、自具有獨(dú)立遺傳背景和不同地域分布的物種，其參與的雙相轉(zhuǎn)化的基因可能也不相同。在本課題組前期實(shí)驗(yàn)通過(guò)抑制性消減雜交技術(shù)（suppression subtractive hybridization,SSH）成功構(gòu)建中國(guó)球形孢子絲菌的雙相 cDNA消減文庫(kù)，并對(duì)其差異表達(dá)基因進(jìn)行生物信息學(xué)分析，獲得部分有意義的差異表達(dá)基因的基礎(chǔ)上。為進(jìn)一步研究我國(guó)球形孢子絲菌的雙向轉(zhuǎn)換機(jī)制，重點(diǎn)選出兩個(gè)高表達(dá)的差異基因進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量 PCR(RT-PCR)