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文檔簡介
1、目的:
觀察促紅細胞生成素(EPO)對慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能的保護作用及其作用機制,為臨床治療提供理論依據。
方法:
將30只成年雄性SD大鼠采用隨機數字法分為2組,模型(Model)組(n=24)和假手術(Sham)組(n=6);模型組采用腹主動脈縮窄術建立CHF模型,Sham組手術過程同Model組,但未予以腹主動脈縮窄處理。術后8周末Sham組存活6只,Model組存活16只,行心臟彩超檢查
2、后再將再Model組隨機分為EPO組與對照(Control)組各8只。EPO組予以3000 U/kg EPO腹腔注射,3次/周,連續(xù)4周;Sham組、Control組腹腔注射等量的生理鹽水。分別在術后4周、8周、12周(即給藥4周)對全部大鼠行心臟彩超檢查,測量心率(HR)、收縮末期左心室后壁厚度(LVPWs)、舒張末期左心室后壁厚度(LVPWd)、左心室收縮末期內徑( LVDs)、左心室舒張末期內徑( LVDd)、左室射血分數(LVE
3、F)、收縮末期室間隔厚度(IVSs)、舒張末期室間隔厚度(IVSd)、收縮末容量(ESV)、舒張末容積(EDV)、心輸出量(CO)等指標。第12周末全部大鼠禁食24 h后處死,用光學顯微鏡觀察心肌組織細胞形態(tài)結構;采用TUNEL染色檢測心肌細胞凋亡并計算凋亡指數(AI);采用酶聯(lián)免疫(ELISA)方法檢測各組大鼠心肌組織炎癥介質IL-1、TNF-α的含量;運用Western blot法檢測心肌組織AKT/P-AKT及ERK/P-ERK蛋
4、白表達變化。
結果:
1.超聲心動圖結果:Model組建模4周后出現(xiàn)心室肥厚,8周后出現(xiàn)心力衰竭;予以EPO干預4周后較Control組LVEF明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05), IVSs、LVPWs、IVSd、LVPWd明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
2. HE染色結果:Sham組大鼠心肌細胞排列整齊、緊密,Control組細胞排列紊亂,有炎性細胞浸潤、聚集。EPO組心肌間質水腫及
5、炎性細胞浸潤、聚集均較Control組減輕。
3. TUNEL染色細胞凋亡結果:Control組可見大量染成棕色的凋亡細胞核。EPO組凋亡細胞核數目Control組明顯減少。Control組AI較Sham組顯著增加,EPO組AI較Control組顯著降低(P<0.01),差異有統(tǒng)計學意義。
4. Western blot檢測結果:EPO組心肌組織p-AKT/AKT及p-ERK/ERK OD值較Control組明顯升高
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