中華鱉卵子發(fā)生與卵黃形成的細胞學(xué)研究.pdf

1、動物卵子的發(fā)生是發(fā)育生物學(xué)中重要的問題之一，而卵黃的形成是卵子發(fā)生中能量的吸收和儲備過程。因此，動物卵細胞和卵黃發(fā)生的超微結(jié)構(gòu)研究受到許多學(xué)者的重視。中華鱉(Pelodiseus Sinensis)屬于爬行綱龜鱉目，是我國爬行動物的代表動物之一，其進化地位比較特殊。迄今有關(guān)中華鱉的生態(tài)調(diào)查，人工育苗方面的研究已有過相關(guān)報道，但作為個體發(fā)育重要環(huán)節(jié)之一的卵子發(fā)生及卵黃發(fā)生途徑等方面卻少有報道。為彌補這方面資料的不足，本文的研究目的在于了解

2、中華鱉卵巢的顯微和超微結(jié)構(gòu)變化，試圖為中華鱉卵子發(fā)生等方面的研究提供新的實驗依據(jù)，以及確定中華鱉在爬行動物乃至脊椎動物中的進化地位。
　　 試驗Ⅰ中華鱉卵巢結(jié)構(gòu)及卵子發(fā)生過程的研究應(yīng)用組織學(xué)方法觀察了中華鱉(Pelodiseus Sinensis)卵巢與卵子的動態(tài)結(jié)構(gòu)變化，以期探究卵子發(fā)生與卵黃形成的形態(tài)學(xué)特征。結(jié)果顯示，中華鱉卵巢實質(zhì)由周圍皮質(zhì)和中央髓質(zhì)構(gòu)成。皮質(zhì)中各個發(fā)育階段的卵泡、閉鎖卵泡以及黃體等相間分布。較大的卵泡以卵

3、巢柄懸掛在系膜上。卵泡由中央的卵母細胞和周圍的單層濾泡細胞組成，外周有卵泡鞘包圍。皮質(zhì)局部區(qū)域可見生殖圃分布。根據(jù)中華鱉卵黃形成特點將其卵子發(fā)生過程分為卵黃發(fā)生前期和卵黃發(fā)生期，又根據(jù)濾泡細胞以及透明帶等結(jié)構(gòu)的特點將卵子發(fā)生細分為10個連續(xù)的時期。Ⅰ到Ⅲ期的卵細胞核內(nèi)有明顯的燈刷染色體以及外周核，核一側(cè)有卵黃核存在，隨后卵黃核逐漸消失。第Ⅵ期到第X期是卵黃小板逐漸形成的階段。起初卵黃顆粒被一個小囊泡包裹，隨著卵黃的發(fā)生，小囊泡中包含越來

4、越多的卵黃小球，數(shù)量和大小都在空泡中不斷增加，逐漸融合成卵黃小板，卵黃小板的體積隨著卵子的發(fā)生也逐漸增大。中華鱉卵巢的腔隙系統(tǒng)很發(fā)達，它們連同平滑肌纖維一起包圍在各個發(fā)育階段的卵泡周圍。腔隙內(nèi)含物有三種物質(zhì)結(jié)構(gòu)：顆粒狀、纖維狀以及透明膠質(zhì)狀。實驗結(jié)果表明，中華鱉卵子發(fā)生過程與鱷類和鳥類基本相似，而與爬行類中的蜥蜴和蛇類存在一定差異，與哺乳類差別則更為明顯。這一結(jié)果為新近提出的把龜鱉類作為鱷和鳥支系的姐妹群，而不是現(xiàn)生爬行類中最基部的一支

5、這一理論提供了形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)，同時亦為動物進化研究提供一定理論依據(jù)。
　　 試驗Ⅱ中華鱉卵巢超微結(jié)構(gòu)特點及卵黃發(fā)生途徑的研究所有脊椎動物的卵巢生長期的卵母細胞及其周圍的濾泡細胞都有極其相似的功能聯(lián)系。通過對中華鱉卵巢卵泡電鏡的觀察發(fā)現(xiàn)，處于生長期較早階段的卵細胞胞質(zhì)靠近卵膜處有大量線粒體存在，并可以觀察到部分線粒體逐漸轉(zhuǎn)變成卵黃顆粒的過程。而濾泡細胞內(nèi)用于合成卵黃前體物質(zhì)的各種細胞器均少有見到。透明帶有促進卵黃物質(zhì)運輸?shù)墓δ?，它由?/p>

6、細胞和濾泡細胞向外伸出的指狀突起交錯形成，且排列整齊緊密。根據(jù)以上結(jié)果我們推斷在此階段卵黃物質(zhì)主要依靠卵母細胞自身合成，即卵黃的形成途徑以內(nèi)源性為主。到了卵母細胞生長期的較晚階段，一部分卵黃前體物質(zhì)在其他器官合成并通過濾泡細胞到達卵母細胞胞質(zhì)中，但在某些情況下卵黃前體物質(zhì)也會通過濾泡細胞間隙進入卵母細胞。濾泡細胞也會利用自身胞質(zhì)加工卵黃前體物質(zhì)并最終運輸至卵細胞內(nèi)。電鏡觀察結(jié)果還顯示，卵黃發(fā)生后期透明帶松散無規(guī)則，濾泡細胞向外凸出的微絨

7、變得稀少，卵母細胞上的微絨毛內(nèi)有卵黃前體顆粒出現(xiàn)。此外，在靠近濾泡細胞處有橫向的絲狀物質(zhì)分布。從以上實驗結(jié)果我們可以推斷中華鱉卵黃物質(zhì)的發(fā)生是內(nèi)源性和外源性途徑共同作用的結(jié)果，到了晚期階段外源性途徑的作用明顯加強以補充卵細胞自身胞質(zhì)營養(yǎng)物質(zhì)的不足，滿足卵細胞在排卵前迅速增長的需要。
　　 試驗Ⅲ中華鱉卵巢的細胞化學(xué)研究應(yīng)用雄激素受體（androgen receptor, AR）和雌激素受體（estrogen receptor,