中華鋸齒米蝦卵黃發(fā)生的超微結(jié)構(gòu)及免疫組化研究.pdf

1、目前國內(nèi)外許多學(xué)者對十足目甲殼動物的卵巢發(fā)育和卵子發(fā)生做了大量的研究，但有關(guān)中華鋸齒米蝦卵黃發(fā)生過程的研究還未見相關(guān)報道，對中華鋸齒米蝦生殖發(fā)育的調(diào)控機(jī)理仍然不是十分清楚。本文采用透射電鏡和免疫組織化學(xué)技術(shù)系統(tǒng)研究了中華鋸齒米蝦卵母細(xì)胞及其內(nèi)部各種細(xì)胞器在卵黃發(fā)生過程中的形態(tài)變化特征，以及在這一過程中濾泡細(xì)胞的結(jié)構(gòu)變化情況。這項研究，一方面為甲殼動物卵黃發(fā)生研究提供理論基礎(chǔ)，對甲殼動物生殖發(fā)育調(diào)控及育種具有重要的實際意義；另一方面對以卵

2、黃蛋白原作為環(huán)境內(nèi)分泌干擾物質(zhì)的“生物標(biāo)志物”等毒理學(xué)方面的深入研究具有細(xì)胞學(xué)理論指導(dǎo)意義；同時，還為甲殼動物的毒理學(xué)實驗確定了一種良好的實驗材料。
　　 中華鋸齒米蝦的卵巢分為前葉、后葉兩部分，前葉匯合在一起位于心臟下方、肝胰腺上方；后葉位于腸道上方并與腸道平行。在卵巢的發(fā)育過程中，可觀察到不同時相的卵母細(xì)胞。
　　 卵原細(xì)胞期：細(xì)胞圓形，體積較小，核質(zhì)比較大，細(xì)胞質(zhì)均勻，細(xì)胞之間排列相當(dāng)緊密，沒有發(fā)現(xiàn)濾泡細(xì)胞。

3、>　　 卵黃發(fā)生前期：細(xì)胞體積有所增大，但胞質(zhì)仍較均勻。該時期濾泡細(xì)胞出現(xiàn)，但數(shù)目較少，分布也很不規(guī)則，且有逐漸將卵母細(xì)胞包圍分割的趨勢。
　　 卵黃發(fā)生早期：卵黃蛋白合成全面啟動，細(xì)胞體積由于卵黃蛋白的不斷合成而增大，細(xì)胞質(zhì)中開始出現(xiàn)卵黃球。卵母細(xì)胞被濾泡細(xì)胞全部包圍，多層，但它們之間的關(guān)系很松散。
　　 卵黃發(fā)生中期：細(xì)胞體積繼續(xù)增大，形狀越來越不規(guī)則，近似于三角形。核質(zhì)比下降。卵母細(xì)胞被單層濾泡細(xì)胞層完全分割。濾

4、泡細(xì)胞漸漸緊貼卵母細(xì)胞。
　　 卵黃發(fā)生后期：卵黃物質(zhì)繼續(xù)填充卵母細(xì)胞質(zhì)，部分卵母細(xì)胞的細(xì)胞核甚至消失。濾泡細(xì)胞開始縮小退化。
　　 成熟期：卵母細(xì)胞中充滿成熟的卵黃蛋白。此時濾泡細(xì)胞呈一薄層緊貼于卵母細(xì)胞乃至完全退化。
　　 在此基礎(chǔ)上進(jìn)行電鏡觀察發(fā)現(xiàn)：中華鋸齒米蝦卵黃發(fā)生過程是雙源性的。在卵黃發(fā)生過程中，卵母細(xì)胞中的線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、溶酶體和核糖體等多種細(xì)胞器均參與了其內(nèi)源性合成。其中線粒體最早參與形成卵黃顆粒

5、。在卵黃發(fā)生的中后期，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)成為內(nèi)源性卵黃蛋白合成最主要的細(xì)胞器，并最終演化成顆粒較大且有膜包被的卵黃球；溶酶體也在此時期發(fā)揮其特有的吞噬功能，通過與線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、環(huán)狀片層結(jié)構(gòu)組成自噬泡，相互融合使卵黃球的體積逐漸增大；另外，有些溶酶體通過融合分解線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等胞質(zhì)細(xì)胞器形成髓樣結(jié)構(gòu)，最終形成一種電子密度很大的致密卵黃球。外源性卵黃則主要通過卵質(zhì)膜形成的微絨毛和微吞飲小泡從卵周隙及濾泡細(xì)胞中攝取外源物質(zhì)而形成。
　　 通過免