中華鋸齒米蝦卵黃發(fā)生的超微結(jié)構(gòu)及免疫組化研究.pdf

1、目前國內(nèi)外許多學者對十足目甲殼動物的卵巢發(fā)育和卵子發(fā)生做了大量的研究，但有關(guān)中華鋸齒米蝦卵黃發(fā)生過程的研究還未見相關(guān)報道，對中華鋸齒米蝦生殖發(fā)育的調(diào)控機理仍然不是十分清楚。本文采用透射電鏡和免疫組織化學技術(shù)系統(tǒng)研究了中華鋸齒米蝦卵母細胞及其內(nèi)部各種細胞器在卵黃發(fā)生過程中的形態(tài)變化特征，以及在這一過程中濾泡細胞的結(jié)構(gòu)變化情況。這項研究，一方面為甲殼動物卵黃發(fā)生研究提供理論基礎(chǔ)，對甲殼動物生殖發(fā)育調(diào)控及育種具有重要的實際意義；另一方面對以卵

2、黃蛋白原作為環(huán)境內(nèi)分泌干擾物質(zhì)的“生物標志物”等毒理學方面的深入研究具有細胞學理論指導意義；同時，還為甲殼動物的毒理學實驗確定了一種良好的實驗材料。
　　 中華鋸齒米蝦的卵巢分為前葉、后葉兩部分，前葉匯合在一起位于心臟下方、肝胰腺上方；后葉位于腸道上方并與腸道平行。在卵巢的發(fā)育過程中，可觀察到不同時相的卵母細胞。
　　 卵原細胞期：細胞圓形，體積較小，核質(zhì)比較大，細胞質(zhì)均勻，細胞之間排列相當緊密，沒有發(fā)現(xiàn)濾泡細胞。

3、>　　 卵黃發(fā)生前期：細胞體積有所增大，但胞質(zhì)仍較均勻。該時期濾泡細胞出現(xiàn)，但數(shù)目較少，分布也很不規(guī)則，且有逐漸將卵母細胞包圍分割的趨勢。
　　 卵黃發(fā)生早期：卵黃蛋白合成全面啟動，細胞體積由于卵黃蛋白的不斷合成而增大，細胞質(zhì)中開始出現(xiàn)卵黃球。卵母細胞被濾泡細胞全部包圍，多層，但它們之間的關(guān)系很松散。
　　 卵黃發(fā)生中期：細胞體積繼續(xù)增大，形狀越來越不規(guī)則，近似于三角形。核質(zhì)比下降。卵母細胞被單層濾泡細胞層完全分割。濾

4、泡細胞漸漸緊貼卵母細胞。
　　 卵黃發(fā)生后期：卵黃物質(zhì)繼續(xù)填充卵母細胞質(zhì)，部分卵母細胞的細胞核甚至消失。濾泡細胞開始縮小退化。
　　 成熟期：卵母細胞中充滿成熟的卵黃蛋白。此時濾泡細胞呈一薄層緊貼于卵母細胞乃至完全退化。
　　 在此基礎(chǔ)上進行電鏡觀察發(fā)現(xiàn)：中華鋸齒米蝦卵黃發(fā)生過程是雙源性的。在卵黃發(fā)生過程中，卵母細胞中的線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、溶酶體和核糖體等多種細胞器均參與了其內(nèi)源性合成。其中線粒體最早參與形成卵黃顆粒

5、。在卵黃發(fā)生的中后期，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)成為內(nèi)源性卵黃蛋白合成最主要的細胞器，并最終演化成顆粒較大且有膜包被的卵黃球；溶酶體也在此時期發(fā)揮其特有的吞噬功能，通過與線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、環(huán)狀片層結(jié)構(gòu)組成自噬泡，相互融合使卵黃球的體積逐漸增大；另外，有些溶酶體通過融合分解線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等胞質(zhì)細胞器形成髓樣結(jié)構(gòu)，最終形成一種電子密度很大的致密卵黃球。外源性卵黃則主要通過卵質(zhì)膜形成的微絨毛和微吞飲小泡從卵周隙及濾泡細胞中攝取外源物質(zhì)而形成。
　　 通過免