帕金森病執(zhí)行功能障礙與多巴胺能通路遺傳易感性的研究.pdf

1、背景：帕金森?。?Parkinson’s disease, PD）是由于黑質(zhì)致密部多巴胺（dopamine, DA）能神經(jīng)元變性導(dǎo)致的一種神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病。臨床主要表現(xiàn)為運動遲緩、靜止性震顫、肌張力增高及姿勢步態(tài)異常等。近年來，隨著研究的不斷深入，PD非運動癥狀也備受關(guān)注，包括認知功能障礙、嗅覺減退甚至喪失、情感及精神障礙、睡眠及自主神經(jīng)受累等，這些非運動癥狀嚴重影響患者的生活質(zhì)量，增加家人及社會的負擔(dān)，甚至成為患者死亡的危險因素。

2、r>　　在PD非運動癥狀中，18.9％-52%的PD患者可發(fā)生認知功能障礙，PD認知功能障礙包括了輕度認功能障礙（ Mild cognitive impairment in parkinson’s disease, PD-MCI）及癡呆（Parkinson’s disease dementia, PDD）。PD-MCI包括有執(zhí)行功能、注意力和工作記憶、語言、記憶以及視空間障礙5個認知領(lǐng)域功能障礙，其中以執(zhí)行功能障礙較為突出。有研究發(fā)現(xiàn)執(zhí)

3、行功能障礙占PD-MCI的10.1%。伴有執(zhí)行功能障礙的PD患者在日常生活中完成復(fù)雜任務(wù)能力有所下降，顯著降低了患者的生活質(zhì)量。因此，早期發(fā)現(xiàn)執(zhí)行功能障礙，早期予以積極治療，可以提高患者的生活質(zhì)量，減輕家人及社會的負擔(dān)。
　　目前，關(guān)于PD執(zhí)行功能障礙的發(fā)生機制并不十分明確。其中，Kehagia等認為PD認知功能障礙有兩條神經(jīng)遞質(zhì)傳導(dǎo)通路，而PD執(zhí)行功能與多巴胺能通路相關(guān)，同時也強調(diào)了基因多態(tài)性在多巴胺代謝通路中的重要作用。兒茶酚

4、氧位甲基轉(zhuǎn)移酶（Catechol-O-Methyltransferase，COMT）、單胺氧化酶B（monoamine oxidase B, MAO-B）、多巴胺轉(zhuǎn)運體（dopamine transporter, DAT）及芳香胺酸酶（Aromatic L-Amino Acid Decarboxylase, AADC）均是多巴胺合成代謝過程中重要的代謝酶，而編碼這四個代謝酶的基因多態(tài)性可能與PD執(zhí)行功能相關(guān)。
　　COMT基因第4

5、外顯子rs4680可發(fā)生纈氨酸（Val）與蛋氨酸（Met）的置換。有研究發(fā)現(xiàn)，Met純合子可提高前額葉（Prefrontal Cortex, PFC） DA水平，并與改善執(zhí)行功能與工作記憶相關(guān)。MAO-B基因位于X染色體，在該基因的內(nèi)含子13中存在由腺嘌呤（A）突變成鳥甘酸（G）的單堿基多態(tài)性，在一項對236例PD及369例對照的日本人群的研究中發(fā)現(xiàn)，MAO-B基因rs1799836位點的AA基因型與PD患病風(fēng)險相關(guān)。編碼DAT的基因S

6、LC6A3第9外顯子rs6347的GG純合子在早發(fā)性PD明顯減少。DDC基因rs921451在PD病人中行急性美多芭試驗前后運動功能改善有差異性。目前尚未有關(guān)于MAO-B rs1799836、SLC6A3 rs6347及DDC rs921451與PD執(zhí)行功能相關(guān)性的研究。
　　由于目前對PD執(zhí)行功能障礙與DA能通路遺傳基因的研究鮮少，本課題擬在這方面開展研究，對多巴胺能通路中的 COMT rs4680、MAO-B rs179983

7、6、SLC6A3 rs6347及DDC rs921451進行基因檢測，試圖尋找其與PD執(zhí)行功能障礙之間的相關(guān)性，以期為早期發(fā)現(xiàn)PD執(zhí)行功能障礙和早期治療提供新途徑和新靶點。
　　目的：對中國漢族PD伴執(zhí)行功能障礙患者進行多巴胺能通路基因COMT、SLC6A3、MAO-B及DDC的多態(tài)性分析，探討多巴胺能通路基因多態(tài)性與PD執(zhí)行功能障礙的相關(guān)性。
　　材料和方法：以139例PD患者和139例正常對照者為研究對象。對PD組進行認

8、知功能評估，按照韋氏智力、韋氏記憶、畫鐘測驗、語言流暢性的評估量表得分將PD組分為輕度認知障礙（ mild cognitive impairment, PD-MCI）組與認知正常（cognitive normal, PD-CN）組，PD-MCI組再進一步分為PD伴執(zhí)行功能障礙、伴或不伴其他認知領(lǐng)域障礙（executive function impairment,PD-EFI）組，及 PD不伴執(zhí)行功能障礙(executive funtio

9、n normal,PD-EFN）組。應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-連接酶檢測反應(yīng)(polymerase chain reaction-ligase detection reaction，PCR-LDR）測序分型技術(shù)對所有PD組和對照人群COMT基因rs4680位點，MAO-B基因rs1799836位點，SLC6A3基因rs6347位點及DDC基因rs921451位點進行基因型分析。比較各組基因型和等位基因的總體分布頻率。率的比較用χ2檢驗，鑒于本研

10、究中對同一數(shù)據(jù)集進行了多個獨立假設(shè)檢驗，我們采用了Bonferroni法對P值進行較正。由于本研究中進行了3個獨立假設(shè)檢驗，即檢驗標準P值需除以獨立假設(shè)檢驗次數(shù)，即P<0.05/3(3為獨立假設(shè)檢驗數(shù))才是本研究的最終檢驗標準值。
　　結(jié)果：經(jīng)檢驗， PD組和對照組每個位點基因型的分布均符合Hardy-Weinberg平衡。
　　各組間比較：
　　1. PD組與對照組間比較：
　?。?）PD組和對照組rs4680

11、位點A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3，3為獨立假設(shè)檢驗數(shù)）；兩組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs4680位點多態(tài)性可能與PD易感性不相關(guān)。
　　（2）PD組和對照組rs1799836位點A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組女性患者之間的A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)

12、意義（P>0.05/3）；兩組男性患者之間的A、G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs1799836位點多態(tài)性可能與PD易感性不相關(guān)。
　?。?） PD組和對照組rs6347位點A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/

13、3），提示rs6347位點多態(tài)性可能與PD易感性不相關(guān)。
　?。?） PD組和對照組rs921451位點C/C、C/T、T/T基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間C、T等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs921451位點多態(tài)性可能與PD易感性不相關(guān)。
　　2.將PD組進一步分為PD-MCI及PD-CN組，兩組間進行比較：
　?。?） PD-MCI組和PD-

14、CN組rs4680位點A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs4680位點多態(tài)性可能與PD-MCI易感性不相關(guān)。
　?。?） PD-MCI組和PD-CN組rs1799836位點A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組女性患者之間的A/A、A/G、G/G基因型總體分

15、布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組男性患者之間的A、G基因型總體分布頻率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs1799836位點多態(tài)性可能與PD-MCI易感性不相關(guān)。
　　（3） PD-MCI組和PD-CN組rs6347位點A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間A、G等位基因總體分布

16、的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs6347位點多態(tài)性可能與PD-MCI易感性不相關(guān)。
　?。?） PD-MCI組和PD-CN組rs921451位點C/C、C/T、T/T基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；兩組間C、T等位基因總體分布頻率的檢驗標準值P<0.05，但采用Bonferroni校正后P>0.05/3，提示C、T等位基因總體分布的頻率均無統(tǒng)計學(xué)差異，rs921451位點多態(tài)性可能

17、與PD-MCI易感性不相關(guān)。
　　3.對PD-MCI組進一步分為PD-EFI及PD-EFN組，與PD-CN組三組間進行比較：
　?。?）PD-EFI組、PD-EFN組和PD-CN組rs4680位點A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；三組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs4680位點多態(tài)性可能與PD-EFI易感性不相關(guān)。
　?。?）

18、PD-EFI組、PD-EFN組和PD-CN組rs1799836位點A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；三組女性患者之間的 A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；三組男性患者之間的A、G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；三組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs1799836位點多態(tài)性

19、可能與PD-EFI易感性不相關(guān)。
　?。?）PD-EFI組、PD-EFN組和PD-CN組rs6347位點A/A、A/G、G/G基因型總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；三組間A、G等位基因總體分布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3），提示rs6347位點多態(tài)性可能與PD-EFI易感性不相關(guān)。
　?。?）PD-EFI組、PD-EFN組和PD-CN組rs921451位點C/C、C/T、T/T基因型總體分

20、布的頻率差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05/3）；三組間C、T等位基因總體分布的頻率檢驗標準值 P<0.05，但采用Bonferroni校正后P>0.05/3，提示C、T等位基因總體分布的頻率均無統(tǒng)計學(xué)差異，提示rs921451位點多態(tài)性可能與PD-EFI易感性不相關(guān)。
　　結(jié)論：1. COMT基因rs4680位點、MAO-B基因rs1799836位點、SLC6A3基因rs6347位點及DDC基因rs921451位點多態(tài)性與中國漢族