pH敏感型雙親嵌段共聚物載藥納米膠束對腫瘤的靶向研究.pdf

1、近年來，腫瘤的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢，給患者及其家庭帶來極大的痛苦和經濟壓力。目前，通過不斷改進治療方式來治愈腫瘤已經成為腫瘤治療研究領域的共識。研究表明：腫瘤有著與正常組織不同的微環(huán)境，即腫瘤血管新生、高通透和滯留效應（EPR）和胞外pH較正常組織偏酸性等差異，使藥物特異性識別腫瘤成為可能。因此，腫瘤的治療方式正在由傳統(tǒng)的放療和化療轉向靶向治療。靶向治療是指利用靶向藥物傳遞系統(tǒng)（TDDS）將藥物特異性遞送到靶組織，使得藥物能夠在靶組

2、織濃集，從而更好發(fā)揮其生物活性以及降低毒副作用。在靶向治療中，TDDS載體的作用至關重要，它決定了藥物作用的靶控性和有效性。腫瘤靶向治療中的載體往往具有納米尺寸，被稱為納米載體。
　　金屬釕（Ru）配合物具備對正常細胞毒性低，容易被腫瘤組織吸收等特性，被認為是腫瘤治療領域中最具前景的非鉑類金屬，已有其配合物作為抗腫瘤藥物進入臨床試驗。本研究選用 pH敏感型雙親嵌段共聚物，即丁二酸酐修飾的聚2-二異丙胺基乙基甲基丙烯酸嵌段聚2-氨基

3、乙基甲基丙烯酸（PDPA-b-PAMA/SA，PbPS），作為難溶性金屬配合物3（1,10-菲啰啉）合釕（3P-Ru）的載體，制備聚合物載藥納米膠束（PbPS-PM-Ru），并探究此納米膠束對腫瘤酸性環(huán)境的靶向作用，以及配合物在體內外對腫瘤細胞生長的抑制作用，為腫瘤治療提供一種新的途徑。具體研究內容如下：
　?。?）基于PbPS的雙親性和自主裝穩(wěn)定性，運用薄膜水化法，制備聚合物載藥納米膠束，并對其性質和形態(tài)進行表征。結果表明，該膠

4、束的粒徑為110nm，分布均一，表面帶負電荷，呈現(xiàn)規(guī)則的呈球形或類球形。同時，由于載體PbPS本身具有pH敏感性，使得PbPS-PM-Ru也能顯示出pH敏感性，即是在弱酸性條件下，PbPS-PM-Ru可以聚合成更大的尺寸，與其在正常的生理條件下（pH7.4）相比，能更快速地釋放大量藥物。此外，該納米膠束的穩(wěn)定性良好，在4℃下存放60 d后，藥物沒有出現(xiàn)明顯泄露。
　?。?）運用MTT實驗檢測了PbPS作為藥物載體的細胞毒性以及模型

5、藥物3P-Ru的體外抗腫瘤活性，并用Hoechst33342/PI雙染色法和流式細胞術對其抗腫瘤機制進行了初步研究。研究表明，PbPS的濃度在100μg/mL以內時，對細胞生長沒有明顯地抑制作用，具有作為藥物載體的潛質。同時，3P-Ru顯示出良好的腫瘤細胞生長抑制作用，且這種抑制作用具有濃度和作用時間依賴性。3P-Ru的抗腫瘤機制實驗分析表明它可能通過誘導細胞凋亡來發(fā)揮抗腫瘤作用。
　?。?）采用組織勻漿和切片實驗探明了PbPS-

6、PM-Ru在正常小鼠內的分布情況，并用非侵入性活體成像檢測了PbPS-PM-Ru對荷瘤小鼠腫瘤部位的靶向作用。實驗結果表明，PbPS-PM-Ru在正常小鼠的各個內臟器官都有分布，且給藥4h后在體內的分布達到高峰；而在荷瘤小鼠中，PbPS-PM-Ru能夠高濃度聚集在腫瘤中，從而實現(xiàn)了對腫瘤的靶向作用。另外，通過給剛接種腫瘤細胞的小鼠靜脈注射PbPS-PM-Ru一星期，發(fā)現(xiàn)接種的部位實體瘤生長緩慢，體積明顯小于生理鹽水（NS）組，也進一步說