pH敏感型雙親嵌段共聚物載藥納米膠束對腫瘤的靶向研究.pdf

1、近年來，腫瘤的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年上升的趨勢，給患者及其家庭帶來極大的痛苦和經(jīng)濟(jì)壓力。目前，通過不斷改進(jìn)治療方式來治愈腫瘤已經(jīng)成為腫瘤治療研究領(lǐng)域的共識。研究表明：腫瘤有著與正常組織不同的微環(huán)境，即腫瘤血管新生、高通透和滯留效應(yīng)（EPR）和胞外pH較正常組織偏酸性等差異，使藥物特異性識別腫瘤成為可能。因此，腫瘤的治療方式正在由傳統(tǒng)的放療和化療轉(zhuǎn)向靶向治療。靶向治療是指利用靶向藥物傳遞系統(tǒng)（TDDS）將藥物特異性遞送到靶組織，使得藥物能夠在靶組

2、織濃集，從而更好發(fā)揮其生物活性以及降低毒副作用。在靶向治療中，TDDS載體的作用至關(guān)重要，它決定了藥物作用的靶控性和有效性。腫瘤靶向治療中的載體往往具有納米尺寸，被稱為納米載體。
　　金屬釕（Ru）配合物具備對正常細(xì)胞毒性低，容易被腫瘤組織吸收等特性，被認(rèn)為是腫瘤治療領(lǐng)域中最具前景的非鉑類金屬，已有其配合物作為抗腫瘤藥物進(jìn)入臨床試驗。本研究選用 pH敏感型雙親嵌段共聚物，即丁二酸酐修飾的聚2-二異丙胺基乙基甲基丙烯酸嵌段聚2-氨基

3、乙基甲基丙烯酸（PDPA-b-PAMA/SA，PbPS），作為難溶性金屬配合物3（1,10-菲啰啉）合釕（3P-Ru）的載體，制備聚合物載藥納米膠束（PbPS-PM-Ru），并探究此納米膠束對腫瘤酸性環(huán)境的靶向作用，以及配合物在體內(nèi)外對腫瘤細(xì)胞生長的抑制作用，為腫瘤治療提供一種新的途徑。具體研究內(nèi)容如下：
　?。?）基于PbPS的雙親性和自主裝穩(wěn)定性，運用薄膜水化法，制備聚合物載藥納米膠束，并對其性質(zhì)和形態(tài)進(jìn)行表征。結(jié)果表明，該膠

4、束的粒徑為110nm，分布均一，表面帶負(fù)電荷，呈現(xiàn)規(guī)則的呈球形或類球形。同時，由于載體PbPS本身具有pH敏感性，使得PbPS-PM-Ru也能顯示出pH敏感性，即是在弱酸性條件下，PbPS-PM-Ru可以聚合成更大的尺寸，與其在正常的生理條件下（pH7.4）相比，能更快速地釋放大量藥物。此外，該納米膠束的穩(wěn)定性良好，在4℃下存放60 d后，藥物沒有出現(xiàn)明顯泄露。
　?。?）運用MTT實驗檢測了PbPS作為藥物載體的細(xì)胞毒性以及模型

5、藥物3P-Ru的體外抗腫瘤活性，并用Hoechst33342/PI雙染色法和流式細(xì)胞術(shù)對其抗腫瘤機(jī)制進(jìn)行了初步研究。研究表明，PbPS的濃度在100μg/mL以內(nèi)時，對細(xì)胞生長沒有明顯地抑制作用，具有作為藥物載體的潛質(zhì)。同時，3P-Ru顯示出良好的腫瘤細(xì)胞生長抑制作用，且這種抑制作用具有濃度和作用時間依賴性。3P-Ru的抗腫瘤機(jī)制實驗分析表明它可能通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來發(fā)揮抗腫瘤作用。
　?。?）采用組織勻漿和切片實驗探明了PbPS-

6、PM-Ru在正常小鼠內(nèi)的分布情況，并用非侵入性活體成像檢測了PbPS-PM-Ru對荷瘤小鼠腫瘤部位的靶向作用。實驗結(jié)果表明，PbPS-PM-Ru在正常小鼠的各個內(nèi)臟器官都有分布，且給藥4h后在體內(nèi)的分布達(dá)到高峰；而在荷瘤小鼠中，PbPS-PM-Ru能夠高濃度聚集在腫瘤中，從而實現(xiàn)了對腫瘤的靶向作用。另外，通過給剛接種腫瘤細(xì)胞的小鼠靜脈注射PbPS-PM-Ru一星期，發(fā)現(xiàn)接種的部位實體瘤生長緩慢，體積明顯小于生理鹽水（NS）組，也進(jìn)一步說