lncRNA AL110200在評(píng)估冠脈阻塞和診斷急性冠脈綜合征方面與心肌標(biāo)志物的比較.pdf

1、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病指冠狀動(dòng)脈發(fā)生粥樣硬化而導(dǎo)致的管腔狹窄或閉塞，導(dǎo)致心肌缺血缺氧或壞死而引起的心臟病，簡(jiǎn)稱冠心病(CHD)。急性冠脈綜合征(ACS)是近年來根據(jù)冠心病發(fā)病特點(diǎn)及其治療原則進(jìn)行分類的兩大分類之一，是臨床上最常見的致死致殘的急性血心管疾病，嚴(yán)重威脅著人類健康。其病理機(jī)制為由于不穩(wěn)定性粥樣硬化性斑塊破裂、糜爛或出血，繼發(fā)血小板聚集或血栓形成導(dǎo)致管腔狹窄程度急劇加重，或冠狀動(dòng)脈發(fā)生痙攣，均可使心肌氧供應(yīng)減少，清除代謝產(chǎn)物也

2、發(fā)生障礙，進(jìn)而導(dǎo)致供氧減少性心肌缺血。
　　研究者們運(yùn)用各種生物學(xué)標(biāo)志物從冠心病的病理生理機(jī)制所涉及的如炎癥、氧化應(yīng)激、心肌損傷等方面闡述并揭示了它們與疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律等方面的相關(guān)性，對(duì)于冠心病乃至急性冠脈綜合征的診斷、病情評(píng)估、危險(xiǎn)分層、預(yù)后判斷等方面的生物標(biāo)記物的研究發(fā)揮了重要作用。
　　自1967年成功發(fā)現(xiàn)肌酸激酶（CK）對(duì)心肌和肌肉病變有顯著的診斷價(jià)值開始[1]，到1976年發(fā)現(xiàn)了對(duì)肌酸激酶同工酶（CK-MB）抗

3、體檢測(cè)的新途徑，再至上世紀(jì)80年代開始對(duì)肌鈣蛋白(cTN)的測(cè)定工作[2]，到近期，2012年8月25日在歐洲心臟病學(xué)會(huì)（ESC）、美國(guó)心臟病學(xué)會(huì)基金會(huì)(ACCF)、美國(guó)心臟協(xié)會(huì)（AHA）、世界心臟聯(lián)盟（WHF）共同制訂的“心肌梗死通用定義”第三版中再次特別強(qiáng)調(diào)了肌鈣蛋白（cTN）因其高度的臨床敏感性和心肌組織特異性而成為首選的生物標(biāo)記物[3]。而且近10年來多位學(xué)者均有發(fā)現(xiàn)心肌肌鈣蛋白 I和肌鈣蛋白 T在急性心肌梗死（AMI）的早期診

4、斷中具有較高靈敏度和較強(qiáng)特異性,可較好地用于AMI與UA的早期診斷與鑒別,兩者臨床使用價(jià)值基本一致,而均優(yōu)于傳統(tǒng)心肌酶 CK-MB，并且AMI早期,cTnI水平變化幅度比cTnT大,顯示出較高的敏感性。發(fā)現(xiàn)并利用冠心病相關(guān)的生物標(biāo)志物來更快速、準(zhǔn)確、早期識(shí)別冠心病高危人群和診斷急性冠脈綜合征及判斷斑塊穩(wěn)定性一直是古往今來的研究熱點(diǎn)。然而不管是CK、CK-MB，還是cTN,陽性反應(yīng)的都是心肌已經(jīng)開始受到損傷后的狀態(tài)，只要有冠脈狹窄所致心肌

5、損傷，相對(duì)其他指標(biāo)都有一定的反應(yīng)，但對(duì)冠狀動(dòng)脈整體情況的評(píng)估不一定靈敏，而且在疾病的發(fā)病之前的早期預(yù)防階段，作用性甚微。目前的心肌標(biāo)志物一般只反映疾病發(fā)生后的某個(gè)環(huán)節(jié)，檢測(cè)具有局限性，篩選新的檢測(cè)指標(biāo)對(duì)冠狀動(dòng)脈狹窄程度進(jìn)行檢測(cè)從而起到未病先防，或者對(duì)癥狀已處于臨床階段的患者進(jìn)行病情的預(yù)先評(píng)估，以初步確定后續(xù)可能的有創(chuàng)檢查及治療手段的合適選取均有重要意義。
　　研究表明，lncRNA能以RNA的形式在多種層面上（表觀遺傳、轉(zhuǎn)錄以及轉(zhuǎn)

6、錄后水平）調(diào)控基因的表達(dá)[4]，參與了劑量補(bǔ)償效應(yīng)[5-7]、基因組印記[8]、細(xì)胞發(fā)育分化等重要生物學(xué)過程。雖然對(duì)lncRNAs功能和作用機(jī)制的研究尚處于起步階段，但已有不少證據(jù)表明lncRNA在腫瘤、神經(jīng)系統(tǒng)疾病、心血管等不同方面的發(fā)生發(fā)展中起重要作用，是當(dāng)前疾病研究熱點(diǎn)之一。國(guó)內(nèi)學(xué)者在基礎(chǔ)研究中通過脂多糖、氧化低密度脂蛋白刺激人單核細(xì)胞研究中發(fā)現(xiàn)，lncRNA AL110200能夠通過調(diào)節(jié)5-脂氧酶（ALOX5）基因的表達(dá)，來促進(jìn)

7、白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子（TNFa）等炎性因子的表達(dá)進(jìn)而促進(jìn)血管炎癥的發(fā)生，并能促進(jìn)單核細(xì)胞趨化因子-1（MCP-1）的分泌而促進(jìn)單核細(xì)胞趨化、黏附，進(jìn)而影響動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)[9]。
　　由此可以推測(cè)lncRNA可能可作為冠狀動(dòng)脈硬化性心臟病領(lǐng)域的新的生物學(xué)標(biāo)記物和治療靶點(diǎn)，在評(píng)估冠脈阻塞情況與診斷急性冠脈綜合癥方面可能有新的突破，因此本研究針對(duì)這個(gè)問題進(jìn)行初步研究和探討，并同目前的心肌標(biāo)志物進(jìn)行比較。
　　

8、目的:
　　1、探究lncRNA AL110200在急性冠脈綜合征患者中表達(dá)水平與心肌標(biāo)志物的比較
　　2、探究lncRNA AL110200在評(píng)估冠脈阻塞情況方面與心肌標(biāo)志物的比較
　　3、探究lncRNA AL110200在診斷急性冠脈綜合征價(jià)值方面與心肌標(biāo)志物的比較
　　方法:
　　按照本研究的納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)收集2015年5月至2016年3月期間于廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院和廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第三醫(yī)院

9、心血管內(nèi)科住院部住院患者167例，其中不穩(wěn)定型心絞痛（UA）患者49例、非ST段抬高型心肌梗死（NSTEMI）患者38例、ST段抬高型心肌梗死（STEMI）患者40例。選取同期非缺血性胸痛患者外周血標(biāo)本40例作為正常組。入院后即予抽取所有患者靜脈血3 mL，采用EDTA抗凝，提取外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）中的總 RNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qRT-PCR）檢測(cè)各樣本lncRNA AL110200表達(dá)水平，將同期血樣

10、本送至檢驗(yàn)科肌酸激酶（CK）、肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）、檢測(cè)肌鈣蛋白I（cTnI）、總膽固醇（CHOL）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）等指標(biāo)，所得數(shù)據(jù)用SPSS22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:
　　1、經(jīng)統(tǒng)計(jì)，UA組、NSTEMI組、STEMI組與正常組入院時(shí)在年齡、性別、吸煙史、糖尿病史、高血壓、總膽固醇、甘油三酯方面無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）；高密

11、度脂蛋白膽固醇在非心肌梗死組（UA/正常組）高于心肌梗死組（NSTEMI/STEMI）（P’<0.05/6），UA組與正常組、NSTEMI組與 STEMI組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P’>0.05/6）；CK、CK-MB、cTNI在心肌梗死組高于非心肌梗死組（P’<0.05/6）， UA組與正常組、NSTEMI組與STEMI組組內(nèi)部之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P’>0.05/6）；lncRNA AL110200相對(duì)表達(dá)量在UA組、NSTEMI組、

12、STEMI組與正常組彼此之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P’<0.05/6），依次為正常組　　2、Gensini評(píng)分與CK之間（rs=0.399，P<0.01）、Gensini評(píng)分與CK-MB之間（rs=0.368， P<0.01）、Gensini評(píng)分與cTNI之間（rs=0.413，P<0.01）均存在著低度的正相關(guān)；Gensini評(píng)分與lncRNA AL110200之間(rs=0.749,P<

13、0.01)存在著中度的正相關(guān)。
　　3、建立受試者工作特征曲線評(píng)估CK、CK-MB、cTNI、lncRNA AL110200對(duì)于急性冠脈綜合征診斷的價(jià)值。發(fā)現(xiàn)CK、CK-MB、cTNI、lncRNA AL110200對(duì)ACS診斷的ROC曲線下面積（AUC）分別為0.758（P＜0.01）、0.758（P＜0.01）、0.893（P＜0.01）、0.960（P＜0.01）。LncRNA AL110200對(duì)ACS的診斷臨界值為4.40

14、*10-3（2－ΔCt值），約登指數(shù)為0.84，敏感度為84.5％，特異度為95%。
　　結(jié)論:
　　1、本實(shí)驗(yàn)中人單核細(xì)胞中l(wèi)ncRNA AL110200在急性冠脈綜合征患者中的表達(dá)水平方面可能比心機(jī)標(biāo)志物更有優(yōu)勢(shì)。
　　2、本實(shí)驗(yàn)中人單核細(xì)胞中l(wèi)ncRNA AL110200在評(píng)估冠脈阻塞情況可能比心肌標(biāo)志物敏感，并且與冠狀動(dòng)脈的阻塞程度可能存在中度的正相關(guān)性。
　　3、本實(shí)驗(yàn)中人單核細(xì)胞中LncRNA AL1