卵巢癌血管內(nèi)皮細(xì)胞化療敏感性相關(guān)基因的篩選.pdf

1、背景與目的：卵巢癌是死亡率最高的女性生殖系統(tǒng)常見惡性腫瘤，約30％-40%的患者經(jīng)腫瘤細(xì)胞減滅術(shù)及多療程化療后仍有殘留腫瘤灶或腫瘤進(jìn)展，且在獲得完全緩解的患者中，仍有半數(shù)以上在短期內(nèi)復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移。因?yàn)槟[瘤的化療敏感性不但與腫瘤細(xì)胞本身的化療敏感性相關(guān)，還與周圍血供狀態(tài)密不可分，本研究旨在探討卵巢癌血管內(nèi)皮細(xì)胞化療藥物處理后基因表達(dá)改變的情況，為調(diào)節(jié)卵巢癌的血管生成機(jī)制提供新的治療方法。
　　材料與方法：使用免疫磁珠從卵巢癌新鮮組織中

2、提取血管內(nèi)皮細(xì)胞，經(jīng)紫杉醇/卡鉑化療藥物處理后，使用寡核苷酸微陣列篩選差異表達(dá)的基因，并且經(jīng)實(shí)時定量 PCR方法及Western-blot擴(kuò)大樣本驗(yàn)證這些基因的變化與紫杉醇/鉑類化療療效的相關(guān)性。
　　結(jié)果：提取的卵巢癌血管內(nèi)皮細(xì)胞體外培養(yǎng)生長良好，融合后呈鋪路石樣改變，有接觸性抑制現(xiàn)象，經(jīng)免疫熒光鑒定證實(shí)其表達(dá)內(nèi)皮細(xì)胞特異性 vWF因子。基因芯片技術(shù)檢測顯示，經(jīng)紫杉醇/卡鉑處理后從4組樣本中共篩選出136個差異表達(dá)基因，其中57

3、個為上調(diào)基因、79個為下調(diào)基因。上調(diào)基因超過5倍的包括MMP-9, SPP1, LOX和 ESM1在內(nèi)的9個基因。下調(diào)基因包括HMGB1, FOS, CAPG, EGFL6, TMEM101, CXCL1和COL3A1在內(nèi)的7個基因。聚類分析顯示差異表達(dá)的基因主要包括與細(xì)胞外基質(zhì)功能、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)、細(xì)胞黏附分子、MAPK信號通路、Toll-樣受體信號通路相關(guān)的基因。經(jīng)體外實(shí)驗(yàn)：PCR技術(shù)及Western-blot，基因芯片檢測結(jié)果與PC