細(xì)胞死亡調(diào)控與食管癌化療敏感性相關(guān)研究.pdf

1、化療藥物誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞死亡,細(xì)胞死亡依據(jù)形態(tài)學(xué)可分為細(xì)胞凋亡、細(xì)胞自嗜性死亡和細(xì)胞壞死。相關(guān)研究表明,細(xì)胞凋亡失調(diào)在腫瘤的發(fā)生發(fā)展及腫瘤對抗癌藥物的敏感性中具有重要的作用。然而細(xì)胞凋亡調(diào)控基因Smac和c-IAP1與食管癌化療敏感性的相關(guān)機(jī)理尚不清楚,有待深入研究。
　　 論文第一部分發(fā)現(xiàn)促凋亡蛋白Smac在食管癌組織中表達(dá)降低(36.8％,25/68,P=0.001),Smac蛋白在晚期食管癌組織的表達(dá)水平與食管癌患者化療療效相

2、關(guān)。而凋亡抑制蛋白c-IAP1在食管癌組織胞漿表達(dá)量增加。依據(jù)食管癌組織中獲得的信息,選擇兩株高表達(dá)Smac的食管癌細(xì)胞系,利用RNAi干擾技術(shù),敲低Smac的表達(dá),顯著增加了細(xì)胞對化療藥物順鉑的耐藥性。分子機(jī)制研究提示,在Smae敲降的食管癌細(xì)胞中,顯著降低CDDP誘導(dǎo)線粒體膜通透性的改變,抑制Cytochrome c蛋白分子自線粒體的釋放,阻滯下游內(nèi)源凋亡通路的活化,抑制了細(xì)胞凋亡。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,Smac缺乏顯著降低了食管癌細(xì)

3、胞對化療敏感性,增加細(xì)胞的耐藥性。同時(shí),高表達(dá)c-IAP1食管癌細(xì)胞經(jīng)CDDP處理后,細(xì)胞通過Smac介導(dǎo)c-IAP1降解,促進(jìn)了細(xì)胞凋亡。利用Smac模擬小分子LBW242有效的增加了低表達(dá)Smac的食管癌細(xì)胞對化療藥物的敏感性。
　　 該研究發(fā)現(xiàn)并揭示了細(xì)胞凋亡調(diào)控基因Smac低表達(dá)與食管癌化療敏感性的密切關(guān)系,可能在食管癌化療敏感性的調(diào)控中發(fā)揮著重要的作用。
　　 論文第二部分首次揭示細(xì)胞壞死調(diào)控關(guān)鍵基因RIP3在

4、食管癌組織中表達(dá)量顯著增加(67.9％,36/53,P=0.001)。在細(xì)胞凋亡失調(diào)的食管癌細(xì)胞系KYSE140中,經(jīng)CDDP處理,細(xì)胞通過RIP3啟動并調(diào)控細(xì)胞壞死,維持了細(xì)胞對化療的敏感性。利用RNAi干擾技術(shù),敲低RIP3的表達(dá),阻斷了KYSE140細(xì)胞壞死通路,顯著增加了KYSE140細(xì)胞對順鉑的耐藥性。分子機(jī)制研究提示,在內(nèi)源缺乏Smac的KYSE140細(xì)胞中,CDDP誘導(dǎo)Caspase-9降解,阻斷了凋亡內(nèi)源途徑的活化；RI

5、P3可誘導(dǎo)表達(dá)通過與代謝相關(guān)的ENO1結(jié)合,促進(jìn)了代謝和ROS的產(chǎn)生,導(dǎo)致細(xì)胞壞死。發(fā)現(xiàn)食管癌細(xì)胞中存在核型的RIP3蛋白表達(dá),可能在調(diào)控CDDP誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡壞死過程中發(fā)揮重要的作用。
　　 該研究首次揭示了RIP3在食管鱗狀細(xì)胞癌的表達(dá)情況,及RIP3所調(diào)控細(xì)胞壞死途徑與食管癌化療敏感性的相關(guān)性。RIP3可能在食管癌化療敏感性的調(diào)控中發(fā)揮著重要的作用
　　 論文第三部分發(fā)現(xiàn)在食管癌細(xì)胞中,利用量子點(diǎn)熒光納米材料偶聯(lián)凋亡

6、誘導(dǎo)因子(AIF)抗體,可對食管癌細(xì)胞內(nèi)的AIF蛋白進(jìn)行特異性標(biāo)記。依據(jù)熒光猝滅原理,揭示偶聯(lián)抗體的量子點(diǎn)較傳統(tǒng)的有機(jī)熒光的光穩(wěn)定性強(qiáng),不易漂白,適合長時(shí)間檢測。同時(shí),發(fā)現(xiàn)直徑5納米的游離量子點(diǎn)在DAPI和紫外的協(xié)同作用下,可進(jìn)入細(xì)胞核,形成穩(wěn)定的細(xì)胞核標(biāo)記。
　　 綜上所述,細(xì)胞凋亡相關(guān)的Smac、c-IAP1基因和細(xì)胞壞死相關(guān)的RIP3基因通過對細(xì)胞死亡通路的調(diào)節(jié),可能在食管癌化療敏感性的調(diào)控中發(fā)揮著重要的作用。量子點(diǎn)納米材