雌、雄激素和維生素D及其受體在甲狀腺結(jié)節(jié)患者血清及甲狀腺組織中的水平.pdf

1、目的:甲狀腺結(jié)節(jié)是臨床中最常見(jiàn)的一種甲狀腺良性病變。其病因目前仍不明了，很可能由多種因素所致，如遺傳、雌激素等。根據(jù)流行病學(xué)結(jié)果顯示，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫患者多為女性，但絕經(jīng)后的女性與相同年齡階段的男性甲狀腺結(jié)節(jié)的發(fā)病率是類(lèi)似的，并且隨著年齡的增加而增加。另外，研究已初步確定，雌激素對(duì)甲狀腺癌細(xì)胞有促增殖的作用。據(jù)此推斷，結(jié)節(jié)性甲狀腺腫的發(fā)病可能與雌激素水平有關(guān)。然而，男性和絕經(jīng)后的女性，他們的結(jié)節(jié)形成與雌激素水平有關(guān)嗎？
　　雄激素是

2、性激素中的另一種甾體激素，也通過(guò)其專(zhuān)一的受體介導(dǎo)發(fā)揮多種生物學(xué)效應(yīng)，也是雌激素合成的前體。研究表明，雄激素受體在甲狀腺癌組織中的陽(yáng)性率為42.5％，提示雄激素可能在甲狀腺結(jié)節(jié)的發(fā)生中起一定作用。這與甲狀腺結(jié)節(jié)的生成有關(guān)嗎？
　　維生素D是脂溶性維生素，為開(kāi)環(huán)甾體激素。研究證實(shí)，維生素D有促甲狀腺細(xì)胞凋亡的作用，自身免疫性甲狀腺疾病與維生素D缺乏有關(guān)。維生素D缺乏與甲狀腺結(jié)節(jié)的發(fā)生有關(guān)嗎？
　　為確定上述因素與甲狀腺結(jié)節(jié)的生成

3、是否有關(guān)，本實(shí)驗(yàn)以男性、絕經(jīng)前和絕經(jīng)后女性甲狀腺結(jié)節(jié)患者作為研究對(duì)象，測(cè)定其外周血以及結(jié)節(jié)組織與結(jié)節(jié)旁正常組織中的雌二醇(E2)，雌激素受體（ERα，ERβ）、雄激素受體(AR)，維生素D受體(VDR)的水平，血清中甲狀腺功能指標(biāo)、雌二醇(E2)、雄激素睪酮(T)及25-羥基維生素D的水平（代表維生素D的水平），探討這些因素與甲狀腺結(jié)節(jié)形成的關(guān)系，為預(yù)防和治療該種疾病提供實(shí)驗(yàn)的依據(jù)。
　　方法:
　　1、取材和分組
　

4、　本實(shí)驗(yàn)所用標(biāo)本取自河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院腺體外科2014年5月至8月手術(shù)切除的甲狀腺腫物的組織。將經(jīng)病理診斷為甲狀腺結(jié)節(jié)的標(biāo)本，分為結(jié)節(jié)和結(jié)節(jié)旁正常組織，分別置于凍存管中，凍于-80℃冰箱中，用于E2、ERα，ERβ，AR、和VDR的測(cè)定。同時(shí)采集甲狀腺腫物患者術(shù)前的空腹血清，用于甲狀腺功能、睪酮、雌二醇、25-羥基維生素D的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組、血清三者均取自同一名患者的標(biāo)本。
　　2、血清中甲狀腺功能的測(cè)定
　　采用直接

5、化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清中FT3、FT4、TSH濃度。
　　3、血清中睪酮及雌二醇的測(cè)定
　　采用化學(xué)發(fā)光法，用美國(guó)貝克曼庫(kù)爾Unicel Dxi800 Access免疫分析系統(tǒng)儀器測(cè)定血清睪酮(T)及雌二醇(E2)含量。
　　4、血清中25羥基維生素D的測(cè)定
　　采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)，用Immunodiagnosticsytems生產(chǎn)的25-羥基維生素D測(cè)定試劑盒，在美國(guó)BIO-TEK ELx800酶

6、標(biāo)儀上，測(cè)定血清中25-羥基維生素D的含量。
　　5、甲狀腺組織中E2、AR、VDR、ERα、ERβ的測(cè)定
　　采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法(ELISA)，用武漢優(yōu)爾生生物工程有限公司生產(chǎn)的雌二醇(E2)檢測(cè)試劑盒、雄激素受體(AR)檢測(cè)試劑盒、維生素D受體(VDR)檢測(cè)試劑盒，雌激素受體(ERα、ERβ)檢測(cè)試劑盒，在美國(guó)BIO-TEK的ELx800酶標(biāo)儀上，測(cè)定結(jié)節(jié)組織及結(jié)節(jié)旁正常組織中的E2、AR、VDR、ERα、ERβ的含

7、量。
　　6、數(shù)據(jù)分析
　　實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS21.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。數(shù)據(jù)經(jīng)檢驗(yàn)，均不符合正態(tài)分布，因此計(jì)量資料采用中位數(shù)（最小值，最大值）表示，組間差異采用秩和檢驗(yàn)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。相關(guān)性使用Spearman秩相關(guān)分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、一般資料
　　42例甲狀腺組織結(jié)節(jié)標(biāo)本及結(jié)節(jié)旁正常組織標(biāo)本，均為成對(duì)標(biāo)本。女性33例，年齡16-71歲，分為

8、絕經(jīng)前女性組（14例）和絕經(jīng)后女性組(19例);男性9例，年齡18-83歲，為男性組。
　　2、血清中甲狀腺功能
　　因患者血清FT3、FT4、TSH濃度均在正常范圍，所有患者甲狀腺功能正常。
　　3、甲狀腺結(jié)節(jié)患者的血清中睪酮、雌二醇以及25-羥基維生素D水平
　　3.1血清中睪酮(T)水平
　　患者血清睪酮水平均在其正常值范圍。男性為[2.88(0.047.03)ng/ml]，絕經(jīng)前女性睪酮水平[0.3

9、1(0.130.77) ng/ml]和絕經(jīng)后女性睪酮水平[0.23(0.042.77)ng/ml]。經(jīng)單樣本秩和檢驗(yàn)，男性較女性高(Z=-3.051，P=0.002)，絕經(jīng)前較絕經(jīng)后的高（Z=-2.023，P=0.043）。
　　3.2血清中雌二醇(E2)水平
　　經(jīng)單樣本秩和檢驗(yàn)，患者血清雌二醇水平:男性為[25(1678)pg/ml]在其正常范圍(7.63-42.6)pg/ml，低于絕經(jīng)前女性雌二醇水平[39(20253

10、)pg/ml，P＜0.05]，但與絕經(jīng)后女性雌二醇水平[23(1137) pg/ml]無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;絕經(jīng)前和絕經(jīng)后水平均在其正常值范圍內(nèi)。
　　3.3血清中25-羥基維生素D(25-OH-Vit D)水平
　　經(jīng)單樣本秩和檢驗(yàn)，患者血清25-羥基維生素D水平:男性為[49.01(26.4181.71)nmol/L]，絕經(jīng)前女性25羥基維生素D含量為[40.88(19.2377.96) nmol/L];絕經(jīng)后女性25羥基維生素

11、D水平為[23(19.30122.51)nmol/L]。三者之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。三組甲狀腺結(jié)節(jié)患者均為維生素D缺乏狀態(tài)。
　　4、甲狀腺結(jié)節(jié)患者甲狀腺組織中雌二醇(E2)雌激素受體（ERα，ERβ）水平
　　4.1甲狀腺組織中雌二醇(E2)水平
　　男性結(jié)節(jié)組E2水平[11.17(9.8415.03)pg/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中E2水平[4.16(3.006.02) pg/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.58

12、，P＜0.01)。
　　絕經(jīng)前女性結(jié)節(jié)組E2水平[12.05(8.9821.67) pg/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中E2水平[3.96(2.645.61)pg/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-4.5，P＜0.001)。
　　絕經(jīng)后女性結(jié)節(jié)組E2水平[11.38(5.1715.75)pg/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中E2水平[4.18(2.626.98) pg/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-5.153，P＜0.001)

13、。
　　4.2甲狀腺組織中雌激素受體α(ERα)水平
　　男性結(jié)節(jié)組ERα水平[23.41(20.9431.23) ng/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中ERα水平[18.51(14.6820.76)ng/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（(Z=3.576，P＜0.001)。
　　絕經(jīng)前女性結(jié)節(jié)組ERα水平[24.28(18.0930.51) ng/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中ERα水平[3.96(2.645.61)ng/ml]，

14、兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-4.044,P＜0.001)。
　　絕經(jīng)后女性結(jié)節(jié)組ERα水平[24.73(17.4851.48)ng/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中ERα水平[17.34(12.0523.32) ng/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-4.511，P＜0.001）。
　　4.3甲狀腺組織中雌激素受體β(ERβ)水平
　　男性結(jié)節(jié)組ERβ水平[13.85(11.6123.85)ng/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中

15、ERβ水平[9.62(6.9411.44)ng/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.58，P＜0.001)。
　　絕經(jīng)前女性結(jié)節(jié)組ERβ水平[13.72(9.3122.62) pg/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中ERβ水平[9.11(7.2012.83)ng/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-4.043，P＜0.001)。
　　絕經(jīng)后女性結(jié)節(jié)組ERβ水平[15.25(8.8547.44) pg/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中E

16、Rβ水平[8.75(5.3313.78) pg/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-4.54，P＜0.001)。
　　5、甲狀腺結(jié)節(jié)患者甲狀腺組織中雄激素受體(AR)水平
　　男性結(jié)節(jié)組AR水平[4.69(3.075.23) ng/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中AR水平[2.71(1.703.72) ng/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.046，P=0.002)。
　　絕經(jīng)前女性結(jié)節(jié)組AR水平[4.53(3.495

17、.25)ng/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中AR水平[2.95(2.283.66)ng/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-4.227，P＜0.001)。
　　絕經(jīng)后女性結(jié)節(jié)組AR水平[4.75(3.195.69) ng/ml]高于結(jié)節(jié)旁正常組織中AR水平[2.99(2.073.95) ng/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-4.818，P＜0.001)。
　　6、甲狀腺結(jié)節(jié)患者甲狀腺組織中維生素D受體(VDR)水平
　

18、　男性結(jié)節(jié)組VDR水平[2.58(2.243.46)ng/ml]低于結(jié)節(jié)旁正常組織中VDR水平[4.27(3.648.40)ng/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-3.576，P＜0.001)。
　　絕經(jīng)前女性結(jié)節(jié)組VDR水平[2.66(1.913.00) ng/ml]低于于結(jié)節(jié)旁正常組織中VDR水平[4.30(3.4110.41)ng/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-4.503，P＜0.001)。
　　絕經(jīng)后女性結(jié)節(jié)

19、組VDR水平[2.61(2.213.83)ng/ml]低于結(jié)節(jié)旁正常組織中VDR水平[4.44(3.3712.52) ng/ml]，兩者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-5.153,P＜0.001)。
　　結(jié)論:
　　1、甲狀腺結(jié)節(jié)局部的高E2水平以及高ERα和ERβ水平與結(jié)節(jié)的發(fā)生有關(guān)。
　　2、甲狀腺結(jié)節(jié)局部的高AR水平可能與甲狀腺結(jié)節(jié)的形成有關(guān)。
　　3、維生素D的缺乏以及甲狀腺結(jié)節(jié)局部的低VDR水平與甲狀腺結(jié)節(jié)的形