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文檔簡介
1、目的:通過建立大鼠內(nèi)毒素所致肺損傷模型,探討小潮氣量機械通氣預(yù)處理對大鼠內(nèi)毒素所致急性肺損傷的影響,并闡明其可能相關(guān)機制。
方法:成年雄性S-D大鼠48只,8~12周齡,體重250~300 g,采取隨機數(shù)字表法,將其分為4組(n=12): sham組:腹腔注射0.9%生理鹽水0.5ml; MV-saline組:先進行機械通氣預(yù)處理1h,通氣結(jié)束后予以0.9%生理鹽水0.5ml腹腔注射;LPS組:大鼠腹腔注射脂多糖(LPS)溶液
2、0.5ml; MV-LPS組:先進行機械通氣預(yù)處理1h,通氣結(jié)束后予以LPS溶液0.5ml腹腔注射。所有大鼠術(shù)前均采用2%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,術(shù)中機械通氣參數(shù)設(shè)置均為潮氣量6 ml/kg、 PEEP=0mmHg、頻率40次/分、I∶E=1∶2、吸入氣體為空氣,術(shù)中腹腔注射的LPS溶液的劑量均為40 mg/kg。所有動物在完成腹腔注射6h后,統(tǒng)一放血處死并收集組織標(biāo)本。取肺組織后,測定肺組織濕/干重比(W/D比)、伊文思藍染料滲透率,
3、觀察肺組織病理學(xué)改變,行肺損傷評分。使用ELISA法測定支氣管肺泡灌洗液(BALF)中腫瘤壞死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β及IL-6的濃度,使用TUNEL染色法測定肺組織細胞凋亡指數(shù)(AI)、使用免疫組織化學(xué)和Western bolt方法測定肺組織中ROCK1蛋白的表達,使用RT-PCR法測定肺組織中RhoA mRNA、ROCK2 mRNA的表達。
結(jié)果:與sham組比較,LPS組、MV-LPS組大鼠肺組織損傷評分
4、、W/D比值、AI值、肺組織伊文思藍染料滲透率及BALF中炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6的濃度明顯升高(P<0.05);與sham組比較,LPS組、MV-LPS組大鼠肺組織中RhoA mRNA、ROCK2 mRNA及ROCK1蛋白的表達明顯上調(diào)(P<0.05);與LPS組比較,MV-LPS組大鼠肺組織損傷評分、W/D比值、AI值、肺組織伊文思藍染料滲透率及BALF中炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6濃度明顯下降(P<0.
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