版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶(hù)提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、七鰓鰻是無(wú)頜類(lèi)脊椎動(dòng)物的代表,它的進(jìn)化地位處于無(wú)脊椎動(dòng)物與脊椎動(dòng)物之間,它有著獨(dú)特的進(jìn)化地位和可變淋巴受體VLR介導(dǎo)的適應(yīng)性免疫的防御體系,所以受到免疫學(xué)家的注意。VLR介導(dǎo)的適應(yīng)性免疫系統(tǒng)分為3種不同的亞型(VLRA、VLRB、VLRC),七鰓鰻的VLRB細(xì)胞更接近于B淋巴細(xì)胞,VLRA、VLRC細(xì)胞接近于T淋巴細(xì)胞。因此對(duì)于VLRB的研究具有深刻的意義。
本文構(gòu)建了七鰓鰻pColdⅠ-VLRB原核重組表達(dá)質(zhì)粒,并進(jìn)行純化得
2、到高純度的重組包涵體蛋白,作為抗原進(jìn)行免疫。制備特異性和效價(jià)較高的抗七鰓鰻VLRB兔多克隆抗體,VLRB多抗的制備為后續(xù)的功能實(shí)驗(yàn)提供了便利的條件。文章還構(gòu)建了七鰓鰻pIRES2-AcGFP1-Nuc-VLRB真核重組表達(dá)質(zhì)粒,并通過(guò)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法,將VLRB的真核重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到哺乳細(xì)胞293T細(xì)胞中,通過(guò)免疫熒光的方法確定VLRB在293T細(xì)胞的胞漿中表達(dá),用WB的方法確定VLRB表達(dá)于293T細(xì)胞的分泌液中,收集轉(zhuǎn)染72h后的細(xì)胞
3、分泌液經(jīng)過(guò)親和層析純化的方法,獲得了可溶的VLRB蛋白,為VLRB后續(xù)功能的研究排除了原核表達(dá)沒(méi)有轉(zhuǎn)錄后修飾和包涵體表達(dá)等對(duì)VLRB功能的影響。通過(guò)WB、免疫組化、免疫熒光等方法鑒定了VLRB在七鰓鰻組織中的表達(dá)情況與定位分析,結(jié)果顯示VLRB在血清、類(lèi)淋巴細(xì)胞、腸、肝、腎、鰓、神經(jīng)軸體、心臟等組織中都有表達(dá),且VLRB在鰓、神經(jīng)軸體、腎等組織中的表達(dá)量相對(duì)較高。用LPS抗原刺激七鰓鰻機(jī)體后在肝臟、腸、鰓等組織中VLRB的表達(dá)量與刺激前
4、比較出現(xiàn)了顯著性的差異,結(jié)果表明VLRB可能是七鰓鰻行使免疫功能的重要參與者。通過(guò)驗(yàn)證VLRB對(duì)MCF-7細(xì)胞、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌沒(méi)有殺傷作用,此結(jié)果可能說(shuō)明VLRB不能直接參與殺傷功能,通過(guò)鑒定VLRB與C1q和C3,intelectin免疫分子都存在相互作用,可能說(shuō)明VLRB協(xié)同這些免疫分子行使免疫功能。
綜上所述可知在七鰓鰻中VLRB不能直接參與病原體殺傷功能,它可能是通過(guò)與其它分子共同作用協(xié)同行使免疫功能,這為我
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶(hù)所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒(méi)有圖紙預(yù)覽就沒(méi)有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶(hù)上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶(hù)上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶(hù)因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 37451.盲鰻、七鰓鰻、有頜類(lèi)的進(jìn)化關(guān)系和重組蛋白活性鑒定
- 日本七鰓鰻VLRB基因的克隆、原核表達(dá)及單克隆抗體制備的研究.pdf
- 重組七鰓鰻RGD肽抗血栓藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 重組日本七鰓鰻口腔腺分泌L251蛋白表達(dá)純化及活性鑒定.pdf
- 七鰓鰻進(jìn)食前后口腔腺比較蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf
- 15490.日本七鰓鰻組織蛋白酶l的克隆表達(dá)及功能分析
- 七鰓鰻血清中殺菌蛋白質(zhì)LIP的分離及其作用機(jī)制研究.pdf
- 重組七鰓鰻LIP對(duì)腫瘤細(xì)胞殺傷機(jī)制——基于胞內(nèi)信號(hào)通路研究.pdf
- 31153.三種重組七鰓鰻rgd毒素蛋白對(duì)hela、hepg2細(xì)胞的活性影響
- 41007.重組日本七鰓鰻口腔腺分泌l250蛋白基因克隆及hrf活性鑒定
- 日本七鰓鰻Tec的基因編碼區(qū)克隆、重組表達(dá)及相關(guān)免疫學(xué)研究.pdf
- 重組日本七鰓鰻GRIM19基因的克隆及其對(duì)腫瘤細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo).pdf
- 日本七鰓鰻唾液腺分泌蛋白的組分分析與鑒定.pdf
- 重組日本七鰓鰻TCTP的生物信息學(xué)分析,組織表達(dá)及活性初探.pdf
- 基于WLC模型的七鰓鰻神經(jīng)系統(tǒng)研究.pdf
- 重組日本七鰓鰻rLj-RGD3與其五種突變體蛋白抗血管新生活性的比較.pdf
- 重組日本七鰓鰻rLj—RGD3與其突變體蛋白類(lèi)HRG的抗血管新生與抗真菌活性.pdf
- 重組七鰓鰻LIP分子對(duì)腫瘤細(xì)胞殺傷機(jī)制——基于細(xì)胞膜靶點(diǎn)的探究.pdf
- 日本七鰓鰻Fyn-like的基因編碼區(qū)克隆、重組表達(dá)以及相關(guān)免疫學(xué)研究.pdf
- 太平洋七鰓鰻遺傳多樣性的分析.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論