TUBB3、STMN1與BRCA1的表達水平與胃癌治療藥物的關聯(lián)性及機制研究.pdf

1、目的：探討3型β微管蛋白（Tubulin beta3，TUBB3）、微管不穩(wěn)定性蛋白（Stathmin1，STMN1）、腺癌癌易感基因(Breast cancer1，BRCA1)在胃癌和癌旁組織中的表達，分析其與臨床病理參數的相關性；探討參芪扶正注射液(shenqifuzheng injection，SFI)和多西他賽（docetaxel，TXT）對胃癌BGC-823細胞系的影響及作用機制。
　　方法：
　　(1)免疫組織化

2、學 Elivision法檢測54例胃癌組織和20例的相應癌旁組織中TUBB3、STMN1與BRCA1蛋白表達，分析其相關性。
　　(2)CCK8法檢測不同濃度SFI（5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml、40mg/ml、80mg/ml）、不同濃度TXT（3.75mg/L、7.5mg/L、15mg/L、30mg/L、60mg/L）及7.5 mg/L TXT聯(lián)合不同濃度SFI（5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml、40

3、mg/ml、80mg/ml）作用不同時間（24h、48h及72h）對BGC-823細胞增殖的影響。
　　(3)不同濃度SFI（5mg/ml、20mg/ml、80mg/ml）、不同濃度TXT（3.75mg/L、15mg/L、60mg/L）及7.5mg/L TXT聯(lián)合不同濃度SFI（5mg/ml、20mg/ml、80mg/ml）作用于BGC-823細胞48h后，流式細胞儀檢測細胞周期的變化。
　　(4)逆轉錄多聚酶鏈反應(RT-

4、PCR)法檢測胃癌細胞對照組和加藥組中TUBB3mRNA、STMN1mRNA、BRCA1mRNA基因的表達。
　　結果：
　　(1)54例胃癌組織和20例相應癌旁組織中BRCA1、STMN1和TUBB3蛋白的陽性表達率胃癌組織高于癌旁組織；胃癌中STMN1蛋白與胃癌患者病理的分化程度有關，而BRCA1與TUBB3蛋白與胃癌患者的臨床病理特征無相關性；其中只有STMN1和TUBB3蛋白在胃癌組織中的表達有一定的相關性（r=0.

5、276，P<0.05）。
　　(2)多西他賽或參芪扶正注射液都能抑制BCG-823細胞的增殖，隨著藥物濃度的升高，作用時間的延長，BGC-823細胞增殖抑制率逐漸增大，與陰性對照組比較有統(tǒng)計學意義(P均<0.05)；與對照組相比，隨著藥物作用時間（24h,48h和72h）的延長，多西他賽（7.5mg/L）與不同濃度參芪扶正注射液聯(lián)合作用，細胞的增殖抑制率逐漸增大(P均<0.01)，但與藥物濃度沒有明顯的關系(P>0.05)。

6、>　　(3)不同濃度的多西他賽或參芪扶正注射液抑制細胞增殖阻滯細胞于G2/M或S期，與對照組比較均有統(tǒng)計學意義（P均<0.05）；不同濃度參芪扶正注射液與多西他賽（7.5mg/L）聯(lián)合后抑制細胞增殖細胞阻滯于G2/M期，與對照組比較也均有統(tǒng)計學意義（P均<0.05）。
　　(4)與對照組相比，加藥組TUBB3與STMN1mRNA的表達量均低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P均<0.05）；而BRCA1mRNA表達量加藥組與對照組無明顯