東亞三角渦蟲(chóng)DjSparc-like基因的進(jìn)化、表達(dá)以及功能分析.pdf

1、東亞三角渦蟲(chóng)(Dujesiajaponica)是扁形動(dòng)物門的代表動(dòng)物。由于其在動(dòng)物演化的歷史進(jìn)程中處于特殊的演化地位，和極強(qiáng)的再生能力，為我們研究動(dòng)物起源、進(jìn)化、胚胎發(fā)育及干細(xì)胞分子機(jī)理等提供了優(yōu)良材料。SPARC是細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix，ECM)非膠原糖蛋白中的一種鈣結(jié)合蛋白，廣泛分布于從線蟲(chóng)到脊椎動(dòng)物各種動(dòng)物的組織中，它的生理功能涉及發(fā)育、組織重塑、細(xì)胞更新及組織修復(fù)等多個(gè)方面。本文利用生物信息學(xué)方法和分

2、子生物學(xué)手段，研究渦蟲(chóng)DjSparc-like基因的結(jié)構(gòu)、表達(dá)情況和功能，可以揭示渦蟲(chóng)DjSparc-like基因在發(fā)育、再生和整體中的功能，有助于我們從分子水平上來(lái)了解動(dòng)物再生的機(jī)理和調(diào)控。本文對(duì)DjSPARC-like基因的發(fā)育及再生過(guò)程中基因的表達(dá)及再生過(guò)程中基因定量和功能方面進(jìn)行了研究。 從東亞三角渦蟲(chóng)文庫(kù)中分離的克隆N362，DjSparc-like基因的cDNA編碼的最大開(kāi)放閱讀框(ORF)為783bp，由261個(gè)氨

3、基酸組成。經(jīng)生物信息學(xué)分析表明，該蛋白具有SPARC蛋白的保守結(jié)構(gòu)域。利用該基因編碼的氨基酸殘基組成的蛋白進(jìn)行進(jìn)化樹(shù)分析，表明東亞三角渦蟲(chóng)DjSparc-like位于無(wú)脊椎動(dòng)物分枝的基部，脊椎動(dòng)物和無(wú)脊椎動(dòng)物各自聚群，進(jìn)一步證明DjSPARC-like基因與SPARC的同源性，推測(cè)DjSparc-like基因可能是動(dòng)物Sparc的原型。 通過(guò)整體原位雜交和RT-PCR等技術(shù)研究該基因在渦蟲(chóng)體內(nèi)的表達(dá)情況。胚胎原位雜交結(jié)果表明該基